水溶性壳聚糖对体外培养成纤维细胞生长及表型的影响(英文)

背景:研究表明壳聚糖可间接促进成纤维细胞的增生和胶原的合成。利用壳聚糖和特定的成纤维细胞一起构建肌腱损伤修复的组织工程材料,以期在促进损伤修复的同时防止粘连。目的:观察水溶性壳聚糖对3T3TK成纤维细胞生长及表型的影响。设计:观察对照实验。单位:九江学院医学院。材料:3T3TK成纤维细胞由中国科学院细胞库提供。水溶性壳聚糖(规格:60目、30CPS,济南海得贝海洋生物工程有限公司),DMEM(低糖)(美国GIBCO公司),胎牛血清(杭州四季青生物工程研究所),青霉素、链霉素(美国Biosharp公司),胰蛋白酶(北京博大泰克生物基因技术有限责任公司)。方法:实验于2004-11/2006-04在九江学院医学科研中心的系统生物学临床应用实验室(江西省高校重点实验室)完成。①常规培养3T3TK成纤维细胞至对数生长期,制成单细胞悬液,接种96孔板,共设5组,每组5孔,共25孔,每孔加细胞悬液200μL,培养24h后弃上清,前4组各孔分别加入含不同浓度壳聚糖的DMEM培养液200μL,壳聚糖终浓度分别为1,0.1,0.01,0.001g/L,第5组为阴性对照组,加不含壳聚糖的DMEM培养液,采用CellTilter-GloTM细胞活力测试盒检测不同浓度壳聚糖对成纤维细胞活力的影响。②常规培养细胞至对数生长期,制成单细胞悬液,接种24孔板,共设4组,前3组每孔分别加入含1,0.1,0.01g/L壳聚糖的DMEM培养液1mL,第4组为阴性对照组。采用羟脯氨酸、碱性磷酸酶试剂盒分别检测细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量。主要观察指标:①水溶性壳聚糖对体外培养成纤维细胞活力影响。②细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量。结果:①细胞活力检测结果:不同浓度壳聚糖组与阴性对照组相比,细胞活力差异均无统计学意义(P>0.05)。②细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量:1g/L和0.1g/L浓度壳聚糖组细胞培养上清液中的羟脯氨酸含量分别为(7.598±0.770),(8.366±0.308)mg/L,高于阴性对照组[(11.269±0.707)mg/L,P<0.01];胶原含量分别为(56.703±5.748),(62.437±2.301)mg/L,低于阴性对照组[(84.099±5.280)mg/L,P<0.01]。,随壳聚糖浓度的上升,胶原含量下降,呈剂量依赖。与阴性对照组相比,各浓度壳聚糖组细胞培养上清液中碱性磷酸酶活性均无显著差异(P>0.05)。结论:水溶性壳聚糖并不明显抑制3T3TK成纤维细胞的活力,但能使其分泌胶原的量显著减少,提示壳聚糖具有作为肌腱修复的组织工程材料,并抑制肌腱修复中粘连形成的潜力。

自制诱导型人工骨材料修复兔颅骨缺损实验研究

目的观察自制诱导型人工骨材料在兔颅骨缺损修复中的作用。方法选取健康成年新西兰大白兔,随机分成实验材料组(自制诱导型人工骨材料,M组)、实验对照组(同种异体冻干骨,B组)和空白对照组(N组)。制备双侧颅顶骨8 mm的骨缺损,分别植入相应材料。术后采取大体观察、血液化验、骨磨片组织形态观察及荧光双标记示踪等方法进行检测。结果大体观察、骨磨片组织形态观察及荧光双标记示踪等提示M组材料植入后缺损区有明显新骨生长,B组有新骨生长,但M组较少,N组新骨生长不明显。外周血液检查显示M组LYM%与B组、N组比较差异无统计学意义。M组不同时间点血总蛋白、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶及血钙等与N组比较差异均无统计学意义。尿素氮检测在16周虽然与N组差异有统计学意义,但是其数值在正常范围,提示对肾功能无影响。结论自制诱导型人工骨植入机体后持续促进新骨生长,诱导成骨效果强于同种异体冻干骨,且在体内有较好的生物相容性。

鞘内注射神经生长因子对大鼠痛阈、脊神经节脊髓后角CGRP免疫反应的影响

目的:研究鞘内注射神经生长因子(NGF)后,对大鼠痛阈、脊神经节及脊髓后角降钙素基因相关肽(CGRP)免疫反应的影响。方法:将36只大鼠分为实验组及对照组,分别进行鞘内注射NGF和生理盐水。测定大鼠痛阈,同时采用免疫组化方法,比较两组脊神经节及脊髓后角CGRP的反应强度。结果:实验组的痛阈低于对照组,CGRP免疫反应强度强于对照组。结论:鞘内注射神经生长因子后,可引起大鼠痛阈降低,脊神经节及脊髓后角CGRP免疫反应增强。

护理本科《系统解剖学》实施双语教学的效果调查及对策探讨

为了解我校两年来对护理本科班系统解剖学课程实施双语教学改革后教学的效果及学生对该课程实施双语教学的态度、看法和要求情况，我们进行了《系统解剖学》双语教学的测试和效果调查，并提出了相应的对策，以便今后进一步开展双语教学工作。

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛治疗现状

脑血管痉挛是蛛网膜下腔出血的严重并发症,探索有效的治疗方法对改善患者的预后有着重要的意义。研究表明,钙离子拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、抗CD11/CD18单克隆抗体、脑脊液引流和基因治疗等是新的有效治疗措施。

水溶性壳聚糖对3T_3TK成纤维细胞生长及表型的影响

目的：本研究利用成纤维细胞作为肌腱修复组织工程的种子细胞,采用可降解的壳聚糖作为生物材料,明确水溶性壳聚糖对3T3TK成纤维细胞生长及表型的影响,为后续研究奠定基础。方法：3T3TK成纤维细胞常规培养,采用CellTilter-GloTM细胞活力测试盒检测不同浓度壳聚糖对成纤维细胞活力的影响；运用羟脯氨酸、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测细胞培养上清液的胶原含量与碱性磷酸酶的含量。结果：不同浓度壳聚糖组与阴性对照组相比,其发光信号值均无显著差异(P＞0．05)；0．1%和0．01%浓度壳聚糖组细胞培养上清液中的羟脯氨酸含量以及胶原含量与阴性对照组相比均有显著差异(P＜0．01),随壳聚糖浓度的上升,胶原含量下降,呈剂量依赖；与阴性对照组相比,各浓度壳聚糖组细胞培养上清液中ALP活性均无显著差异。结论：水溶性壳聚糖并不明显抑制3T_3TK成纤维细胞的活力,但能使其分泌胶原的量显著减少,提示壳聚糖具有作为肌腱修复的组织工程材料,并抑制肌腱修复中粘连形成的潜力。

糖皮质激素对大鼠痛阈、脊神经节和脊髓后角CGRP免疫反应的影响

目的 :研究糖皮质激素 (GC)过量 耗竭后 ,对大鼠痛域、脊神经节和脊髓后角降钙素基因相关肽 (CGRP)免疫反应的影响。方法 :将 16只大鼠分为地塞米松 (DEX)组和糖皮质激素 (GC)耗竭组 ,分别腹腔注射应急量DEX和预先切除双肾上腺后经胃管给予Ru 486糖皮质激素受体拮抗剂 ;测定大鼠痛阈 ,同时采用免疫组化方法 ,观察两组脊神经节及脊髓后角CGRP的反应强度。结果 :DEX组 ,痛阈升高 ,L4 、L5脊神经节CGRP免疫反应阳性细胞数为 17 3 0± 0 5 2 ,细胞体染色平均光密度值 (OD)为 0 15 76± 0 0 0 62 ,脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应阳性纤维OD值为 0 13 0 1± 0 .0 0 11;GC耗竭组 ,痛阈降低 ,L4 、L5脊神经节CGRP免疫反应阳性细胞数为 3 2 83±0 49,细胞体染色OD值为 0 3 12 2± 0 0 0 45 ,脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应阳性纤维OD值为 0 2 65 8±0 0 0 80。结论 :糖皮质激素过量时 ,大鼠痛阈升高 ,脊神经节和脊髓后角CGRP免疫反应减弱 ;而糖皮质激素耗竭后 ,大鼠痛阈降低 ,脊神经节和脊髓后角CGRP免疫反应增强 。

神经生长因子与痛温觉过敏

１９５１年σ０χ－３２８ξ０πχ２χ发现，交感神经节移植物的神经纤维与肉瘤细胞共同培养时被刺激生长，并显示“晕”效应［１］，肉瘤细胞所释放的活性物质以后被证实为神经生长因子（σ６０συ６３１８φτξπ８３６，ΥΤ）。近十年来，又发现ΥΤ与躯...

自制BMPs活性蛋白的异位诱导成骨实验研究

目的检测自制牛骨形态发生蛋白(BMPs)活性蛋白异位成骨能力及其生物相容性。方法将自制BMPs蛋白植入小鼠肌袋内,X线观察植入部位的钙化情况,然后取材固定并染色,镜下观察材料周围肌肉中的成骨情况。结果 BMPs植小鼠肌袋后在植人材料周围均未见红肿、破溃等反应,显示其具有良好的生物相容性;BMPs植入后4周有明显骨样组织形成,8周有完整的骨组织形成。结论自制牛BMPs活性蛋白可在小鼠异位诱导成骨,并具有良好的生物相容性。

农村定向免费医学生专业认知现状及其影响因素的实证研究

定向免费医学生培养是专门针对农村基层培养医学人才的医学教育方式。通过对江西省4所医学院校1011名农村定向免费医学生的实证调查研究发现,农村定向免费医学生普遍存在专业思想不稳定、自身职业定位不明确、对服务基层的信念不坚定等现象。为确保人才培养质量,必须加强定向医学生职业生涯规划教育及社区实践教育,加强后期培养,切实采取措施完善农村定向免费医学生培养模式。

农村居民健康状况及卫生服务需求分层整群抽样调查

目的了解我国农村居民的健康状况、卫生服务需求现状及其存在的问题,探索提高我国农村居民健康水平的措施和方法,为培养适合我国城乡社区需求的适宜卫生人才提供依据。方法采用分层整群抽样的方法,在全国东西南北中的13省(直辖市、自治区)26个县(市)52个村中抽取1200户共计4190人进行入户调查。结果居民两周病伤率为27.92%。在两周病伤者中,有32.72%的患者选择找医生看病,有20.46%不采取任何措施,在患病后未采取措施的原因中,大多数患者认为病情较轻,占78.83%,其次是"经济困难",占36.49%;居民半年慢性病患病率为24.86%,其中以腰腿疼痛的患病率最高,占7.75%,其次为高血压,占5.48%;居民一年内在乡级卫生院就诊率为43.91%,在村卫生所就诊率为61.54%;居民患病后去卫生机构和找医生看病的占69.97%,采取"不理会"的占8.39%,自己买药吃的占20.77%;患病后就诊医疗机构首选"离家近"的占60.98%,其次是"价格便宜",占34.02%;半数以上居民(占57.28%)近三年内未作过任何体检,不定期体检的人数位居第二(占28.26%)。被查者中,有2495人(占64.19%)是从电视、报刊书籍和广播等途径经常获取保健知识;有67.29%的调查对象希望获得定期的健康检查;认为乡(镇)卫生院和村卫生所医务人员技术水平一般的分别占56.31%和61.72%,较好以上的分别仅占33.07%和24.63%。结论中国农村居民健康现状不容乐观,其保健行为需要正确引导,基层卫生机构设施条件和服务态度急需改善。同时提示,为农村培养适宜卫生人才已成为政府及高等医学院校当前重要任务。

基于问题的学习法在《天然药物化学》教学中的应用探讨

天然药物化学是药学专业的必修课,为提高教学质量,尝试将基于问题的学习法(PBL法)应用于《天然药物化学》教学中,构建以学生为中心、发展自主学习的技能的教学模式,创设适合于学生主动参与的新型教学环境,并对其具体操作模式进行探讨。

基于职业认同的农村订单定向医学人才培养模式探索

文章运用问卷法对江西省4所院校1011名定向免费医学生的职业认同及其影响因素进行了调查分析,结果表明:定向免费医学生的职业认同略高于中等水平,进一步提升的空间较大;不同性别、年级、报考意愿的定向免费医学生的职业认同感均存在一定的差异,但不同生源地的学生职业认同感差异不显著。据此提出了三点对策建议,为培养高素质的基层医疗卫生人才提供参考依据。

特殊人群慎用禁用非处方药物种数分析

[目的]探讨孕妇、心血管疾病患者、肝肾功能不全者慎用禁用非处方药物种数，为提高安全使用非处方药提供依据。[方法]用Excel软件对《中国非处方药完全手册》中国家颁布的1-6批非处方药全部药物建立数据库，统计分析并比较孕妇、高血压、心功能不全、肝功能不全、肾功能不全、糖尿病、胃病、老年人、新生儿等特殊人群对不同种类非处方药物慎用或禁用药物。[结果]孕妇慎用或禁用的药物种类数最多，占总数的43．8％，其次是新生儿、肾功能不全者和高血压病人，慎用或禁用药物的种类分别略占非处方药总数的10％。[结论]特殊人群应用非处方药物要谨慎。

心钠素抑制血管内皮生长因子刺激的细胞反应及其机制

分别采用细胞吸附试验、迁移试验、流式细胞技术、Western blot等方法检测心钠素(ANP)对血管内皮生长因子(VEGF)刺激下人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)的吸附、迁移、整合蛋白β3激活及其磷酸化的作用。结果显示,ANP能抑制VEGF诱导的HUVEC黏附及迁移,抑制VEGF诱导的整合蛋白αVβ3活化和磷酸化。提示ANP可抑制VEGF诱导的血管内皮细胞功能,有抑制分泌VEGF肿瘤生长的潜在价值。

心钠素抑制肿瘤生长及血管新生的研究

在心钠素(ANP)转基因小鼠(实验组)皮下接种黑色素瘤细胞,检测其体内肿瘤生长及其血管新生情况,并与非转基因小鼠(对照组)进行比较。结果与对照组比较,实验组小鼠体内肿瘤生长及其血管新生明显受抑制。提示ANP可能作为内源性血管抑制剂,发挥抗肿瘤生长及抑制血管形成的作用,在有效的抗肿瘤转移疗法中具有潜在的临床价值。

兔坐骨神经细胞微囊化处理移植至大鼠损伤脊髓对神经生长因子表达变化的影响

目的:观察并比较兔坐骨神经组织细胞微囊化处理与单纯兔坐骨神经组织细胞移植至大鼠损伤脊髓及大鼠单纯脊髓损伤3组神经生长因子表达的变化。方法:实验于2003-05/2005-05在九江学院医学科研中心完成。①制备不同移植材料:取10只成年家兔双侧完整坐骨神经制备细胞悬液;兔坐骨神经组织细胞悬液微囊化处理,将细胞浓度调整为(2.0～2.5)×106L-1后与15g/L海藻酸钠生理盐水溶液混合,经双腔喷头将海藻酸钠-坐骨神经组织细胞悬液混合液喷入20mmol/L的氯化钡生理盐水溶液中,加入生理盐水洗涤2次。②脊髓损伤大鼠模型制作:取健康SD大鼠90只,随机分为3组,微囊化兔坐骨神经组织细胞悬液组(微囊化组);单纯兔坐骨神经组织细胞悬液组(单纯悬液组)和单纯损伤组,每组30只。健康SD大鼠腹腔麻醉(30mg/kg)成功后,以T10为中心,暴露T10棘突及椎板,作脊髓右半侧横向切开,并去除约2mm脊髓组织。立即在损伤腔内植入约2mm×2mm×2mm的明胶海绵作为填充支架,微囊化组在明胶海绵上吸附10μL微囊化兔坐骨神经组织细胞悬液;单纯悬液组在明胶海绵上吸附10μL单纯兔坐骨神经组织细胞悬液;单纯损伤组不做任何移植。③神经生长因子检测:于移植后1,3,7,14,28d,取出大鼠脊髓损伤平面为中心的2cm脊髓标本,每组6个标本共18张切片,进行免疫组织化学染色(SABC法),神经生长因子染色以细胞浆呈明显的棕黄色为阳性染色,分别计算每平方毫米阳性神经细胞数。结果:90只大鼠全部进入结果分析。①各组神经生长因子阳性神经元测定结果:微囊组在1,3,7,14,28d均高于单纯损伤组和单纯悬液组;在第7,14,28天明显高于单纯损伤组和单纯悬液组犤7d:(28.55±2.26),(7.65±3.35),(19.35±2.39)个/mm2;14d:(30.52±3.51),(8.10±2.45)(20.45±3.45)个/mm2;28d:(27.50±4.50),(6.59±3.85),(17.50±4.65)个/mm2,P<0.01或0.05犦;第14天达到顶峰(P<0.01)。②神经生长因子免疫组织化学染色结果:微囊组可见大量棕黄色颗粒,主要分布在脊髓前角神经元和胶质细胞,白质和灰质也可见阳性颗粒。结论:兔坐骨神经组织细胞悬液移植对大鼠脊髓损伤修复有明显的促进作用,微囊化处理后大鼠损伤脊髓神经生长因子表达高于单纯细胞悬液移植和单纯损伤组,更有利于损伤脊髓的再生和修复。

MDM2在原发性肝细胞癌中的表达

目的检测MDM2蛋白及其mRNA在原发性肝细胞癌中的表达,探讨MDM2在原发性肝细胞癌发生发展中作用及意义。方法采用免疫组织化学、原位分子杂交和细胞图像分析技术,检测肝细胞癌组织及其对应癌旁肝组织(各20例),正常肝组织(5例)中MDM2蛋白及其mRNA表达情况。结果在肝细胞癌组织、癌旁肝组织和正常肝组织中,MDM2蛋白免疫组织化学阳性反应颗粒的平均光密度分别为0404±0105,0302±0067,0087±0034。肝细胞癌组织与癌旁肝组织、正常肝组织相比,差异均有显著性意义(P<005)。MDM2mRNA在肝细胞癌组织中呈阳性表达,而癌旁肝组织及正常肝组织均呈阴性。结论MDM2过度表达在原发性肝细胞癌的发生发展过程中可能发挥了重要作用。

心钠素对小鼠肿瘤生长和血管新生的抑制作用

目的研究心钠素(ANP)的抗肿瘤作用及其在血管新生中的作用。方法通过微量泵将ANP输入带瘤小鼠,测量肿瘤体积,并用苏木素和靛红染色检验肿瘤中的血管新生。在基膜基质Matrigel上加入人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使之形成毛细血管样结构,检测ANP对血管内皮细胞生长因子(VEGF165)刺激的HUVEC生长的影响。结果与对照组相比,ANP能抑制小鼠体内的黑色素瘤和肥大细胞瘤生长和血管新生(P<0.01,P<0.001),并抑制VEGF165诱导的HUVEC在基膜基质上形成毛细血管样结构(P<0.001)。结论ANP可能作为一种内源性血管抑制剂,抑制肿瘤生长及血管形成。