XIAP通过调节CDK4/CDK6/cyclinD1复合物表达促进肝癌细胞增殖

目的研究肝癌细胞中XIAP与CDK4/CDK6/cyclin D1复合物之间的调控关系及在肝癌细胞增殖中的作用。方法前期研究用Pathway Array进行肝癌组织异常表达蛋白筛选,后期XIAP特异性抑制剂embelin处理Huh7细胞进行增殖、周期分析。Western blot验证XIAP与CDK4/CDK6/cyclin D1复合物之间的调控关系。结果 Pathway Array提示XIAP与CDK4、CDK6、cyclinD1之间存在联合表达。embelin引起Huh7细胞G1期阻滞、S期分布减少,抑制细胞增殖。XIAP可以调节Huh7细胞G1期蛋白CDK4、CDK6、cyclin D1表达。结论 XIAP通过调节肝癌细胞G1期蛋白CDK4/CDK6/cyclin D1复合物的表达,促使细胞进入G1周期,从而促进其增殖。

XIAP和CDK4/cyclin D1复合物联合表达对肝癌预后评估的价值

目的探讨XIAP和CDK4/cyclinD1复合物联合表达对肝癌预后评估的价值。方法对59例肝癌手术后组织石蜡标本,进行XIAP、CDK4、cyclinD1蛋白分子的免疫组化染色和预后分析。结果 XIAP、CDK4、cyclinD1高表达患者与XIAP、CDK4、cyclinD1低表达患者相比,生存率较低。合并有XIAP高表达+CDK4高表达组分别与XIAP高表达+CDK4低表达/XIAP低表达+CDK4高表达组和XIAP低表达+CDK4低表达组相比,其生存率显著降低。合并有XIAP高表达+cyclinD1高表达组分别与XIAP高表达+cyclinD1低表达/XIAP低表达+cyclinD1高表达组和XIAP低表达+cyclinD1低表达组相比,其生存率显著降低。XIAP+CDK4可以作为影响肝癌患者预后的独立危险因素。结论 XIAP和cyclinD1/CDK4复合物联合表达患者预后更差。XIAP+CDK4联合可以作为影响肝癌患者预后的独立危险因素。

Flavopiridol通过调节CDK4／CDK6／cyclinD1复合物表达抑制肝癌细胞增殖

目的研究flavopiridol对肝癌细胞Huh7增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法Flavopiridol处理Huh7细胞后，检测细胞增殖和凋亡，进行细胞周期分析。Westernblot检测flavopiridol对cDK4／cDK6／cyclinD1复合物表达的影响。结果Flavopiridol可显著抑制Huh7细胞增殖；Flavopiridol可剂量依赖性导致Huh7细胞发生凋亡，空白对照组凋亡细胞2．65％，550nmol／L剂量处理组凋亡细胞14．17％；Flavopiridol可剂量依赖性引起Huh7细胞G1期阻滞，空白对照组G1期细胞51．06％，550nmol／L剂量处理组G1期细胞57．53％；Flavopiridol可抑制Huh7细胞Gl期相关的蛋白细胞周期素依赖激酶（CDK）4，CDK6，细胞周期素D1（cyclinD1）的表达。结论Flavopiridol通过抑制肝癌细胞G1期cDK4／cDK6／cyclinD1蛋白复合物表达，引起细胞G1期阻滞并发生凋亡，从而抑制细胞增殖。

MnSOD过表达对t-BHP诱导间充质干细胞凋亡的保护作用

通过重组慢病毒系统感染人间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs),建立了能够稳定、高效表达锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的细胞株MnSOD-MSCs.从胎儿肝脏组织克隆MnSOD基因,构建重组慢病毒MnSOD的表达载体,感染MSCs.根据荧光表达进行流式分选,获得能够继续稳定传代的高表达MnSOD基因的MSCs,RT-PCR和Western blot结果证实细胞株中的MnSOD基因稳定高表达.用不同浓度的第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理细胞,通过CCK-8法检测细胞的存活率,SA-β-gal染色观察细胞的衰老情况,流式细胞技术分析细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR分析p53和p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)的表达.结果发现,MnSOD过表达可提高细胞的存活率,抑制细胞的凋亡,SA-β-gal染色阳性率降低,且p53和PUMA表达下调.这提示MnSOD过表达对t-BHP诱导的细胞凋亡具有保护作用.

骨髓间充质干细胞在消化道疾病中的应用

干细胞具有持久的自我增殖和分化能力,在特定的条件下,可以分化成不同功能的细胞,形成多种组织和器官。干细胞按照细胞起源的阶段可分为胚胎干细胞和成体干细胞,按照其分化潜能分为全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞3类。骨髓干细胞（BMDCs）包括骨髓间充质干细胞（BMSCs）、造血干细胞和内皮祖细胞。

基质细胞衍生因子-1/受体生物轴相互作用的研究进展

趋化因子又称趋化性细胞因子,是一类能趋化白细胞定向移动的小分子分泌蛋白。其受体是GTP-蛋白偶联的跨膜受体（G protein-coupled receptors,GPCRs）。基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor-1,SDF-1）归属于A类趋化因子,也叫趋化因子配体12（CXC chemokine ligand-12,CXCL12）.