“1233”课程改革在医学免疫学实验教学中的探索与实践

医学免疫学实验课程教学效果和质量的好坏,直接影响到学生内化知识与技能的效率。医学免疫学“1233”课程教学改革是本教学团队基于目前医学免疫学教学过程中重教书、轻育人、轻过程、轻实践等问题上提出来的旨在帮助大学生培养和提升自主学习能力,思维能力、实践能力、创新能力和思想政治素养的线上线下混合式教学方法。在混合式教学背景下,本文基于医学免疫学“1233”课程教学改革,以教学团队线上智慧树平台建设的医学免疫学国家精品课程为先导,探索和构建线上学生自主学习、模拟仿真系统训练、线下互动实验教学三个环节和实验教学全过程评价考核体系的医学免疫学混合式实验教学模式,并进行初步试点实施,为医学免疫学实验教学改革与实践提供借鉴。

混合式教学背景下以CBL为基础的“课程思政”教学改革探索

免疫学检验是一门抽象枯燥的医学专业课程,本文根据本课程特点,运用混合式教学,以CBL为基础,深入挖掘此课程中的思政元素,以培养一个全面发展的人为出发点,从文化基础、自主发展和社会参与三大方面考虑,实现“传授知识”与“引领价值”齐头并进的全方位育人。培养医术精湛,具备正确人生观、价值观的医学生,实现立德树人的根本任务。为“临床免疫学检验技术”的“课程思政”教学改革提供经验基础。

IL-17在类风湿关节炎患者外周血表达的临床意义

目的:探讨IL-17在类风湿关节炎(RA)发病中的作用及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测66例RA患者(活动期34例、缓解期32例)和44例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17 mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中IL-17的浓度,用免疫比浊法检测各组血清RF的浓度,分析血清IL-17与RF的相关性。结果:RA患者PBMC中IL-17 mRNA的表达显著高于健康对照组(P<0.05),但活动期与缓解期无明显差异(P>0.05);RA活动期患者血清IL-17水平显著高于RA缓解期患者和健康对照组(P<0.05);且RA患者血清IL-17水平与RF呈正相关。结论:IL-17和RF在RA的发病和病理过程中起重要作用,IL-17可能与RA活动性有关。

人白细胞介素23受体基因的克隆和原核表达

目的:从外周血单个核细胞(PBMC)中克隆人白细胞介素23受体(hIL-23R)编码区序列,构建原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,应用RT-PCR技术,以PBMC的cDNA为模版,扩增出hIL-23R的编码区(1890bp),将其克隆至pMD 19-T载体,经酶切和测序鉴定后,亚克隆于pGEX-4T-1中构建原核表达载体pGEX-4T-1-hIL-23R,转化大肠杆菌感受态细胞BL-21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,经Western-blot对融合蛋白进行鉴定。结果:获得了hIL-23R编码区序列,构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达,表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,其相对分子质量Mr为97KDa。结论:成功构建hIL-23R原核表达载体并在大肠杆菌中表达hIL-23R融合蛋白。

医学免疫学“1233”课程思政教学改革的实践研究

医学免疫学"1233"课程思政教学改革围绕"立德树人"、学生全面发展的核心素养,构建课程思政融入体系,通过提高教师队伍课程思政的意识和能力、创新教学模式、改革多元化课程评价方式等措施,取得了明显成效,实现了教书育人相统一,形成了专业课与思政课同向同心的协同效应。

高等教育中的创造性思维

素质教育是以人的发展为中心 ,以提高受教育者素质为目的的新的教育模式 ,2 1世纪是以信息为特征的社会 ,一个国家要想在信息爆炸的社会中生存、发展 ,要想在世界上取得战略优势地位 ,需要有掌握先进技术的高素质人才。所以高等教育必须注重学生的创造性思维能力的培养 ,使学生在掌握人类已有的科学知识的基础上 ,学会自己寻找知识和创造知识。

SARS冠状病毒RNA依赖的RNA聚合酶的原核和真核表达

目的:在大肠杆菌中表达和纯化重组RDRP蛋白,观察RDRP蛋白在293细胞中的表达及亚细胞定位。方法:构建原核表达质粒pGEX-4T-1-RDRP,实现插入基因的融合表达,经GST亲合层析纯化蛋白。构建真核表达载体pCMV-myc-RDRP瞬时转染293细胞,转染48 h后免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察蛋白表达及定位以及WesternBlotting检测。结果:成功构建了表达RDRP融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌内高效表达,纯化后得到分子量约为121 kDa的融合蛋白。RDRP蛋白在293细胞中高效表达,主要分布在细胞质。结论:获得了重组GST-RDRP融合蛋白,为进一步探讨RDRP的功能奠定基础,在真核细胞中过表达的RDRP蛋白主要定位在细胞质。

混合式教学背景下医学免疫学“激越四段式”教学新模式的探索

顺应时代发展,在混合式教学大背景下,运用“激越四段式”教学模式,以智慧树课程平台为基础,开展医学免疫学课程建设。以“超敏反应”一章为代表,选取188名本科学生作为研究对象。采用新型教学模式,通过线上导学、线上线下自主学习、线下互动激发、实现超越四个环节,以期培养学生的团队协作精神,提高学生自主学习能力和创新能力等。

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药特征

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的临床分布、基因型及其耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法采用ATB细菌鉴定仪对临床送检标本进行肺炎克雷伯菌鉴定和药敏试验,双纸片法确证试验检测ESBLs表型,通过聚合酶链反应(PCR)对ESBLs阳性菌株进行基因型检测。结果481株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌116株(24.12%),科室分布主要来源于呼吸科(23.28%),标本主要来源于痰液(91株)。PCR结果显示,116株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,CTX型61株(52.59%),TEM型17株(14.66%),SHV型16株(13.79%),22株携带两种基因型(18.96%)。药敏结果显示,116株产ESBLs肺炎克雷伯菌对阿莫西林、替卡西林、头孢噻吩和头孢呋辛的耐药率为100.00%,对哌拉西林、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率在76.00%以上,对美洛培南和亚胺培南全部敏感。结论临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌主要来源于呼吸科,基因型主要为CTX型。产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物呈现多重耐药性。

医学免疫学实验教学现状分析与改革初探

针对当前医学免疫学实验教学课时少、内容陈旧、实验器材不足、教学模式单一及考核机制不完善等问题,提出有效利用课堂时间、充分利用网络平台、优化实验内容、融合多种教学模式、完善考核机制等措施,并在2017级临床医学专业本科生中进行尝试。实践表明,新的教学方式及内容能够充分调动学生学习积极性,取得较好教学效果。

miR-92a/Dickkopf相关蛋白1介导丁酸钠调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞增殖

近年来已有研究表明,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACs)丁酸钠可以抑制结肠癌细胞增殖,促进结肠癌细胞凋亡,但其分子调控机制仍有待于深入研究。在本研究中,CCK-8检测、5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷(Edu)增殖实验和流式细胞术分析证实,丁酸钠处理结肠癌细胞24 h后结肠癌细胞增殖能力明显减弱,凋亡率明显增加(P<0.01)。进一步转录物组测序结果表明,丁酸钠处理结肠癌细胞后,Wnt/β-catenin信号通路的拮抗剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)水平的表达显著高于未处理组(P<0.01);荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹分析进一步验证,丁酸钠可以显著诱导DKK 1的表达水平,同时抑制Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因c-Myc的表达水平(P<0.01)。沉默结肠癌细胞的DKK 1后进一步使用丁酸钠进行处理,Edu增殖实验和流式细胞术结果显示,抑制结肠癌细胞中DKK 1后可以逆转丁酸钠对结肠癌细胞的作用(P<0.01)。生物信息学预测数据库分析显示,DKK 1可能与miR-92靶向结合;qRT-PCR结果显示,丁酸钠可以明显降低结肠癌细胞中miR-92a的表达(P<0.01);Western印迹技术和双萤光素酶报告基因检测证实,miR-92a与DKK 1 mRNA的3′-UTR存在靶向结合关系(P<0.01)。过表达结肠癌细胞中的miR-92a后进一步使用丁酸钠进行处理也能逆转丁酸钠对结肠癌细胞的作用(P<0.01)。总之本研究明确了,丁酸钠可以通过miR-92a/DKK1调控Wnt/β-catenin信号通路进而抑制结肠癌细胞增殖,促进结肠癌细胞凋亡。

免疫学“1233”课程理念下3个“八”的课程思政设计

课程思政建设是目前高校教育改革的重要方向。医学免疫学作为医学院校的医学基础课程,也需对课程思政建设进行相应实践与探索。本团队在免疫学“1233”课程理念下进行了3个“八”的课程思政设计,并在山西医科大学汾阳学院临床与影像两个专业两届本科学生践行两年,积累了一定经验,为医学免疫学课程思政教学改革提供了参考。

山西吕梁市产ESBL大肠埃希菌基因型和耐药性分析

目的探讨吕梁地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌的基因型及其对常用抗菌药物的耐药性,为临床合理用药提供科学依据。方法采用半自动细菌鉴定和药敏分析仪对临床送检的各类标本进行细菌鉴定和药敏试验,按照CLSI推荐的双纸片扩散法和表型确证试验检测产ESBL大肠埃希菌,对产ESBL大肠埃希菌通过PCR法鉴定ESBL基因型。结果临床分离的87株大肠埃希菌中检出产ESBL大肠埃希菌42株(48.3%),PCR结果显示SHV、TEM、CTX基因型分别有1株,4株和10株,27株细菌携带2种以上基因型。药敏结果显示产ESBL大肠埃希菌对青霉素类和头孢菌素类(头孢吡肟除外)的耐药率在95%以上,对环丙沙星、复方新诺明、左氧氟沙星、妥布霉素、庆大霉素、头孢吡肟的耐药率较高(59.52%-92.86%),对头孢西丁和阿米卡星的耐药率较低(<19.05%),对美洛培南和亚胺培南则全部敏感。结论吕梁地区产ESBL大肠埃希菌以多基因型为主,产ESBL大肠埃希菌对16种常用抗菌药物的耐药情况明显高于非产ESBL大肠埃希菌。

人IL-23R胞内区基因的克隆与原核表达

目的克隆人IL-23R(hIL-23R)胞内区基因,并在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法通过PCR获得hIL-23R基因的胞内区片段,克隆至载体pGEX-4T-1中,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(I),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Westernblot进行鉴定。结果hIL-23R胞内区基因的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析可见约760bp的目的片段。重组原核表达质粒经双酶切及测序证明构建正确。表达的融合蛋白相对分子质量约为55000,在低温(20℃)、低IPTG浓度(0.5mmol/L)诱导条件下能以可溶形式表达,可溶性蛋白的表达量约占菌体可溶性蛋白总量的16.1%,且可被兔抗GST多克隆抗体识别。结论已成功克隆了hIL-23R胞内区基因,并在大肠杆菌中表达了可溶性的GST融合蛋白。

人IL-23R胞外区基因的克隆及蛋白表达研究

目的克隆人IL-23R(hIL-23R)胞外区基因,并对其在Escherichia coliBL21(DE3)中的表达进行鉴定分析。方法通过PCR获得hIL-23R胞外区基因片段,将其克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(O)。重组质粒经双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western blot对目的蛋白进行检测分析。结果获得全长为990 bp的hIL-23R胞外区基因,以构建的重组质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(O)转化E.coliBL21(DE3)后,SDS-PAGE显示表达蛋白分子质量单位约为64 ku,Westernblot检测该蛋白能被兔抗GST多克隆抗体识别。结论成功构建了hIL-23R胞外区基因的原核表达载体pGEX-4T-1-hIL-23R(O),并在E.coli中表达出重组蛋白,为进一步研究hIL-23R的功能奠定了实验基础。