IGF-Ⅱ对大鼠脑缺血／再灌注损伤后海马TNF-α含量的影响

目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)对大鼠脑缺血/再灌注不同时期海马皮层肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。方法:应用线栓法建立大鼠脑缺血/再灌注模型。采用TTC染色法测量各组脑梗死体积,采用放射免疫法测定每组大鼠缺血侧海马皮层TNF-α含量。结果:TTC染色结果显示,IGF-Ⅱ治疗组脑梗死体积缩小,与缺血/再灌注组比较有明显减小(P<0.01);缺血/再灌注组缺血侧海马皮层TNF-α含量较正常对照组明显升高(P<0.01),IGF-Ⅱ治疗组缺血侧海马皮层TNF-α含量于3d和5d较相应缺血/再灌注组明显下降(P<0.05)。结论:提示IGF-Ⅱ可明显减少脑梗死体积,可能具有减轻脑缺血时的炎性损伤作用。

大鼠脑缺血再灌注损伤后iNOS的表达变化

目的观察脑缺血再灌注后iNOS表达变化的规律。方法利用缺血再灌注损伤的动物模型,通过蛋白质印迹法检测缺血再灌注不同时期iNOS在脑内的表达。结果在缺血再灌注12、24、72 h与正常组比较表达明显增加,并且随着缺血再灌注时间的延长iNOS表达呈逐渐增加的趋势。结论iNOS可能是脑缺血迟发性损伤的重要因素之一。

丹参酮ⅡA磺酸钠治疗急性脑出血的临床疗效观察

目的观察病后3d应用丹参酮ⅡA磺酸钠对脑出血患者血肿体积、水肿体积、血液流变学以及神经功能的影响。方法随机选择中小量急性脑出血患者64例,分为观察组34例和对照组30例。观察组从发病第3d开始加用丹参酮ⅡA磺酸钠,对照组只用常规治疗。于治疗前及治疗两周后对血肿体积、水肿体积、血液流变学以及神经功能进行分析评价。结果观察组在应用丹参酮ⅡA磺酸钠两周后血肿体积由23.88±9.62mL变为14.86±8.62mL,水肿体积由16.37±5.23mL变为25.37±7.23mL,而对照组血肿体积由24.08±+9.13mL变为22.68±9.86mL,水肿体积由15.97±7.43mL变为34.26±10.27mL,相比较有显著差异(P<0.05);血液流变学以及神经功能明显改善,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论脑出血患者早期使用丹参酮ⅡA磺酸钠能够减少血肿体积、减轻血肿周围水肿、改善血液流变学、促进神经功能恢复,对提高临床疗效具有积极的意义。

血浆溶血磷脂酸对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响

目的观察溶血磷脂酸(LPA)在蛛网膜下腔出血(SAH)发病后脑血管痉挛(CVS)发病中的作用。方法采用自体动脉血注入大鼠枕大池的方法制SAH模型80只,通过动态检测血浆LPA浓度,观察SAH后伴CVS和不伴CVS大鼠的血浆LPA变化。结果SAH后CVS发病时间平均为7.3d;SAH后继发脑出血的大鼠血浆LPA浓度与正常对照组比较无显著差异(P>0.05);SAH后死亡的大鼠血浆LPA浓度与正常对照组比较无显著差异(P>0.05);伴CVS的SAH组在发生CVS前1～3d血浆LPA浓度与不伴CVS的SAH组比较有显著差异(P<0.05)。结论血浆LPA的动态检测有可能作为预测SAH后发生CVS的实验指标。

大鼠大脑中动脉闭塞后脑内胰岛素样生长因子-Ⅱ的表达

目的探讨大脑中动脉闭塞(MCAO)后早期胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)在脑内的表达。方法应用免疫组化方法检测SD大鼠MCAO后IGF-Ⅱ的表达。结果免疫组化方法结果显示MCAO后再灌注12、24h和72h时,与假手术组相比,缺血侧大脑皮质IGF-Ⅱ免疫反应阳性细胞数表达均降低(12h与24h时P<0.05,72h时P<0.01)。结论MCAO后早期缺血侧大脑皮质IGF-Ⅱ呈低水平表达,提示IGF-Ⅱ可能在脑缺血损伤中发挥一定作用。

尿激酶治疗急性期脑梗死的量效研究

目的探讨不同剂量尿激酶治疗脑梗死患者的疗效。方法对120例颈内动脉系统的脑梗死患者按单、双号顺序随机进入大剂量尿激酶治疗组66例和小剂量尿激酶治疗组54例,各组再设三个亚组即大剂量尿激酶治疗组分为轻型15例、中型39例、重型12例;小剂量尿激酶治疗组分为轻型14例、中型31例、重型9例。大剂量尿激酶治疗组应用药量为150万U/次,小剂量尿激酶治疗组应用药量为50万U/次,连用3d。结果大剂量尿激酶治疗组与小剂量尿激酶治疗组总有效率分别为89.3%与74.0%,统计学检验有显著差异(P<0.05);两组中型病例有效率分别为92.3%与74.1%,统计学检验有显著差异(P<0.05)。轻型病例有效率比较分别为93.3%与92.8%,统计学检验无显著差异(P>0.05);两组重型病例有效率比较分别为75.0%与44.4%,统计学检验无显著差异(P>0.05)。结论总有效率大剂量应用效果优于小剂量应用,尤其中型脑梗死患者用药剂量不同,疗效亦不同,即大剂量优于小剂量。

脑缺血不同时期胰岛素样生长因子-1在大鼠脑内的表达及其意义

目的:观测脑缺血不同时期胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfac-tor,IGF)在脑内的表达,同时探讨IGF-1生物制剂对脑缺血损伤的保护作用。方法:将55只SD大鼠单纯随机分为3组,正常对照组5只,用药组和非用药组各25只。后两组分别再按缺血时间分为1,3,5,7,10d组,每组5只大鼠。除正常对照组外,均建立脑缺血模型,造模后1h非用药组侧脑室内注射生理盐水;用药组侧脑室内注射IGF-1,定时间处死动物,取脑组织固定。免疫细胞化学ABC法,动态观测不同时期大脑皮质IGF-免疫反应阳性细胞数的变化情况。结果:脑缺血后第1,3,5,7天大脑皮质IGF-1免疫反应阳性细胞数非用药组分别为(13.6±0.41),(14.9±0.67),(15.6±0.89),(13.2±0.69)个,较正常对照组(12.2±0.56)个明显增高,差异有显著性意义(t=2.03～3.23,P<0.05或0.01);用药组为(14.5±0.95),(16.3±0.79),(17.1±0.65),(14.2±0.45)个,较相应非用药组比较均有增高趋势,差异有显著性意义(t=1.90～3.06,P<0.05,0.01)。结论:脑缺血损伤后IGF-1表达有明显变化,同时提示了IGF-1可能在脑缺血损伤中起保护作用。

EPO对脑出血大鼠脑组织氧自由基损害的保护作用

目的观察体外注射重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠脑出血时血肿周围脑组织氧自由基损伤的保护作用。方法采用立体定向技术将自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型，测定血肿周围脑组织匀浆中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及脑组织含水量。结果与假手术组相比，脑出血模型组脑含水量与MDA含量均显著增高（P〈0．05），而GSH-Px与SOD活性均显著下降（P〈0．05）与脑出血模型组相比，rhEPO治疗组大鼠脑含水量与MDA含量显著下降（P〈0．05），而GSH-Px与SOD活性均显著增高（P〈0．05）。结论EPO对脑出血后血肿周围组织具有保护作用，其机制可能与抗自由基损伤有关。

锯叶棕提取物与AG490合并应用对MM细胞增殖作用的影响

目的：探讨锯叶棕提取物与AG490合并应用后对MM细胞增殖的影响。方法：将体外培养的U266和PRM182：26细胞与0—2uL／mL的不同浓度锯叶棕提取物共孵育，应用MTT比色法测定细胞增殖活性；同时应用台盼蓝不相容实验检测锯叶棕提取物与AG490单独使用或合并使用时的细胞成活率。结果：锯叶棕提取物抑制U266与RPM18226细胞的增殖，其抑制生长50％（ED50S）的有效剂量分别为1．2和0．7灿L／mL；U266细胞用锯叶棕提取物（0．5uL／mL）或AG490（20nM）预处理，其细胞成活率分别为（79．7±1．1）％和（67．2±6．1）％，两者联合应用细胞成活率为（42．9±12.0）％（P〈0．001）；RP—M18226细胞用锯叶棕提取物（0．5ul／mL）或AG490（20nM）预处理，其细胞成活率分别为（74．7±2．1）％和（37．2±5．1）％，两者联合应用细胞成活率为（42．9±4．1）％（P〈0．001）。结论：锯叶棕提取物与AG490合并应用抑制MM细胞的增殖作用较单独使用效果好。

锯叶棕提取物通过阻断STAT3通路抑制U266细胞增殖及促凋亡

目的:探讨锯叶棕提取物对U266细胞增殖的影响以及锯叶棕提取物对IL-6介导的STAT3磷酸化效应。方法:①体外培养的U266细胞加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5或1.0μl/ml)培养24小时,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡;②体外培养的U266细胞加入到锯叶棕提取物(1.0μl/ml)培养24小时,应用Western Blot检测STAT3与P-STAT3表达;③血清饥饿培养24h的U266细胞暴露于IL-6(20ng/mL,30min),另一组用锯叶棕提取物1.0μl/mL预处理3小时的这些细胞,同时应用Western Blot检测STAT3与P-STAT3表达。结果:①锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡具有剂量依赖性(P<0.05);②应用锯叶棕提取物预处理的U266细胞,STAT 3磷酸化水平较未经处理的STAT3磷酸化水平下降80.0%;③血清饥饿培养24h的U266细胞暴露于IL-6(20ng/mL,30min),STAT3磷酸化水平增加20倍;用锯叶棕提取物1.0μl/mL预处理3小时的这些细胞,可阻断STAT3磷酸化水平85.0%。结论:锯叶棕提取物可能通过下调IL-6介导的STAT3磷酸化水平,抑制U266细胞增殖并促凋亡。

锯叶棕提取物增强多烯紫杉醇抗MM细胞增殖作用

[目的]探讨锯叶棕提取物对多烯紫杉醇抗MM细胞增殖的影响。[方法]将体外培养的U266和PRMI8226细胞与0-2μL/mL的不同浓度锯叶棕提取物共孵育,应用MTT比色法测定细胞增殖活性;同时应用台盼蓝不相容实验检测锯叶棕提取物与多烯紫杉醇单独使用或合并使用时的细胞成活率。[结果]锯叶棕提取物对U266细胞与RP-M18226细胞的增殖具有明显的抑制作用,抑制生长50%(ED_(50S))的有效剂量分别为1.2和0.7μL/mL;U266细胞用锯叶棕提取物或多烯紫杉醇预处理,其细胞成活率分别为79.7%或90.1%,两者联合应用细胞成活率为51.6%(P<0.001);RPMI8226细胞用锯叶棕提取物或多烯紫杉醇预处理,其细胞成活率分别为73.7%或80.1%,两者联合应用细胞成活率为55.6%(P<0.001)。[结论]锯叶棕提取物抑制MM细胞增殖并增强多烯紫杉醇抗MM细胞增殖作用。

舒血宁注射液对脑梗塞患者血清中S-100β蛋白及NSE含量的影响

[目的]对比观察舒血宁注射液和注射用丹参冻干制剂对急性脑梗塞患者血清中S100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量的影响.[方法]将90例急性脑梗塞患者随机分为治疗组(每日静脉滴注舒血宁注射液20mL,连续14d)和对照组(每日静脉滴注注射用丹参冻干制剂04g,连续14d),观察两组患者治疗前后神经功能缺损评分及生活能力状态,同时在治疗前及治疗后第3,7,14日检测血清中S100β蛋白和NSE的含量.[结果]与对照组比较,治疗组的疗效及神经功能缺损积分均有显著性差异;治疗组患者血清中S100β蛋白的含量在治疗后第3,7,14日时均明显低于对照组,NSE在治疗后第7,14日时均明显低于对照组.[结论]舒血宁注射液治疗脑梗塞安全有效,明显降低急性脑梗塞患者血清中S100β蛋白和NSE的含量,对急性脑梗塞患者的神经细胞具有较好的保护作用.

甲钴胺对糖尿病周围神经病变患者神经传导速度的影响

通过对糖尿病周围神经病变(DPN)患者神经传导速度的测定,观察甲钴胺疗效。

锯叶棕提取物对U266细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡及对U266细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法1)体外培养U266细胞并加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5μL/mL或1.0μL/mL)培养24小时,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡。2)体外培养U266细胞并加入到锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24小时,应用Western Blot检测p27kip1、MCl-1蛋白表达。结果1)锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡有剂量依赖性(P<0.05)。2)U266细胞暴露于锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24小时,Mcl-1减少60.0%;同时p27kip1蛋白水平表达明显增加。结论锯叶棕提取物通过调节p27kip1、MCl-1蛋白水平诱导U266细胞生长抑制和促凋亡。

胰岛素样生长因子-对大鼠脑缺血再灌注损伤后NSE含量变化影响

为了观察胰岛素样生长因子-(IGF-)对大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时期海马皮层神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量变化的影响,应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将44只健康Spregue-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(n=4)、缺血再灌注组和IGF-组。缺血再灌注组于脑缺血2h后根据再灌注不同时间(12h、24h、48h、72h、96h)分为5个亚组(每亚组4只);IGF-组于脑缺血2h侧脑室内注射IGF-10μg后也根据再灌注不同时间(12h、24h、48h、72h、96h)分为5个亚组(每亚组4只)。于各时间点处死大鼠,并采用酶联免疫分析法测定每只鼠缺血侧海马皮层NSE含量。结果显示,缺血再灌注12h和24h组缺血侧海马皮层NSE含量较假手术组明显下降(P<0.01),48h和72h组也有明显下降,但(P<0.05),96h组基本恢复到假手术组水平;脑缺血2h侧脑室内注射IGF-10μg后再灌注,48h和72h组与相应时间点缺血再灌注组比较明显上升(P<0.05),96h组基本恢复到假手术组水平。IGF-组NSE含量恢复比同时间点缺血再灌注组快,IGF-可能具有减轻缺血性脑损伤的作用。

蛛网膜下腔出血后血清C_3、C_4、CH_(50)动态检测

目的探讨蛛网膜下腔出血后血清补体变化。方法对２１例蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）患者及１４例高血压脑出血（ＣＨ）患者进行血清总补体溶血活性（ＣＨ５０）及补体成分Ｃ３、Ｃ４的动态检测，观察其值在ＳＡＨ病程中的变化情况。结果（１）ＳＡＨ的出血量与Ｃ３、Ｃ４值呈负相关（Ｐ＜０．０１），与ＣＨ５０值无相关；（２）Ｃ３、Ｃ４值与脑血管痉挛（ＣＶＳ）有对应性变化，即有ＣＶＳ的患者Ｃ３值在０．８ｇ／Ｌ以下，Ｃ４值在０．４ｇ／Ｌ以下；无ＣＶＳ的患者病后Ｃ３值在０．９ｇ／Ｌ以上，Ｃ４值在０．４ｇ／Ｌ以上，且在ＣＶＳ发生以前Ｃ３、Ｃ４值明显下降；（３）Ｃ４值呈急剧下降且最低值在０．２ｇ／Ｌ以下的ＣＶＳ患者预后极差。结论在ＳＡＨ后的病程中补体成分Ｃ３、Ｃ４值出现有意义的变化，ＣＨ５０值无明显变化；ＳＡＨ后慢性脑血管痉挛（ＣＣＶＳ）发生前Ｃ３、Ｃ４值明显下降，Ｃ３、Ｃ４值可做为预测ＣＣＶＳ发生的指标；在ＣＣＶＳ发生之前Ｃ４值呈急剧下降，在０．２ｇ／Ｌ以下者提示预后不良。

大鼠大脑中动脉供血区梗死后小脑皮质neurocan动态表达

目的观察大鼠大脑中动脉闭塞后小脑皮质neurocan的变化。方法采用Longa的大鼠大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)制备动物模型;用实时定量PCR法检测neurocan表达。结果本研究结果显示持续性大脑中动脉闭塞后,neurocan在小脑皮层有动态表达,第1d和3d较假手术组轻度增高(P<0.05),7d、10d和14d较假手术组明显增高(P<0.05)。结论大鼠大脑中动脉闭塞后,小脑皮质出现neurocan的动态表达,因此远离梗死灶的相关部位脑组织继发损害机制可能与神经抑制因子有关。

大鼠蛛网膜下腔出血后IGF-Ⅱ动态表达

目的探讨大鼠蛛网膜下腔出血后胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)在脑内的表达。方法采用枕大池注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,应用原位杂交方法观察大鼠蛛网膜下腔出血后大脑皮质区1d、3d、5d、7d、10d的IGF-Ⅱ免疫反应阳性细胞数,并与正常对照组、假手术组进行比较。结果大鼠蛛网膜下腔出血后5d、7d、10d实验组大脑皮质区IGF-Ⅱ免疫反应阳性细胞数分别为14.84±3.5、15.8±3.1、13.96±1.2明显高于正常对照组和假手术组(5d与10d时P<0.05,7d时P<0.01);1d与3d实验组大脑皮质区IGF-Ⅱ免疫反应阳性细胞数分别为10.08±2.3、10.76±2.1明显低于照组和假手术组(P<0.05)。结论IGF-Ⅱ在大鼠蛛网膜下腔出血后的病理生理过程中可能发挥一定的保护作用。

颈部彩色多普勒超声、CT血管成像与数字减影血管造影诊断颈内动脉狭窄、斑块形态及溃疡的准确性比较

目的以数字减影血管造影(DSA)为金标准,分析彩色多普勒超声(CDUS),CT血管成像(CTA)对颈内动脉狭窄、斑块形态及溃疡诊断的准确性。方法采用回顾性分析方法,收集中国医科大学附属第四医院2009—2014年收治的经DSA检查确诊的颈内动脉狭窄患者168例,并先后行CDUS、CTA检查。用Pearson相关性分析CDUS、CTA检查颈内动脉狭窄率与DSA检查颈内动脉狭窄率的相关性;以DSA为金标准,计算CDUS、CTA诊断颈内动脉狭窄率≥70%、斑块形态、是否有溃疡的正确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值;ROC曲线和ROC曲线下面积(AUC)分析CDUS、CTA检查对斑块形态和溃疡检测的准确性;Kappa检验分析CDUS、CTA检查与DSA检查的一致性。结果 CDUS(64.73±22.91)%、CTA(62.38±22.31)%检查颈内动脉狭窄率与DSA(62.52±22.31)%检查颈内动脉狭窄率均呈正相关(r值分别为0.922和0.992,P<0.05)。DSA确诊患者颈内动脉狭窄率≥70%的血管条数为146条,<70%的血管条数为190条。CDUS、CTA检查颈内动脉狭窄率≥70%的正确率分别为85.7%(288/336)、95.8%(322/336),灵敏度分别为83.6%(122/146)、94.5%(138/146),特异度分别为87.4%(166/190)、96.8%(184/190),阳性预测值分别为83.6%(122/146)、95.8(138/144)%,阴性预测值分别为87.4%(166/190)、95.8%(184/192)。CDUS、CTA检查诊断颈内动脉狭窄率≥70%的Kappa值分别为0.709、0.915。DSA确诊患者颈内动脉规则型斑块的血管条数为168条,不规则型斑块的血管条数为168条;DSA确诊患者颈内动脉有溃疡的血管条数为68条,无溃疡的血管条数为268条。CDUS、CTA检查颈内动脉斑块形态的正确率分别为82.7%(278/336)、99.1%(333/336),灵敏度分别为84.8%(144/168)、98.8%(166/168),特异度分别为79.8%(134/168)、99.4%(167/168),阳性预测值分别为80.9%(144/178)、99.4%(166/167),阴性预测值分别为84.8%(134/158)、99.4%(167/169);CDUS、CTA检查颈内动脉斑块形态的Kappa值分别为0.655、0.982。CDUS、CTA检查颈内动脉溃疡的正确率分别为88.7%(298/336)、98.5%(331/336),灵敏度分别为85.3%(58/68)、94.0%(64/68),特异度分别为89.6%(240/268)、99.6%(267/268),阳性预测值分别为67.4%(58/86)、98.5%(64/65),阴性预测值分别为96.0%(240/250)、98.5%(267/271)。CDUS检查诊断颈内动脉不规则斑块AUC为0.818〔95%CI(0.711,0.866)〕,CTA检查诊断颈内动脉不规则斑块AUC为0.997〔95%CI(0.923,1.000)〕;CDUS检查诊断颈内动脉溃疡AUC为0.708〔95%CI(0.633,0.788)〕,CTA检查诊断颈内动脉溃疡AUC为0.969〔95%CI(0.934,1.000)〕。CDUS、CTA检查诊断颈内动脉溃疡的Kappa值分别为0.681、0.953。结论CTA检查对于颈内动脉狭窄率≥70%,不规则斑块和有溃疡的诊断具有简单可行且正确率高的优点,较CDUS占有明显优势,与金标准DSA诊断的准确性具有高度一致性,在一定情况下可代替DSA检查,避免其有创性和潜在的危险性。