醛糖还原酶(AR)基因对大鼠肾系膜细胞的转染及AR抑制剂对其增殖的影响

目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染及AR抑制剂(ARI)对体外培养大鼠肾系膜细胞(MsC)增殖的影响。方法应用Westernblot检测转基因MsC及PDGF作用MsC后AR的表达。四唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比大鼠正常MsC和转基因MsC的生长情况,并观察ARI———Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子(PDGF)和小牛血清(NBS)促细胞增殖作用的影响。结果①Westernblot鉴定转基因MsCAR表达较正常MsC明显增高;②转染组较正常组生长速度快;③PDGF作用MsC后可上调AR的表达;④PDGF和10%NBS均可显著刺激两组细胞的增殖,ARI可部分抑制PDGF对正常组和转染组的促增殖作用,对10%NBS,ARI可部分抑制其对转染组的促增殖作用,而对正常组无显著影响,抑制作用呈剂量依赖性。结论AR可能参与了MsC在病理状况下的过度增殖过程。

子宫颈黏液腺癌21例病理诊断分析

目的对子宫颈黏液腺癌病理诊断过程的分析旨在为早期诊断、减少漏诊总结经验。方法回顾性分析21例子宫颈黏液腺癌的病理诊断过程;采用LABC法免疫组化检测CEA及Ki-67的表达。结果21例子宫颈黏液腺癌诊断中,漏诊3例(14.3%),其中1例为TCT漏诊,2例为子宫颈活检漏诊;4例(19.0%)子宫颈活检诊断为子宫颈原位腺癌、浸润不能除外,后经LEEP术确诊为子宫颈浸润性黏液腺癌;1例(4.8%)子宫颈活检诊断为慢性子宫颈炎,经LEEP术确诊为子宫颈浸润性黏液腺癌;12例(57.1%)直接由子宫颈活检确诊为子宫颈黏液腺癌;1例(4.8%)经诊刮诊断为腺癌,无法确定组织学类型,术后确诊为子宫颈黏液腺癌。免疫组化染色显示,其中10例CEA表达阳性(47.6%),Ki-67表达均升高(>20%)。结论从细胞学及组织形态学上,掌握子宫颈黏液腺癌的诊断要点,可以减少漏诊,及早做出正确的诊断,为患者赢得宝贵的手术时间。

醛糖还原酶抑制剂影响PDGF-BB促系膜细胞增殖作用的机制研究

目的探讨醛糖还原酶抑制剂(ARI)影响血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)促体外培养大鼠系膜细胞(MsC)增殖作用的机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比PDGF-BB刺激MsC生长速度与MAPK3条信号通路(ERK、JNK及p38)抑制剂及PI3K信号通路抑制剂对PDGF促MsC增殖作用的影响。用半定量RT-PCR检测醛糖还原酶抑制剂(ARI)对MsC合成内源性PDGF-B链的影响。蛋白印迹法观察ARI对PDGF引起的信号通路磷酸化的影响。结果(1)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SP600125及PI3K抑制剂LY294002能明显抑制PDGF对MsC的促增殖作用(P<0.05),而p38抑制剂SB203580不能抑制PDGF的促MsC增殖作用;(2)ARI在转录水平对MsC合成内源性PDGF-B链没有明显影响。(3)PDGF刺激MsC后引起ERK、JNK及PI3K/Akt信号通路的磷酸化,而ARI仅能抑制JNK及PI3K/Akt两条信号通路的磷酸化(P<0.05),对ERK信号通路的磷酸化没有明显影响。结论ARI部分抑制PDGF促MsC增殖作用可能与其影响JNK和PI3K/Akt信号通路活化有关。

白细胞介素6与子宫内膜癌侵袭和转移的相关性分析

目的:探讨白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与子宫内膜癌侵袭和转移的相关性。方法:收集2014年3月—2016年10月经手术治疗的78例子宫内膜癌患者的肿瘤组织标本,同时收集42例子宫良性疾病、行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织标本及26例不典型增生的子宫内膜组织标本。采用免疫组织化学法检测各组织中IL-6表达水平。结果:子宫内膜癌组织中IL-6的表达水平明显高于正常子宫内膜组织(P<0.01)。IL-6表达与子宫内膜癌肌层浸润和淋巴结转移存在等级相关性(Spearman等级相关系数分别为0.589、0.655,P<0.05),而与肿瘤分级等临床参数无相关性。结论:IL-6高表达与子宫内膜癌的侵袭和转移具有一定的相关性,是子宫内膜癌发展的一个监测指标及治疗靶点。

肿瘤微环境促进子宫内膜癌细胞分泌雌激素

目的:筛选子宫内膜癌微环境中促进子宫内膜癌细胞雌激素分泌的细胞因子,并探讨相关机制。方法:提取子宫内膜癌间质细胞,用双重免疫荧光法进行鉴定。检测子宫内膜癌细胞(RL95-2、HEC-1A和HEC-1B)与间质细胞共培养和单独培养模式下,培养液上清雌激素浓度和肿瘤细胞芳香化酶的表达情况。用细胞因子芯片筛选2种模式下差异性表达的细胞因子,并用real-time PCR进行验证。结果:成功提取肿瘤间质细胞(波形蛋白为阳性)。共培养组上清雌激素浓度和肿瘤细胞中芳香化酶mRNA表达量均高于单独培养组(P<0.01)。共培养组上清中生长分化因子-15(GDF-15)的表达高于单独培养组,10 ng/mL的GDF-15可显著上调子宫内膜癌细胞中芳香化酶的表达(P<0.01)。结论:子宫内膜癌细胞与间质细胞共培养情况下,子宫内膜癌细胞中芳香化酶的表达,进而促进间质细胞雌激素浓度的合成,其中子宫内膜癌细胞中GDF-15可能发挥重要作用。

白细胞介素-6和磷酸化信号转导和转录激活因子3在子宫内膜癌中的表达及相关性研究

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)与磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)在子宫内膜癌中表达及相关性研究。方法取61例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌组织,以及20例子宫良性病变患者的正常子宫内膜组织,免疫组化法检测不同组织中IL-6和两种p-STAT3[磷酸化STAT3-酪氨酸705(pSTAT3-Tyr705)和磷酸化STAT3-丝氨酸727(pSTAT3-Ser727)]的免疫组化评分,Spearman等级相关分析子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中IL-6与pSTAT3-Tyr705、pSTAT3-Ser727表达的相关性。结果正常子宫内膜组织中IL-6、pSTAT3-Tyr705、pSTAT3-Ser727蛋白的免疫组化评分均明显低于子宫内膜癌组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Spearman相关分析结果显示,IL-6的表达与pSTAT3-Tyr705、pSTAT3-Ser727的表达均相关(r=0.512、0.593,P﹤0.01)。结论子宫内膜癌中,IL-6可能通过激活STAT3信号通路促进其发生发展,提示IL-6和STAT3是子宫内膜癌的重要分子治疗靶点。

阴道超声引导下胚胎移植对反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的:探讨阴道超声引导下胚胎移植对反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)患者冻融胚胎移植妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2017年6月至2019年6月进行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)患者中再次行冻融胚胎囊胚移植48例RIF患者的临床资料,根据胚胎移植时是否使用阴道超声引导分为实验组(24例)和对照组(24例),比较2组间的胚胎种植率、临床妊娠率及流产率。结果:实验组临床妊娠率(37.50%)和胚胎种植率(29.26%)显著高于对照组(29.16%、21.05%),差异有统计学意义(P<0.05);实验组流产率(11.11%)与对照组(14.28%)相比,差异无统计学意义。结论:采用阴道超声引导下胚胎移植可改善RIF患者的临床妊娠结局。

经阴道超声检测激素替代周期子宫内膜血流参数对胚胎移植妊娠结局的评估价值

目的:探讨经阴道超声检测激素替代周期胚胎移植中内膜转化日子宫内膜厚度、子宫内膜血流等参数对妊娠结局的评估价值。方法:选择100例于激素替代周期行冻融胚胎移植的不孕症患者,根据妊娠结果分为妊娠组(n=60)与未妊娠组(n=40)。比较两组子宫内膜转化日的子宫内膜厚度、内膜血流搏动指数(pulsatility index,PI)、阻力指数(resistance index,RI)、收缩期峰值流速与舒张末期流速比值(systolic-diastolic ratio,S/D)等参数。结果:两组内膜转化日的雌二醇(estradiol,E2)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulation hormone,FSH)水平,优质胚胎数及子宫内膜厚度差异均无统计学意义。与未妊娠组比较,妊娠组内膜PI、RI、S/D等血流动力学参数明显降低(P<0.05)。转化日子宫内膜厚度<8 mm者妊娠率低于子宫内膜厚度≥8 mm者(P<0.05)。妊娠组转化日内膜S/D>3者的比例低于非妊娠组(P<0.05)。结论:经阴道超声检测子宫内膜血流参数,有助于预测激素替代周期胚胎移植的妊娠结局。

醛糖还原酶基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响

目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞(MsC)增殖的影响,并对其机制进行初步探讨。方法脂质体转染法将AR基因转入大鼠MsC,蛋白印迹鉴定转染效率。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期与凋亡,对比正常MsC和AR转染MsC的生长速度及AR抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和小牛血清(NBS)促MsC增殖作用的影响。蛋白印迹检测PDGF-BB作用后AR和c-Jun表达的变化,EMSA检测转录因子AP-1的活性。结果(1)转染MsCAR表达较正常MsC明显增高;(2)AR转染MsC较正常MsC生长速度快(P<0.01);(3)ARI可部分抑制PDGF-BB对正常MsC、AR转染MsC以及NBS对AR转染MsC的促增殖作用(P<0.01,P<0.05),而对NBS促正常MsC的增殖无显著影响;(4)PDGF-BB刺激MsC后可上调AR和c-Jun蛋白的表达,ARI可减弱c-Jun的这种表达增高;(5)PDGF-BB可活化转录因子AP-1,而ARI可削弱此作用。结论AR可能参与了MsC在病理情况下的过度增殖过程,其作用机制与AP-1活化有一定关系。

TBS细胞学分类在宫颈液基细胞学检查中的应用

1988年美国困际癌症协会提出了宫颈细胞学Bethesda报告系统（TBS），后经过两次修订。由于它采用更接近组织病理学的描述性诊断术语，有利于细胞病理与临床的有效交流，在国内亦得到推广应用。我们依据TBS细胞学分类诊断的液基细胞学（TCT）的上皮细胞异常病例与组织病理学诊断结果的对照情况，

醛糖还原酶影响转化生长因子β1诱导的大鼠系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达及其机制的研究

目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和IV型胶原(ColIV)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号传导通路。方法经亚克隆构建AR真核表达质粒pCDNA3AR,经脂质体介导及G418筛选后,将pCDNA3AR稳定转染至大鼠MsC中。应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Western印迹法和免疫荧光法检测转染MsC表达AR情况;以Western印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC,应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat分别孵育的MsC:在TGFβ1刺激前后的FN、ColIV以及MAPK/phosphoMAPK表达变化。结果与正常MsC相比,两种ARI———Sorbinil和Zopolrestat均可下调MsC的FN和ColIV蛋白表达,而AR转基因MsC中FN和ColIV表达均升高(均P<0.05);TGFβ1作用后,MsC的FN和ColIV蛋白表达升高,预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,二者表达均下降,而AR转基因MsC中二者表达进一步增高(均P<0.05)。各组细胞在TGFβ1刺激前后总ERK、JNK和p38表达均无明显变化。正常MsC在TGFβ1刺激后phosphoERK、phosphoJNK、phosphop38表达升高,与之相比,若预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,则phosphoJNK、phosphop38表达下降,AR转基因MsC中phosphoJNK表达更为升高(P<0.05)。结论AR基因作为TGFβ1反应性基因之一,可能参与TGFβ1诱导的FN和ColIV表达的调控,且AR的作用有可能与TGFβ1刺激后的JNKMAPK和p38MAPK信号通路的活化有关。AR可能参与了非糖尿病导致的肾小球纤维化、硬化的病理发展过程。

经皮雌二醇贴片与口服戊酸雌二醇在激素替代冻融胚胎移植周期临床疗效的比较

目的比较激素替代冻融胚胎移植周期应用经皮雌二醇贴片与口服戊酸雌二醇的临床疗效。方法回顾性队列研究分析2018年6月至2019年12月期间行激素替代冻融胚胎移植周期患者的临床资料共363例。A组患者应用经皮雌二醇贴片,B组患者口服戊酸雌二醇,比较两组患者的临床结局。结果临床妊娠率A组为55.7%(113/203),B组为58.4%(87/149),组间差异无统计学意义(P=0.663)。人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)阳性率[63.5%(129/203)比65.8%(98/149)]、早期流产率[10.6%(12/113)比9.2%(8/87)]、异位妊娠率[1.8%(2/113)比4.6%(4/87)]组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。孕激素内膜转化日血清雌二醇水平B组[(271.6±73.8)ng/L]显著高于A组[(209.5±65.9)ng/L,P=0.008]。结论激素替代冻融胚胎移植周期,经皮雌二醇贴片临床效果与口服戊酸雌二醇相同,推荐用于有慢性肝肾功能疾病、血栓高危因素、血脂异常等情况的患者。