彝药琵琶甲石油醚部位化学成分研究

目的:研究彝药琵琶甲石油醚部位的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH⁃20凝胶柱色谱及制备薄层色谱等方法进行分离纯化,运用质谱、核磁共振波谱技术并结合文献进行结构鉴定。结果:从彝药琵琶甲中分离得到12个化合物,分别鉴定为:n⁃Hexacos⁃5,8,11⁃trienoic acid(1)、正十七烷(2)、亚油酸甘油三酯(3)、10⁃二十碳烯酸(4)、亚油酰胺(5)、双(2⁃乙基己基)邻苯二甲酸酯(6)、十六烷酸(7)、邻苯二甲酸二丁酯(8)、油酸(9)、琥珀酸单乙酯(10)、亚油酸(11)、琥珀酸(12)。结论:其中,化合物1、3~5、8、10、12为首次从该属昆虫中分离得到。

川芎嗪涂膜剂的制备及其体外经皮渗透特性研究

目的:初步优选川芎嗪涂膜剂的制备工艺,并研究其体外经皮渗透特性。方法:采用单因素试验,以聚乙烯醇(PVA-124)、无水乙醇、甘油、吐温80、氮酮的用量为因素,采用改良的评分标准对涂膜剂基质的成膜时间、成膜性、延展性、均匀度和有无气泡等指标进行评价,优选川芎嗪涂膜剂基质处方。在优选基质处方的基础上制备含不同载药量川芎嗪(300、250、200、150、100、50 mg/mL)的涂膜剂,并考察其最大载药量。采用高效液相色谱法测定川芎嗪含量,并进行方法学考察。取离体大鼠背部皮肤,对高、中、低载药量(100、75、50 mg/mL)川芎嗪涂膜剂进行体外经皮渗透试验,分别于第15、30、45、60、75、90、120、150、180min时取样测定,并计算川芎嗪的渗透速率。结果:PVA-124、无水乙醇、甘油、吐温80、氮酮的用量分别为2.5 g、7.0 mL、1.97 mL、0.07 mL、0.28 mL(以50 mL处方量计)时的川芎嗪涂膜剂基质处方为最优;川芎嗪的最大载药量为100 mg/mL。川芎嗪含量测定方法的线性范围为3.125~100μg/mL,其专属性、精密度、重复性、回收率、稳定性考察均符合要求(RSD均小于2%);高、中、低载药量川芎嗪涂膜剂的渗透速率分别为608.42、384.19、158.20μg/(cm^2·h)。结论:按优选处方制备的川芎嗪涂膜剂成膜时间短、质量稳定可靠,载药量可达100 mg/mL;75 mg/mL载药量的涂膜剂即可达到川芎嗪有效治疗血药浓度的渗透速率范围。

喙尾琵琶甲成虫与幼虫中的脂溶性成分、氨基酸和微量元素比较分析

目的分析并比较喙尾琵琶甲成虫与幼虫中的脂溶性成分、氨基酸和微量元素的差异,为喙尾琵琶甲幼虫的进一步开发与利用奠定基础。方法采用气相色谱-质谱联用技术、全自动氨基酸分析仪和电感耦合等离子体质谱法,分别对喙尾琵琶甲成虫和幼虫中的脂溶性成分、氨基酸和微量元素进行分析。结果从喙尾琵琶甲成虫脂溶性提取物中检测出13个色谱峰,鉴定出5种化学成分,占总离子流峰面积的24.51%;从幼虫脂溶性提取物中检测出49个色谱峰,鉴定出23种化学成分,占总离子流峰面积的66.97%;成虫与幼虫中均含有16种氨基酸,其中7种为人体必需氨基酸,幼虫中氨基酸总量高于成虫。两者均含有丰富的Fe、Zn、Mn元素,成虫中Fe元素的含量最高,幼虫中Zn元素的含量最高;成虫中As元素含量超出限量范围,幼虫中Cu元素含量超出限量范围。结论烃类化合物为喙尾琵琶甲油脂的特征性成分,幼虫中含有大量的烃类和苯酚类化合物,且氨基酸和微量元素组成与成虫基本相似,具有一定的药用、保健和食用价值。

大胡蜂蜂毒中多肽和蛋白质结构和功能的多样性

为证明大胡蜂Vespa magnifica(Smith)蜂毒具有较大的药用开发价值,本研究采用超高效液相色谱-质谱和电泳技术对其多肽和蛋白质的分布进行分析,发现其蛋白质的相对分子质量主要分布在17~45kDa范围内。蜂毒多肽类物质的相对分子质量呈"单峰"式分布,61%在500~3000Da范围内,为大胡蜂蜂毒中多肽含量最为丰富的部分。通过牛津杯法对蜂毒的抑菌活性进行研究,且以HepG2人肝癌细胞及B16黑色素瘤细胞为研究对象,用MTT法检测蜂毒的细胞毒性活性,证明其具有良好的抑菌作用和细胞毒活性,其结果与已报道的其他蜂类既有相似性又存在具体差异,展示了大胡蜂蜂毒的分子多样性,为后续该毒素的物质基础研究及药用价值开发提供参考。

常用中药精油的成分分析

收集17种常见中药精油,将精油按照香型不同分类,通过GC-MS分析其化学成分及相对百分含量。共鉴定出111个挥发性成分,主要类别为脂类、萜烯类、醇类、醛类、酮类等。其中茉莉精油、薰衣草精油、甜茴香精油、芹菜精油和当归精油中含量最高的的主要成分其相对含量都在35%以上。辛香类香型精油的香气比其它精油更丰富;木质类香型精油大都含有黄酮类和多酚类有效成分;香草类香型精油大都含有beta-Selinene(β-瑟林烯)、alpha-Selinene、D-Limonene(D-柠檬烯);柑橘类香型的精油中大多含有D-Limonene、Citral(柠檬醛)、Citronella;花香类精油中大多含有Linalool(芳樟醇)、beta-Caryophyllene(β-石竹烯)。

定量核磁共振氢谱检测右佐匹克隆片的含量

目的:建立定量核磁共振氢谱(qHNMR)测定右佐匹克隆含量的方法。方法:以1,3,5-三甲氧基苯δ6.08处质子信号为内标峰,以右佐匹克隆δ8.54、8.38、8.12、7.78处质子信号为定量峰,以DMSO-d_(6)为溶剂,在恒温298 K,弛豫延迟时间10 s,扫描次数32次条件下采集氢谱。结果:定量核磁共振氢谱法测定右佐匹克隆片中右佐匹克隆平均含量为2.94%,即平均每片中含右佐匹克隆3.00 mg,RSD为0.15%,与药物说明标示的量基本一致。结论:定量核磁共振氢谱可用于药物中右佐匹克隆含量的测定,并且具有快速、准确以及操作简单等优势。

南海柳珊瑚来源真菌Aspergillus hiratsukae SCSIO 7S2001的次生代谢产物及活性研究

目的对1株采自南海柳珊瑚来源曲霉属真菌Aspergillus hiratsukae SCSIO 7S2001进行次级代谢产物及活性研究。方法通过条件优化对菌株进行大规模发酵,采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶、半制备高效液相等色谱学方法对其大米发酵产物进行分离纯化,利用核磁共振、质谱等波谱学技术,结合其理化性质及文献数据对比进行化合物的结构鉴定,并对化合物进行初步抗氧化和抗菌活性测试。结果从菌株SCSIO 7S2001中分离鉴定9个单体化合物cristatumin F(1)、neoechinulin B(2)、cyclo(Trp-Ana)(3)、cyclo(D-Trp-L-Pro)(4)、cyclo(D-Pro-D-Phe)(5)、phomoindene A(6)、β-adenosine(7)、E-6-hydroxy-3-(4-hydroxybenzylidene)-benzo[b]furan-2-one(8)、Z-6-hydroxy-3-(4-hydroxybenzylidene)-benzo[b]furan-2-one(9),并对化合物进行抗菌活性、DPPH自由基清除活性以及乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定。化合物1~9均为首次从该菌株中分离得到,化合物8和9为首次从海洋真菌中分离得到的新天然产物。所有化合物均无抗菌活性,化合物6表现出显著的DPPH自由基清除活性,其IC50为8.50μmol/L,几乎与阳性对照相当(阳性对照IC50=5.58μmol/L)。化合物1和2表现出微弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性,在质量浓度为50μg/mL下,抑制率分别为16.44%和19.75%。

基胡蜂蜂毒的组成分析及生物活性评价

目的对基胡蜂蜂毒的组成进行分析及对其体外生物活性进行评价。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和超高效液相色谱-质谱联用技术对基胡蜂蜂毒中的蛋白质和多肽成分的相对分子质量组成进行分析。采用MTT比色法评价蜂毒的体外抗炎及抗肿瘤活性,牛津杯法评价蜂抗菌活性,并将结果与基胡蜂醇提物进行比较。结果基胡蜂蜂毒中蛋白质主要分布在11~48×10^(3)内,且在26、34和43×10^(3)附近有3条明显的蛋白条带,为蜂毒的主要过敏原成分。多肽类分子的相对分子质量呈无规律的多峰式分布,其中85%的多肽分子集中在300~2 500内。就生物活性而言,基胡蜂蜂毒可抑制脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞增殖,25μg·mL^(-1)浓度下的蜂毒对细胞的抑制率高达67.67%,且100μg·mL^(-1)的抗炎效果是同浓度地塞米松的10倍;对HT-29,HepG2,B16肿瘤细胞的生长繁殖具有显著的杀伤作用;对金黄色葡萄球菌,大肠埃希氏菌和白色念珠菌具有生长抑制作用;而基胡蜂醇提物仅表现出对LPS诱导的RAW264.7炎症细胞增殖抑制活性,且抑制效果仅为蜂毒的1/60。结论本实验利用现代分离及分析技术对基胡蜂蜂毒的组成及生物活性进行了相对系统的研究,由结果可知,基胡蜂蜂毒含有丰富的肽类物质,为后续蜂毒成分研究方法的选择提供方向;此外,基胡蜂蜂毒具有抗炎、抗肿瘤、抗菌活性,具有潜在的药用开发价值,实验为后续该毒素的现代化深入研究提供了参考。