抑制EphA4受体活性对少突胶质前体细胞发育影响的研究

目的探讨抑制EphA4受体活性对少突胶质前体细胞(OPC)发育的影响。方法将分离纯化的OPC随机分为正常组、EphA4受体抑制剂处理组(EphA4-FC组)。EphA4-FC组加入250 nmol/L EphA4-FC,培养至第2天。免疫细胞化学染色法观察正常组OPC特异性标志物NG2与EphA4受体的共表达情况;通过细胞计数观察两组OPC数量变化情况;通过Western blot检测两组细胞蛋白样品中OPC特异性蛋白血小板源性生长因子α受体(PDGFαR)的表达变化情况。结果免疫细胞化学染色显示,正常体外培养OPC高表达EphA4受体;与正常组比较,EphA4-FC组的NG^(2+)阳性细胞数量明显增多(P<0.05)。Western blot显示,与正常组比较,EphA4-FC组细胞蛋白中PDGFαR的表达显著增高(P<0.05)。结论培养的OPC上高表达EphA4受体,通过抑制EphA4受体可以促进OPC的增殖。

大脑中动脉重度狭窄侧枝循环对脑梗死发病机制及NIHSS评分的影响

目的:研究大脑中动脉粥样硬化性狭窄(狭窄率≥70%或闭塞)导致的急性脑梗死患者,责任血管范围内侧枝循环与脑梗死发病机制及NIHSS评分的关系。方法:连续性收集经脑血管数字减影血管造影(DSA)证实单侧大脑中动脉重度狭窄(或闭塞)患者123例,分为侧枝循环开放组与未开放组,头颅磁共振+弥散(MRI+DWI)分析梗死灶特点,记录入院NHISS评分与治疗7d后NIHSS评分,分析侧枝循环对脑梗发病机制分型及NIHSS评分的影响。结果:(1)大脑中动脉重度狭窄(或闭塞)导致的急性缺血性卒中的病理机制分型中,侧枝循环开放组病理机制中动脉-动脉栓塞机制最常见(17例,40.5%),其次为载体动脉阻塞穿支动脉(13例,31.0%),低灌注/栓子清除下降(7例,16.7%)及混合机制(5例,11.9%)所占比例较少;侧枝循环未开放组低灌注/栓子清除下降所占比例最大(32例,39.5%),其次为载体动脉阻塞穿支动脉(20例,24.7%),动脉-动脉栓塞(17例,21.0%)及混合机制(12例,14.8%)。(2)侧枝循环开放组经药物治疗前后NIHSS评分均较无侧枝代偿组分值低,神经功能好转率高。结论:大脑中动脉粥样硬化重度狭窄(或闭塞)导致的急性脑梗死,侧枝循环可影响急性缺血性卒中病理机制分型及NIHSS评分。

药物洗脱支架在急性大脑中动脉粥样硬化闭塞性卒中患者急诊血管成形术中的临床疗效

目的探讨药物洗脱支架(DES)治疗急性大脑中动脉粥样硬化闭塞性卒中的安全性及有效性。方法回顾性分析2021年12月5日至2023年3月1日在西电集团医院、咸阳市第一人民医院、西京医院、陕西省人民医院、西安市中心医院、西安大兴医院、西安市北方医院收治的急性大脑中动脉粥样硬化性闭塞所致卒中行急诊颅内DES治疗的34例患者的临床资料,观察患者的临床基线特征、影像学特点[CT-Alberta卒中项目早期CT评分(ASPECTS)、弥散加权成像(DWI)-ASPECTS、CT灌注成像(CTP)]、手术效果和围手术期情况[患者入院到股动脉穿刺成功时间(DPT)、术后改良脑梗死溶栓(mTICI)分级、症状性颅内出血(sICH)、术后即刻美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、术后24 h NIHSS评分、术后30 d NIHSS评分、术后30 d改良Rankin量表(mRS)评分]、临床预后随访(术后90 d mRS评分、术后90 d内脑卒中复发率、死亡率)以及术后90 d支架内再狭窄发生率。采用t检验比较基线NIHSS、mRS评分和术后30 d NIHSS、mRS评分的差异。结果34例患者年龄为(64.6±6.5)岁,男性24例(70.6%),合并高血压者27例(79.4%)、糖尿病17例(50.0%)、高脂血症12例(35.3%)、高同型半胱氨酸血症12例(35.3%)、心房纤颤0例、吸烟者20例(58.8%);发病至就诊时间为(8.9±4.6)h,基线NIHSS评分为(7.9±1.1)分,基线mRS评分为(2.7±1.1)分;CT-ASPECTS评分为(9.8±0.4)分,DWI-ASPECTS评分为(8.0±1.0)分,右侧大脑中动脉闭塞者22例(64.7%),左侧大脑中动脉闭塞者12例(35.3%),CTP平均错配体积为(96.5±30.1)ml。34例患者术后即刻均达到mTICI分级3级,成功再通率为100%;术后1例发生无症状性颅内出血,sICH发生率为0;术后30 d NIHSS评分为(3.6±2.3)分,较基线下降,差异具有统计学意义(t=3.975,P=0.001);术后30 d mRS评分为(1.6±0.8)分,较基线下降,差异具有统计学意义(t=2.24,P=0.038)。术后90 d随访显示85.7%(29/34)的患者获得良好临床预后(mRS评分0~2),无死亡患者,无缺血性卒中复发患者,无支架内再狭窄发生。结论对急性大脑中动脉粥样硬化闭塞性卒中患者行DES治疗是安全有效的,短期随访支架内再狭窄率低。

β-谷甾醇通过抑制内质网应激改善大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨β-谷甾醇对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响及其机制是否与内质网应激(ERS)有关。方法将应用改良Longa法制备CIRI模型成功的53只大鼠按随机数字表法分为模型组(n=14)、β-谷甾醇低剂量组(n=13)、β-谷甾醇中剂量组(n=13)、β-谷甾醇高剂量组(n=13),并取进行相同手术操作但不阻断大脑中动脉的12只大鼠作为假手术组。假手术组和模型组大鼠每天灌胃1 mL 5 g/L羧甲基纤维素钠,β-谷甾醇低剂量组、β-谷甾醇中剂量组、β-谷甾醇高剂量组大鼠每天分别灌胃1 mL 10、20、40 mg/kgβ-谷甾醇(溶于5 g/L羧甲基纤维素钠中),连续给药14 d。给药结束后,采用Zea Longa 5分法进行大鼠神经功能评分,然后取脑组织,采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法评估脑梗死体积,采用HE染色、Nissl染色、TUNEL染色评估脑损伤及神经元凋亡情况,采用水溶性四氮唑-1(WST-1)法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用比色法检测脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测脑组织中丙二醛(MDA)含量,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法及Western blotting法检测脑组织中RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、肌醇需求酶-1(IRE-1)、激活转录因子-6(ATF-6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-12的mRNA及蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能评分明显升高,脑梗死体积比明显升高,TUNEL阳性细胞率明显升高,SOD、GSH-Px含量明显降低,MDA含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠脑组织中PERK、IRE-1、ATF-6、GRP78、CHOP和Caspase-12的mRNA和蛋白水平亦较假手术组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,β-谷甾醇低剂量组、β-谷甾醇中剂量组和β-谷甾醇高剂量组大鼠的神经功能评分明显降低,脑梗死体积比明显降低,TUNEL阳性细胞率明显降低,SOD、GSH-Px含量明显升高,MDA含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);β-谷甾醇低剂量组、β-谷甾醇中剂量组和β-谷甾醇高剂量组大鼠脑组织中PERK(mRNA:2.17±0.17、1.79±0.07、1.33±0.07,蛋白:5.11±0.52、2.91±0.26、1.98±0.17)、IRE-1(mRNA:1.75±0.18、1.65±0.08、1.32±0.08,蛋白:5.00±0.31、4.05±0.27、1.98±0.14)、ATF-6(mRNA:2.24±0.12、1.77±0.14、1.37±0.13,蛋白:4.93±0.45、4.04±0.30、3.10±0.20)、GRP78(mRNA:2.67±0.16、2.11±0.16、1.69±0.11,蛋白:5.02±0.38、2.97±0.26、2.05±0.22)、CHOP(mRNA:2.01±0.16、1.70±0.19、1.40±0.10,蛋白:4.92±0.39、4.02±0.27、3.08±0.22)和Caspase-12(mRNA:1.85±0.09、1.61±0.09、1.30±0.09,蛋白:3.03±0.20、2.19±0.11、1.82±0.11)的mRNA和蛋白水平亦较模型组(mRNA:2.99±0.28、2.27±0.12、2.57±0.21、3.46±0.20、2.50±0.23、2.35±0.16,蛋白:6.98±0.48、6.03±0.58、5.98±0.63、7.10±0.45、6.00±0.53、5.02±0.43)明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论β-谷甾醇可减轻大鼠CIRI,其机制可能与抑制ERS有关。