表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究

表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示,在表皮葡萄球菌ATCC35984中,SarA对atlE(自溶酶基因)表达起负调控作用,而对lipA(脂肪酶基因)和zinC(膜相关锌金属蛋白酶基因)的表达则有正调控作用.生物信息学分析表明,SarA控制atlE,lipA和zinC3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的,该DNA结合区保守并富含AT碱基.根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列,利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE,lipA和zinC的可能区域.基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子,结果提示,SarA能调控众多因子,可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点.

细胞三维培养与传统细胞培养的应用现状

细胞技术作为医学生物技术中最核心、最基础的技术,已成为当今医学科研工作的必备技能,广泛应用于生命科学的众多领域,与其他学科领域的交叉研究也日趋增多[3-4]。传统细胞培养通常为细胞生长在单层二维的玻璃或塑料平面上,属于二维培养,具有较好的伸展性,但不能充分真实模拟体内生长模式,最终影响细胞增殖、分化、凋亡、基因和蛋白表达等细胞过程。

实验猕猴B病毒抗体检测结果分析

目的研究实验猕猴B病毒抗体阳性情况。方法选取安徽省实验猕猴中心400只猕猴,各采集静脉血5 m L,3 000 r/min离心10 min后,抽取上层血清,采用酶联免疫吸附试验与免疫酶试验检测血清B病毒抗体,观察B病毒抗体阳性率。结果400份有效样本中,B病毒抗体阳性率为36.50%;雌性猕猴B病毒抗体阳性率为36.74%,雄性为为36.22%,两者差异无统计学意义(χ~2=0.012,P=0.913)。幼年猕猴B病毒抗体阳性率为30.68%,青年猕猴B病毒抗体阳性率为32.34%,成年猕猴B病毒抗体阳性率为66.67%,差异有统计学意义(χ~2=26.200,P=0.000)。结论实验猕猴B病毒抗体阳性率处于较高水平,雌性猕猴B病毒抗体阳性率高于雄性猕猴,成年猕猴B病毒抗体阳性率较高。因此,需加强实验猕猴的管理,以减少B病毒感染,生产出安全性更高的实验猕猴。

3种沙门氏菌快速检测方法检测效果分析

目的比较VITEK-2 Compact法、胶体金法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测沙门氏菌的效果。方法分别采用VITEK-2 Compact法、胶体金法、ELISA法对待测样品进行检测,并将检测结果与国标法检测结果进行对比分析。结果VITEK-2 Compact法、ELISA法、胶体金法的检测结果和国标法检测结果的符合率分别为100.00%、92.86%和95.71%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论3种快速检测方法均可作为沙门氏菌国标检测方法的有效补充。

3种快速检测沙门氏菌方法的比较分析

目的比较PCR法、胶体金法和VITEK-2Compact法检测沙门氏菌的检测效果。方法使用PCR法、胶体金法和VITEK-2 Compact法和国标法分别对待测样品进行检测,并将3种快速检测方法的检测结果与国标法检测结果进行对比分析。结果3种快速检测法的检测结果和国标法检测结果符合率分别为100%、92.9%和100%,PCR法和VITEK-2 Compact法符合率略高于胶体金法,但3种快速检测方法总检出率与国标法比较差异均无统计学意义(P>0.05),PCR法、胶体金法和VITEK-2 Compact法对35个沙门氏菌阳性样本的检出率分别为100%、85.7%和100%。针对阳性样品,PCR法和VITEK-2 Compact法高于胶体金法,且差异有统计学意义(P<0.05)。PCR法和VITEK-2 Compact法对沙门氏菌的最低检出限为1×10^1CFU/mL,而胶体金法为1×10^2CFU/mL。结论3种快速检测方法均可作为沙门氏菌国标检测方法的有效补充。

一种新型纳豆激酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

从市售纳豆中分离得到一株芽孢杆菌,命名为纳豆芽孢杆菌FDM415.提取其基因组DNA,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增获得含纳豆激酶编码基因的DNA片段(1179 bp);测序结果证实所分离得到的纳豆激酶编码基因NKM与文献报道(GI:29164926)的NK基因有17个碱基差异,所编码的氨基酸有3个残基不同.将该基因连接到pMG36e表达载体并导入大肠杆菌JF1125中表达,测得的纤溶酶活力为468 U/L.

一种手持式深紫外线发光二极管消毒器在食(饮)具消毒中的应用效果观察

目的观察一种手持式深紫外线发光二极管(UVC-LED)消毒器在食(饮)具中的消毒效果。方法采用载体定量杀菌试验和现场消毒试验方法,对该手持式UVC-LED消毒器的杀菌效果进行观察。结果该手持式UVC-LED消毒器辐射紫外线波长278 nm,输出功率200~450 mW/cm^(2)。该消毒器垂直作用距离25 cm,照射作用5 s,对载体上金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞杆菌和白色念珠菌杀灭对数值均>3.00。模拟现场消毒试验中,该UVC-LED消毒器对食(饮)具上大肠埃希菌垂直作用距离25 cm,作用5 s,杀灭对数值均>3.00;物体表面消毒现场试验中,其对办公桌表面100 cm^(2)垂直作用距离25 cm,照射作用30 s,对自然菌平均杀灭对数值>1.00。结论该手持式UVC-LED消毒器具有良好的消毒效果。

表皮葡萄球菌sigB基因调控生物膜合成的研究

sigB基因编码的S igm a factor B(σB)蛋白是一个普遍性的可通过与RNA聚合酶结合来调控多种基因表达的因子.为了验证表皮葡萄球菌sigB基因的调控作用,构建了含四环素抗性基因的打靶载体并采用双交换同源重组的方法对表皮葡萄球菌RP62A(ATCC35984)中sigB基因进行敲除.sigB基因敲除后的菌株,与出发菌株相比生物膜形成能力急剧下降,而在sigB基因座的回补菌株中,生物膜形成能力又恢复到接近出发菌株的水平.RT-PCR分析生物膜相关基因sarA(Staphylococcus Accessory Regu lator),icaA(icaADBC操纵子中的第一个基因)发现,sigB基因从转录水平上对二者进行正调控.lacZ报告系统的体外实验揭示了SigB可以通过作用于sarA的启动子区域正调控sarA表达.

一种复方双链季铵盐消毒剂消毒效果和毒性观察

目的观察由150 mg/L双癸基二甲基氯化铵与金银花提取物复配的复方双链季铵盐消毒剂消毒效果、稳定性及其毒性,为实际使用提供试验依据。方法采用悬液定量杀菌试验、手消毒现场试验和动物毒性实验,对该消毒剂的消毒性能和安全性进行评估。结果该消毒剂作用3 min对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的杀灭对数值均> 5. 0,作用3 min对白色念珠菌杀灭对数值> 4. 0,杀菌效果可维持24个月;对30人次受试者擦拭消毒1 min后,手表面自然菌的平均杀灭对数值> 1. 0;对豚鼠完整皮肤无刺激,对小鼠毒性为实际无毒级。结论该消毒剂用于人体手部皮肤的消毒安全有效。

过氧化氢蒸汽对微生物实验室的消毒效果观察

目的为正确使用过氧化氢蒸汽进行实验室消毒提供试验依据,观察过氧化氢蒸汽对微生物实验室工作台、墙面及空气的消毒效果。方法采用HTY-SUPER SD2型汽化过氧化氢发生器将浓度为30%H_2O_2液体分别按照3.5、7.0、10.5 ml/m^3的用量对微生物实验室进行汽化熏蒸处理,作用时间为30 min和60 min,根据消毒前后实验室工作台、墙面及空气细菌数,计算消毒后工作台、墙面的细菌杀灭对数值和空气细菌的消亡率。结果采用过氧化氢蒸汽对微生物实验室空气进行消毒时,H_2O_2剂量为7.0 ml/m^3和10.5 ml/m^3时消毒30 min所有进行消毒的实验室细菌消亡率平均值均>90%,符合空气消毒的要求;对微生物实验室工作台面及墙面进行消毒时,H_2O_2剂量7.0、10.5 ml/m^3时,消毒30 min对所有试验台和墙面的杀灭对数值平均值均>1,均符合物体表面消毒的要求。结论过氧化氢蒸汽对微生物实验室工作台、墙面等物体表面及空气消毒效果较好,可以作为微生物实验室的综合消毒方法使用。

一种三氯羟基二苯醚抗菌洗手液的消毒效果及毒性研究

目的观察一种以三氯羟基二苯醚为主要成分的抗菌洗手液的消毒效果及其毒性。方法采用载体定量杀菌试验方法和动物试验方法,对该抗菌洗手液的消毒效果及安全性进行研究。结果用浓度为2 100 mg/L三氯羟基二苯醚的该抗菌洗手液原液浸泡作用1 min,对载体上金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的杀灭对数均> 3. 0。用该抗菌洗手液原液擦拭消毒1 min,对手部自然菌的平均杀灭对数值为1. 89。该抗菌洗手液对小鼠急性口服LD50值> 5 000 mg/(kg·bw),对豚鼠完整皮肤刺激指数为0。结论该抗菌洗手液对细菌繁殖体和真菌均有很好的杀灭效果,属实际无毒级。

一种复方苯扎氯铵卫生湿巾的杀菌效果和毒性观察

目的观察一种复方苯扎氯铵卫生湿巾的杀菌效果和毒性。方法采用载体定量杀菌试验和动物毒性评价试验,对一种含100 mg/L苯扎氯铵与500 mg/L茶树精油卫生湿巾的杀菌效果及安全性进行实验室评价。结果将实验指标菌直接污染在卫生湿巾片上作用10 min,对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭率依次为98. 41%、99. 23%和96. 54%;作用20 min,对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌杀灭率均达到100%,对白色念珠菌杀灭率为99. 32%。用该卫生湿巾擦拭物体表面和人体前臂皮肤,可以清除大肠埃希菌和白色念珠菌对数值均> 3. 0。该卫生湿巾对豚鼠皮肤无刺激性。结论该卫生湿巾具有很好的杀菌效果,对豚鼠皮肤无刺激。

一种复方消毒剂消毒效果观察

目的观察某复方消毒剂消毒效果,为其实际使用提供试验依据。方法采用悬液定量杀菌试验和手消毒现场试验,对该复方消毒剂的杀菌效果进行观察。结果该复方消毒剂原液含体积分数70%乙醇与4 000 mg/L聚六亚甲基胍。以该消毒剂原液作用3 min,对悬液内金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的杀灭对数值均> 5. 0,对白色念珠菌杀灭对数值> 4. 0。用该复方消毒剂原液擦拭消毒手1 min后,手表面自然菌的平均杀灭对数值> 1. 0。结论该复方消毒剂有很好的消毒效果,可用于手部皮肤的消毒。

一种复方抑菌洗护液抑菌性能及毒性观察

目的研究一种复方抑菌洗护液抑菌性能及其对黏膜刺激强度。方法采用抑菌环试验和动物试验方法,对某复方抑菌洗护液抑菌效果及其对黏膜刺激性进行观察。结果该复方洗护液为含中草药百部和黄柏提取物液体制剂。浸有该抑菌洗护液的滤片具有明显抑菌环出现。该复方洗护液于37℃条件下储存90 d后仍保持其抑菌作用。原液对家兔阴道膜刺激指数为1.00。结论该复方抑菌洗护液抑菌效果及抑菌稳定性良好,对家兔阴道黏膜有极轻刺激。

一种复方乳酸菌凝胶的抑菌性能及黏膜刺激性观察

目的观察一种复方乳酸菌凝胶的抑菌性能及其对黏膜的刺激性。方法采用最小抑菌浓度试验和家兔阴道黏膜刺激试验,对复方乳酸菌凝胶的抑菌效果及其黏膜刺激性进行观察。结果复方乳酸菌凝胶对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及白色念珠菌的最小抑菌浓度分别为2.5%(W/V)、2.5%(W/V)和1.3%(W/V)。经37℃、相对湿度75%的条件下放置三个月加速试验,最小抑菌浓度没有明显变化。对家兔阴道黏膜刺激指数为0.89。结论该乳酸菌凝胶对试验菌的抑菌效果均不高于2.5%(W/V),有效期为室温下至少保存2年,且对阴道黏膜无刺激性。

复方妇科洗液安全性评价实验研究

目的通过复方妇科洗液豚鼠皮肤刺激试验、皮肤过敏试验及家兔阴道粘膜刺激试验,对其安全性进行评价。方法皮肤刺激试验选取皮肤健康完好豚鼠3只,每只豚鼠一侧背部皮肤均匀涂抹复方妇科洗液,另一侧皮肤为空白对照,连续涂抹皮肤14 d,在每次涂抹后24 h观察皮肤局部反应并记录结果;豚鼠过敏试验选取48只豚鼠,随机分为给药组、阴性和阳性对照组,每组16只,雌雄各半,各组给相应药物进行诱导和激发处理后,观察皮肤是否出现过敏反应并计算致敏率;家兔阴道粘膜刺激试验选取成年雌性家兔6只,分为给药组和生理盐水阴性对照组,每组3只,连续给药5 d,末次给药24 h后采用气栓法处死动物取出完整阴道组织进行病理学制片,并于光学显微镜下观察家兔阴道粘膜的组织形态。以上试验均按相关标准对刺激强度进行打分并按评分标准进行评定。结果皮肤刺激试验结果刺激指数为0;皮肤过敏试验均未观察到过敏反应,致敏率为0%;阴道粘膜刺激试验中肉眼观察未见明显异常,显微镜观察仅个别动物组织出现轻度充血、水肿,其它未见明显异常病理改变,阴道粘膜刺激指数为0.34。以上均按评分标准评价为无刺激。结论妇科洗液无皮肤刺激,无致敏性,对家兔阴道粘膜无刺激。

一种复方苯扎氯铵消毒液的消毒效果观察

研究一种复方苯扎氯铵消毒液的消毒效果。方法:通过悬液定量杀菌试验和手消毒现场试验,对该复方消毒剂的杀菌效果进行实验室评价。结果:该消毒剂原液含乙醇74%和苯扎氯铵2000mg/L,pH6.4;以该消毒剂原液作用1min,对悬液内金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌的杀灭对数值均>5.00,对白色念珠菌的杀灭对数值均>4.00。用该消毒剂原液消毒手1min后,手表面自然菌的杀灭对数值平均值>1.00。结论:该复方苯扎氯铵消毒剂具有良好的消毒效果,可用于手部的消毒。