高效毛细管电泳柱端安培检测异丙嗪

本文用高效毛细管区带电泳柱端安培检测了抗组胺药物异丙嗪（ＰＭＺ）。讨论了缓冲溶液浓度，ｐＨ值对柱效的影响，为提高检测的重现性考察了电极的电化学处理条件。在优化的实验条件下，异丙嗪的线性范围为１×１０－７～１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，检测下限为３．５×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，分离并检测了尿样中的１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ的异丙嗪。

非水溶液毛细管电泳

评述了非水溶液毛细管电泳的应用及发展。对非水溶液毛细管电泳的原理及应用情况作了简要叙述。有机试剂在毛细管电泳中的加入，扩大了分析物质的范围。以纯有机试剂作电泳介质，具有许多水溶液毛细管电泳不能比拟的优点。

胃癌高发区食品中N-甲基亚硝基脲的分离鉴定

目的：从亚硝化食品中分离鉴定Ｎ亚硝酰胺。方法：用高效液相色谱（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）光水解热裂解热能分析仪联机技术，从胃癌高发区食品鱼露亚硝化产物中直接分离、测定和制备热不稳定性Ｎ亚硝酰胺色谱组份；利用ＨＰＬＣ电喷雾离子化质谱计和ＨＰＬＣ紫外光谱仪联机技术，对该色谱峰的制备组份进行结构确证。结果：从亚硝化鱼露中直接分离到一种热不稳定性Ｎ亚硝基化合物，其色谱保留时间与Ｎ甲基亚硝基脲（Ｎｎｉｔｒｏｓｏｍｅｔｈｙｌｕｒｅａ，ＮＭＵ）相同；进行结构确证研究发现，该色谱峰的质谱特征峰（ｍ／ｚ６４、１０２、１４５）及紫外吸收光谱（λｍａｘ＝２３０ｎｍ）与ＮＭＵ标准品相同。结论：实验结果充分说明该色谱峰含ＮＭＵ，首次直接证明了亚硝化食品中存在ＮＭＵ。

胃癌病因:人N-亚硝酰胺暴露研究

胃癌是严重危害人类健康的常见病,其发生与膳食因素密切相关.N-亚硝酰胺(NAD)是诸多胃癌高危因素中病因学证据最多的可疑病因,但是长期缺乏流行病学相关性证据和NAD详细化学结构资料,胃癌NAD病因的理论难以确立.

高效液相色谱-光水解热裂解-热能分析联用技术测定烟草中的N′-亚硝基去甲烟碱

应用实验室自行设计的高效液相色谱仪－光水解热裂解器－热能分析仪联机装置，建立了一种准确有效的色谱分析方法，用于分离检测烟草中的烟草物有亚硝胺Ｎ＇－亚硝基去甲烟碱（ＮＮＮ）、４－亚硝基甲氨基－１－（３－吡啶基）－１－丁酮和另外两种挥发性亚硝胺二甲基亚硝胺、亚硝基吡咯烷。ＮＮＮ浓度在１～１０ｍｇ／Ｌ时ＮＮＮ与ＮａＮＯ２的色谱峰面积比与浓度呈线性关系，绝对检测下限为６ｎｇ。

Detection of CpG methylations in human mismatch repair gene hMLH1 promoter by denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC)

Objectives: To develop a novel method to detect CpG methylation by DHPLC. Methods: After DNA was treated with sodium bisulfite, mismatch repair gene hMLH1 promoter was amplified by polymerase chain reaction (PCR). DHPLC was used to separate the PCR products at their partially denaturing temperatures. BstUI digestion assay was also used for comparison study. Results: A 294bp band was obtained by PCR from each DNA samples of colon cancer cell line RKO and gastric cancer cell line PACM82. These two bands could be separated completely by DHPLC at 53°C (retention time 6.7 min for RKO vs. 6.2 min for PACM82). We concluded that the hMLH1 promoter in RKO cells is methylated, while PACM82 is not methylated, since methylation can protect the conversion of C to T and keep higher C/G content after bisulfite treatment, leading to the delayed time. These results consistent with those from BstUI digestion assay. Conclusion: Methylation in CpG islands of hMLH1 could be detected conveniently by DHPLC after bisulfite modification.

鱼露灌胃后猪胃内N-亚硝基甲基脲的合成

目的 研究胃癌高发区福建省长乐县居民经常食用的鱼露在实验猪胃内合成强致癌性亚硝酰胺类物质Ｎ亚硝基甲基脲（ＮＭＵ） 的情况。方法 对小型实验香猪胃造瘘，经瘘管灌注鱼露和ＮａＮＯ２，３０ 分钟后抽取胃液，经纯化浓缩，用高效液相色谱光水解热裂解器热能分析仪联机装置，检测胃液样品中的ＮＭＵ。结果 在ｐＨ 值１ ～２ 条件下，检测到猪胃内合成的ＮＭＵ；ＮＭＵ 合成量与添加的亚硝酸盐量有剂量依赖关系：当ＮａＮＯ２ 灌胃３ ．４８ 和０ ．８７ ｍ ｍｏｌ 时，胃液中ＮＭＵ 浓度分别为２５ ．４ 和７－９７ μｍｏｌ／Ｌ；而当ＮａＮＯ２ 为０ ．２２ ｍｍｏｌ 时，没有检测到ＮＭＵ。结论 在一定的胃内酸性条件及亚硝酸盐存在的情况下，接受鱼露灌胃的实验猪胃内有ＮＭＵ 的合成。因此推测胃内亚硝酸盐水平较高且经常食用鱼露者，胃内极可能有ＮＭＵ 等亚硝酰胺的内源性合成。

变性高效液相色谱法检测CpG岛胞嘧啶甲基化

目的 建立一种新型的CpG岛胞嘧啶甲基化快速检测方法。方法 用亚硫酸氢钠处理DNA ,再用链特异性聚合酶链反应 (PCR)对错配修复基因hMLH1启动子含CpG位点的靶序列进行扩增 ;利用变性高效液相色谱法 (DHPLC)在部分变性温度下测定靶序列的保留时间 ,并与亚硫酸氢钠 酶切法测定结果进行比较。结果 用DHPLC对结肠癌细胞株RKO和胃癌细胞株PACM82的hMLH1启动子进行测定 ,发现RKO细胞PCR产物的保留时间明显长于PACM82细胞PCR产物的保留时间(6 .7min比 6 .2min)。RKO细胞PCR产物保留时间的延长是亚硫酸氢钠处理后的模板中胞嘧啶和鸟嘌呤含量较PACM82高所致。从此结果分析 ,可以判断出RKO的hMLH1启动子已甲基化 ,而PACM82细胞未甲基化。此结果与酶切法结果完全一致。结论 新方法可以快速检测CpG岛胞嘧啶甲基化。