除蛋白方式对湛江等鞭金藻多糖的组成、结构特征和体外抗肿瘤活性的影响

为探索适宜的微藻多糖除蛋白方式,以湛江等鞭金藻Isochrysis zhanjianggensis为试验材料,通过水提醇沉法得到粗多糖(F),再分别采用Sevag法和三氯乙酸(TCA)法去除粗多糖蛋白得到样品F_S和F_T,然后对F、F_S和F_T进行总糖、硫酸根含量和单糖组成检测,并通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和凝胶排阻层析(Sephacryl S-100)对其成分加以分析,另考察了3种组分体外对6株肿瘤细胞(MCF-7、HeLa、SW480、HT29、HepG2和A549)的抑制作用。结果表明:湛江等鞭金藻中主要的单糖组成包括甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖和岩藻糖;经不同除蛋白方式处理后所得样品F_S和F_T的单糖组成比例发生变化;粗提物F中高相对分子质量组分(80 000～90 000)在Sevag法处理后比例下降,但在TCA法处理后得以较好保留;而TCA法处理由于水解和透析的作用使得低相对分子质量组分比例下降;体外抗肿瘤活性试验中3种多糖样品同浓度下对肿瘤细胞的抑制作用相比较,TCA法所得样品F_T活性最强,粗提物F次之,Sevag法所得样品F_S最弱。研究表明,不同除蛋白方式所得的多糖在组成和活性上有所差异,在多糖商品化开发探索中应考虑以活性为导向进行工艺选择和优化。

褐藻多糖体外免疫调节活性研究

以甘露糖醛酸多糖和岩藻聚糖硫酸酯为实验材料,通过酸水解法得到不同的聚甘露糖醛酸组分;采用超声法对岩藻聚糖硫酸酯进行降解,收集不同分子量范围区间的组分,对各样品进行红外光谱分析,并考察了体外对RAW264.7细胞活力的影响,以探索各组分的体外免疫调节活性。实验结果表明,采用三氟乙酸对甘露糖醛酸多糖进行水解,其红外谱图与水解前有明显变化,出现酯基吸收峰,表明水解程度较高;而醋酸水解后红外吸收谱图峰型无显著变化;采用凝胶排阻层析进行分子量检测,各组水解后的聚甘露糖醛酸分子量有不同程度降低。岩藻聚糖硫酸酯经超声处理后,分子量>100kD的组分在2μg/mL浓度下具有提高RAW264.7活性的作用,而浓度上升至54、162μg/mL时对细胞活性有抑制作用;而水解后所得的聚甘露糖醛酸各样品对RAW264.7活性无显著影响。