茶树脂氢过氧化物裂解酶基因CsiHPL1的克隆及表达

根据茶树基因CsiHPL1的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR方法从茶树品种龙井43'中克隆了CsiHPL1序列,并分析了CsiHPL1在生物和非生物胁迫下的诱导表达情况及亚细胞定位。结果表明,CsiHPL1包含一个1 476 bp的最大开放阅读框,编码491个氨基酸,预测为13-HPL基因。Real-Time PCR分析结果表明,CsiHPL1的表达受到茶尺蠖取食、机械损伤和茉莉酸的诱导;构建了CsiHPL1与绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组表达载体,经农杆菌瞬时转化烟草叶片,利用激光共聚焦显微镜在叶绿体中观察到GFP荧光,表明CsiHPL1编码的蛋白质为叶绿体蛋白质。

龟纹瓢虫成虫对亚洲玉米螟卵的捕食作用

本试验研究了龟纹瓢虫Propylaea japonica(Thunberg)成虫对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guen啨e)卵的功能反应、寻找效应以及干扰效应。结果表明,其功能反应符合Holling功能反应Ⅱ型,拟合获得其模型为:Na=1.1945N/(1+0.00406N)。日最大捕食量为294粒。龟纹瓢虫寻找效应随自身密度的增加而降低,可用Hassell数学模型描述,模型为:E=0.4497P-0.5777,相互干扰模型为:E=0.7153P-1.0851。3个模型为评价龟纹瓢虫成虫控制亚洲玉米螟的作用提供了科学依据。

茶树醇脱氢酶基因的表达特征及番茄遗传转化分析

根据茶树醇脱氢酶基因(CsiADH1)的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR方法从茶树品种‘龙井43’中克隆了CsiADH1序列,分析了CsiADH1在生物和非生物胁迫下的诱导表达情况并转化番茄。结果表明:CsiADH1包含一个1 044bp的最大开放阅读框,编码347个氨基酸。qRT-PCR分析显示,CsiADH1的表达受到茶尺蠖取食、机械损伤、茉莉酸和水杨酸的诱导;将CsiADH1基因ORF区域克隆进pCAMBIA1301载体中,构建了由CaMV35S启动子驱动的CsiADH1基因植物表达载体pCAMBIA-ADH,并以农杆菌介导的方法侵染番茄‘中蔬四号’子叶,经PCR鉴定,获得了8个转CsiADH1基因阳性植株。该结果为进一步揭示CsiADH1基因在植物诱导防御反应中的分子机理研究奠定了基础。

中华通草蛉幼虫对玉米蚜捕食作用的研究

室内研究了中华通草蛉幼虫对玉米蚜的功能反应及三龄幼虫的寻找效应。结果表明,各龄幼虫的功能反应均属HollingⅡ型并获得其数学模型。草蛉幼虫食量随龄次的增加而增大,二、三龄幼虫的a′/Th值明显大于一龄幼虫,三龄幼虫寻找效应用Hassell-Varley干扰模型拟合,得出E=0.2814P-0.3911,寻找效应随自身密度的增大而减小。Beddington模型拟合后获得:E=0.2753/(0.7703+0.2297P),表明寻找效应随自身密度和猎物密度的增大而呈双曲面下降趋势。

夏玉米田害虫种类调查

2005年6月10日到2008年9月20日在泰安市泰山区宅子村和济南市长清区界首村分别选择10 hm2以上的不同生态型夏玉米田(大面积玉米田、周围为蔬菜的玉米田、周围为果树的玉米田),采用抽样调查方法通过目测法、扫网法和剥查法调查了夏玉米田整个生长季节的害虫发生情况,采集到标本37 986件,通过显微镜和解剖镜下观察其形态特征,参照有关文献资料,鉴定出78种害虫,隶属2个门、3个纲、9个目、36个科。根据调查结果,组建了玉米田害虫名录,明确了泰安市和济南市玉米田害虫群落的一般结构,分析了各类群相对多度,泰安市玉米田害虫群落结构主要类群是直翅目昆虫,共有22种,占群落物种总数的28.21%,其次为鳞翅目、鞘翅目和同翅目,分别占总数的20.51%、15.38%和12.82%。

不同生态型夏玉米田节肢动物群落特征的研究

分析了泰安市3种不同生态型夏玉米田节肢动物群落结构组成及相关特征指数、优势种群和优势度,并研究了不同生态型夏玉米田节肢动物群落中各类群的相对多度。结果表明,粮菜区和粮果区节肢动物丰富度、个体总数、多样性指数和均匀度指数均明显高于纯粮区,而生态优势度均明显低于纯粮区,纯粮区捕食性和寄生性天敌种群数量少于粮菜区和粮果区。夏玉米田物种丰富度在不同时间序列上差异明显,自7月中旬开始物种丰富度呈急剧增大趋势,8月13日物种丰富度达最大值61种,此后物种丰富度逐渐波动减少,9月29日达最低点。

夏玉米田害虫天敌种类调查

2005年6月10日至2008年9月20日在泰安市泰山区宅子村和济南市长清区界首村分别选择面积10 hm2以上的不同生态型夏玉米田(大面积玉米田、周围为蔬菜的玉米田、周围为果树的玉米田)抽样调查了夏玉米整个生长季节的害虫天敌发生情况,共59种,隶属1个门、2个纲、8个目、25个科。

三突花蛛对亚洲玉米螟幼虫的捕食作用

在室内条件下,研究了三突花蛛对亚洲玉米螟二龄幼虫的捕食作用及寻找效应。结果表明,三突花蛛对亚洲玉米螟幼虫的捕食效应可拟合HollingⅡ型,拟合方程为Na=1.1359N/(1+0.09534N),日最大捕食量为64.35头;三突花蛛的寻找效应利用Hassell-Varley干扰模型拟合,得出E=0.4063P-0.5891,利用Bed-dington模型拟合获得E=0.4026/[1+0.2382(P-1)],表明寻找效应随三突花蛛自身密度的增大而呈下降趋势。

14种植物精油对茶尺蠖行为的影响

为获得能够应用于茶园茶尺蠖Ectropis obliqua"推—拉"策略的行为调节剂,在室内测定了茶尺蠖成虫对14种植物精油的趋性反应,及植物精油对茶尺蠖雌虫产卵行为的干扰作用,并采用叶碟法测定了植物精油对茶尺蠖幼虫的拒食作用。结果表明,罗勒、迷迭香、肉桂、茴香及天竺葵5种植物精油对茶尺蠖成虫表现出一定的驱避活性,并且迷迭香油和天竺葵油还能显著干扰雌虫的产卵活动。在3个浓度处理下,茴香、罗勒和藿香植物精油对茶尺蠖3龄幼虫表现出显著的拒食活性。随着精油处理浓度的升高,茶尺蠖幼虫的拒食率升高,生长率随之下降。试验结果证明迷迭香、罗勒、茴香及天竺葵等植物精油对茶尺蠖具有显著的行为调控功能,具备作为茶尺蠖防控剂开发的潜力,值得进一步研究。

灰茶尺蠖性信息素田间应用技术研究

灰茶尺蠖是我国茶树重要的食叶害虫,严重影响茶叶的质量和产量。为了给灰茶尺蠖性信息素的田间应用提供指导,本文对其性信息素缓释载体类型、诱捕器类型、诱捕器高度以及使用间距等参数进行了研究。结果显示,灰茶尺蠖性信息素以异戊二烯橡胶塞为缓释载体对灰茶尺蠖雄虫具有最好的引诱效果,效果优于硅胶塞和PVC毛细管;5种测试诱捕器中,船型诱捕器最适合引诱灰茶尺蠖;当诱捕器置于茶树上部25cm时,引诱效果最好;诱捕器保持15 m的间距时,诱捕效率最高。本研究结果可为灰茶尺蠖性信息素应用于雄虫诱杀提供科学依据。

茶尺蠖为害提高邻近茶苗对茶尺蠖幼虫的防御能力

本文研究了茶树虫害诱导挥发物(Herbivore-induced plant volatiles,HIPVs)对邻近茶苗防御能力的影响。将健康茶苗放在茶尺蠖取食的茶苗附近,作为HIPVs的处理,测定了茶树防御相关基因在不同处理下的表达水平、抗性防御物质的水平,并检测了茶尺蠖危害茶苗邻近植株对茶尺蠖幼虫生长的影响。研究结果表明,与对照相比,茶尺蠖幼虫为害茶苗释放的HIPVs在处理后24 h和12 h内分别显著诱导邻近茶苗Csi LOX1和Csi ACS1基因的表达水平,这些挥发物还能增强茶尺蠖取食诱导的防御基因的表达。HIPVs处理3 d后,茶树的重要防御物质多酚氧化酶(Polyphenol oxidases,PPOs)活性显著高于对照,是对照的1.36倍,同时,取食这些茶苗的茶尺蠖幼虫体重也显著低于对照。上述结论表明茶尺蠖取食诱导的挥发物能够作为信号物质在茶树中传递,并能够通过增强茉莉酸和乙烯抗虫途径提高对茶尺蠖的抗性。

基于性信息素的茶树主要鳞翅目害虫防治技术

性信息素是指昆虫释放的、用于调控同种异性求偶和交配行为的挥发性气味化合物。基于性信息素开发的防治产品因其具有高效、环保、专一性强等优点,受到各国科学家的肯定,被认为是"生物合理农药",是一种十分理想的绿色防控手段。本文选择了目前茶树上发生较为严重的几种鳞翅目害虫——灰茶尺蠖、茶尺蠖、茶毛虫、斜纹夜蛾、茶细蛾,对其性信息素的原理、使用技术、防治效果等方面进行介绍,以期为合理选择利用茶树害虫性信息素进行的绿色防控提供指导。

利用黄板监测不同茶树品种(品系)上黑刺粉虱成虫的种群消长及日节律变化

黄板诱杀是监测与防治茶园黑刺粉虱成虫的主要技术措施之一。本文利用黄板对不同品种（品系）上黑刺粉虱成虫的种群密度、年消长动态，以及一天中不同时间段内色板诱集到的粉虱成虫数量进行了较系统的调查。结果表明：1）中选2号、中选3号和中选7号上黑刺粉虱成虫的发生数量显著低于目前茶区大面积种植的福鼎大白茶；2）在杭州黑刺粉虱成虫数量具有明显的4个高峰期，其中春季和秋季的虫口发生数量较高；3）色板在上午9：00-11：00期间诱集到的黑刺粉虱成虫数量最高。

茶丽纹象甲对茶树品种的取食选择及其诱导的4种萜烯类化合物

本文以龙井43为对照,研究了茶丽纹象甲雌、雄成虫对不同品种茶苗的选择性和取食量差异,并比较了茶丽纹象甲取食诱导龙井43、黄旦、福云6号和丹桂4个品种茶苗所释放的4种重要萜烯类化合物的差异。结果表明,在有食源选择的情况下,茶丽纹象甲雌成虫在福云6号茶苗上的着落率和取食量都显著高于龙井43,而雌、雄两性对龙井43茶苗的取食量均显著高于黄旦;但是,在无食源选择的情况下,同一性别茶丽纹象甲对4个品种茶苗的取食量之间不具显著差异。与同一品种的健康茶苗相比,茶丽纹象甲取食均可显著诱导不同品种4种萜烯类物质的释放。茶丽纹象甲对不同品种茶苗为害相同时间,各品种萜烯类化合物的释放量有所差异,为害12 h,丹桂中芳樟醇的释放量和福云6号中DMNT、法呢烯的释放量显著高于龙井43;为害24h,黄旦和丹桂中罗勒烯的释放量、福云6号中芳樟醇的释放量,以及黄旦、丹桂和福云6号中DMNT和法呢烯的释放量均显著高于龙井43。

茶树CsWRKY3基因的克隆及表达分析

WRKY转录因子家族普遍存在于植物体内,对植物的多种生理过程有广泛的调控作用,在众多植物转录因子家族中占有重要地位。本研究从茶树中克隆获得一个WRKY基因,命名为CsWRKY3,该基因包含一个1 710 bp的开放读码框,编码569个氨基酸。qRT-PCR结果显示,CsWRKY3在茶树根、叶、花中的表达水平较高,在茎、种子中的表达水平较低。当茶树叶片受到机械损伤或者被茶尺蠖幼虫取食时,CsWRKY3基因被迅速诱导且表达差异显著。本研究表明CsWRKY3转录因子基因参与了茶树的抗虫防御反应。

茶尺蠖脂肪酶合成基因EoL2的克隆和组织表达特征

昆虫脂肪酶可参与脂类消化、吸收和运输,并能介导植物的抗病虫功能。本研究通过茶尺蠖唾液腺转录组数据库发掘到该基因片段,采用RACE技术克隆获得了一条茶尺蠖脂肪酶合成基因序列,命名为Eo L2,并检测了其在茶尺蠖不同生育期及不同组织部位中的相对表达水平。研究结果表明,Eo L2的c DNA序列全长1310 bp,开放阅读框为1041 bp,编码一个包含346个氨基酸的蛋白,推测该蛋白相对分子量为37.96 k D,推测等电点(PI)为8.41,具有脂肪酶典型的GXSXG丝氨酸活性保守序列,其氨基酸序列与家蚕相似度最高,为57%。实时荧光定量PCR结果表明,Eo L2在卵中的表达量显著低于其它虫态;在1龄幼虫期的相对表达水平显著高于2~5龄;在成虫中的表达量显著高于蛹;在血淋巴中的表达量显著高于中肠、表皮、脂肪体和唾液腺。

茶园小贯小绿叶蝉各虫龄形态特征

茶小绿叶蝉在我国产茶地区分布普遍,为我国茶园重要害虫。近几年研究显示,小贯小绿叶蝉为我国茶园小绿叶蝉优势种。本文介绍了茶小绿叶蝉的种名变更史,并描述了小贯小绿叶蝉各虫龄的形态特征,以期为生产上识别和防治技术开发等方面提供基础指导。

吲哚诱导对茶树抗茶小绿叶蝉的影响

为明确吲哚处理对茶树抗茶小绿叶蝉Empoasca onukii的影响,以龙井43为材料,使用吲哚诱导茶树作为处理,以未处理茶树作为对照,于室内测定茶小绿叶蝉对不同茶树的选择趋向,利用昆虫刺探电位图谱分析茶小绿叶蝉的取食行为,通过气相色谱-质谱联用仪分析吲哚处理对茶树挥发物的影响,并利用实时荧光定量PCR技术测定茶树防御相关基因的表达量。结果表明,在所有时间段茶小绿叶蝉成虫更趋向于取食对照组茶树,至48 h时对照组茶树上的成虫数量是处理组的2.45倍;茶小绿叶蝉3龄幼虫在吲哚处理组茶树上的非取食波(NP波)持续时间占总取食时间的72.15%,在对照组茶树上的非取食波(NP波)持续时间占比则为33.07%,且在对照组茶树上的主要取食波E2波的持续时间是处理组茶树上的3.58倍。相较于对照组茶树,吲哚处理组茶树释放出的挥发物总量显著增加,其中α-法尼烯可以趋避害虫并对天敌有吸引力,且吲哚处理组茶树的防御基因表达量显著升高。表明吲哚处理茶树后,茶小绿叶蝉对其的取食量下降,茶树的挥发物释放量增加且抗性防御基因表达量提高,增强了茶树对茶小绿叶蝉的抗性。

烟碱对假眼小绿叶蝉和茶尺蠖的忌避(拒食)活性

【目的】尼古丁是茄科植物的重要生物碱,本文首次确定了硫酸烟碱对假眼小绿叶蝉Empoasca vitis G?the的驱避作用和田间防效,以及不同浓度硫酸烟碱对茶尺蠖Ectropis obliqua Prout的拒食作用。【方法】使用Y形嗅觉仪和T形观测室研究了假眼小绿叶蝉对硫酸烟碱的行为反应,使用叶碟法测试了硫酸烟碱对茶尺蠖的拒食作用。【结果】硫酸烟碱600倍稀释液和800倍稀释液处理茶梢分别对叶蝉若虫的寄主选择行为和雌成虫的产卵具有显著的驱避作用;田间喷施硫酸烟碱对假眼小绿叶蝉的防治效果较好。此外,硫酸烟碱对茶尺蠖幼虫具有拒食作用,并且拒食作用随着取食时间的延长而增强,取食8 d以后,死亡率显著高于对照。【结论】本研究结果为开发茶树害虫的植物源忌避(拒食)剂提供一定的科学参考。

温度对悬铃木方翅网蝽生长发育、存活和繁殖的影响

在室内研究不同温度下悬铃木方翅网蝽各虫态的发育历期、存活率及雌成虫的产卵量,组建不同温度下的实验种群生命表。结果显示,在15-33℃范围内,随温度升高悬铃木方翅网蝽的发育速率加快,并符合Logistic模型。悬铃木方翅网蝽卵、1龄、2龄、3龄、4龄、5龄若虫、产卵前期和全世代的发育起点温度分别为10.42、9.49、7.89、10.12、8.82、7.80、9.69和10.42℃,有效积温分别为153.9、38.8、41.4、31.8、42.0、69.5、101.9和479.3日.度。悬铃木方翅网蝽世代存活率和单雌产卵量在测定温度范围内均表现为先升高后降低的抛物线关系,在2 5℃时最高,分别为57.81%和87.71粒/雌。成虫寿命和雌成虫产卵期均随温度的升高而缩短。25℃时,种群内禀增长率和种群趋势指数最大,分别为0.0388和22.46。25~30℃是该虫生长发育的最适温区。