基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究

目的对肥胖抵抗大鼠尿液进行代谢组学分析,研究高糖高脂饮食对非肥胖型代谢紊乱的影响,探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测其生化指标,同时对尿液进行气相色谱-质谱分析,得到的数据进行代谢组学分析。结果除羰基戊二酸(RSD=11.77%)外,其他14种代谢物的相对标准偏差(RSD)均在10%以内,R2Y和Q2值分别为0.929和0.905;与对照组相比,肥胖抵抗组大鼠尿液中能量代谢过程的相关代谢物羟基乙酸、苏氨酸、丝氨酸、丁二酸、延胡索酸、2,3-二羟基-丁酸、苹果酸、羰基戊二酸减少,同时与肠道菌群代谢相关的代谢物对羟基苯甲酸、葡萄糖醇、反式乌头酸、果糖、葡萄糖、肌醇含量也明显减少。结论饮食干预16周之后,肥胖抵抗组大鼠能量代谢过程中的主要代谢物发生异常,基于GC-MS的代谢组学分析方法能较为全面的反应能量代谢状况,发现差异代谢物,可用于非肥胖型2型糖尿病发病机制的研究。

医用三氧治疗疾病的机制及临床应用

医用三氧具有杀菌、改善代谢、激活免疫系统等作用,广泛应用于治疗病毒性肝炎、骨关节病、肿瘤、妇科疾病、血管疾病等。本文主要介绍医用三氧治疗疾病的机制、临床应用的现状以及存在的问题,并对该治疗方法的发展前景作出展望。

非肥胖糖代谢异常大鼠血清的代谢组学

目的探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测生化指标,对血清进行代谢组学分析。结果大鼠在高糖高脂饮食饲养16周后,与基础饲料组相比,血糖、胰岛素、低密度脂蛋白及总胆固醇显著升高,高密度脂蛋白显著下降,同时糖酵解产物丙酮酸降低,三羧酸循环的中间代谢物柠檬酸、苹果酸、延胡索酸及琥珀酸减少,尿酸增加,脂肪酸、氨基酸代谢异常。结论高糖高脂饮食干预后,肥胖抵抗大鼠能量代谢显著变化,对探讨饮食导致的非肥胖型2型糖尿病发病机理的研究有重要意义。

臭氧大自血疗法联合药物治疗糖尿病足1例疗效观察

1病例资料〈br〉 患者男性，81岁，主因“阵发性头晕、乏力”入院，入院前右足溃破。患者既往2型糖尿病病史10年，冠心病病史5年，脑梗死病史5年，高血压病病史1年。体格检查：T 36.8℃，P 75次/分，R 18次/分，BP 160/80 mm Hg。神志清，精神差。被动卧位，查体合作。心肺听诊未见异常。腹部（-）。

磺脲类药物对成骨细胞MC3T3-E1自噬、凋亡和分化功能的影响

目的探讨磺脲类药物对成骨细胞自噬、凋亡及分化功能的影响。方法用磺酰罗丹明B染色检测不同浓度的格列本脲(GLB)、格列齐特(GLC)和格列吡嗪(GLP)对成骨细胞存活率的影响;Western blot分析3种磺脲类药物对细胞中自噬、凋亡标志蛋白表达的变化;Hoechst染色镜下观察上述药物对细胞凋亡的影响;通过对骨钙素(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)的测定研究药物对细胞分化功能的影响。结果中、高浓度的GLB、GLC和GLP使MC3T3-E1细胞存活率降低。在药物干预下,MC3T3-E1细胞自噬和凋亡标志蛋白表达增加,mTOR信号途径无明显变化。3种药物可使细胞分泌OCN和ALP的能力下降。结论 GLB、GLC和GLP可诱导成骨细胞MC3T3-E1发生自噬和凋亡,降低成骨细胞分化功能,且可能通过mTOR-非依赖途径诱导细胞自噬。

脂多糖对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响

目的研究脂多糖（LPS）对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法取处于对数期生长的INS-1细胞用于实验，分别用0．1、1．0、10．0mg／LLPS处理细胞，24h后用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测LPS对INS-1细胞增殖的影响，用二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）作为荧光探针检测细胞内活性氧的水平变化，应用Western blotting法检测细胞自噬体膜上自噬标志分子微管相关蛋白1的轻链3-Ⅱ（Map1LC3-Ⅱ）和凋亡标志蛋白聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶（PARP）切割带的变化。将INS-1细胞的自噬必需基因7（A增7）通过siRNA介导的RNA干扰手段进行沉默，然后以1．0mg／LLPS处理细胞，24h后应用Western blotting检测细胞中Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割带的水平。先用400μmoL／L的活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）处理INS-1细胞，1h后加入10．0mg／L的LPS，24h后应用Western blotting法检测细胞Map1LC3-Ⅱ蛋白和PARP切割蛋白的水平。组间数据比较采用方差分析和t检验。结果与对照组（0．755±0．030）比较，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组INS-1存活率降低，差异有统计学意义（分别为0．658±0．042、0．658±0．015、0．634±0．029，F=30．98，P〈0．01）；与对照组（0．447±0．012）相比，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组Map1LC3-Ⅱ蛋白水平增加，差异有统计学意义（分别为0．992±0．030、0．949±0．020、0．982±0．013，F=525．79，P〈0．01）；与对照组（0．055±0．001）相比，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组PARP切割蛋白水平增加，差异有统计学意义（分别为0．313±0．007、0．390±0．011、0．500±0．033，F=327．09，均P〈0．01）；与对照组比较，10mg／LLPS组活性氧产生明显增多。与对照组比较，转染Atg7siRNA组Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降，差异均有统计学意义（t=156．069、123．154、103．246，均P〈0．01）。与LPS10．0mg／L组比较，LPS10．0mg／L＋NAC组Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降，差异均有统计学意义（t=66．37、26．84，均P〈0．01）。结论LPS可诱导INS-1细胞的自噬和凋亡，且其所诱导的凋亡依赖于自噬的发生；活性氧参与了LPS诱导的INS-1细胞的自噬和凋亡。