黏蛋白1C亚基对食管癌细胞生物学行为的影响

目的探讨黏蛋白1 C亚基(MUC1-C)在食管鳞癌中的表达定位及在肿瘤细胞恶性生物学行为中的作用。方法 Western blotting检测MUC1-C在食管鳞癌组织及正常组织细胞核内的表达;运用穿膜肽Go-201抑制MUC1-C入核后,集落实验及CCK-8实验检测食管鳞癌细胞的活性、生长和增殖能力;划痕实验及Transwell小室实验检测食管鳞癌细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测食管鳞癌细胞凋亡率。结果 MUC1-C在食管鳞癌组织细胞核内的表达高于正常组织,抑制MUC1-C入核后食管鳞癌细胞活性、生长、增殖、迁移、侵袭能力均降低,凋亡率增高。结论 MUC1-C通过入核发挥作用,能诱导和促进食管鳞癌细胞的恶性生长、增殖、迁移、侵袭,抑制肿瘤细胞的凋亡。

RNA干扰沉默黏蛋白1基因表达对食管癌细胞株Eca109顺铂耐药性的影响

目的观察RNA干扰沉默黏蛋白1（MUC1）表达，食管癌细胞株Eca109在顺铂作用下的增殖差异，探讨MUC1表达与肿瘤顺铂耐药性的关系。方法设计靶向MUC1基因的慢病毒载体pGC-LV-MUC1小干扰RNA（siRNA），并以感染复数（MOI）＝100转染人食管癌细胞株Eca109，用荧光显微镜检测绿色荧光蛋白（GFP）表达，用Western blot方法检测细胞内MUC1蛋白含量，验证siRNA对MUC1基因抑制作用。设置浓度梯度0、5、15、30、45、60 μmol/L，分别作用0、12、24、48 h，应用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞抑制率，计算顺铂半数抑制浓度（IC50）。用Western blot检测细胞内凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）的表达，验证凋亡通路激活。结果与对照组比较，转染了重组慢病毒颗粒pGC-LV-MUC1 siRNA的Eca109细胞（实验组）内MUC1蛋白水平（0.566±0.202比1.252±0.323，t＝3.119，P＝0.036）；顺铂作用12 h实验组IC50（μmol/L）（66.860±4.749比30.203±0.341，t＝13.335，P＝0.000）明显下降；顺铂作用24 h实验组细胞IC50（μmol/L）明显下降（13.710±0.617比33.680±1.737，t＝18.759，P＝0.000）；实验组凋亡相关蛋白bcl-2表达减少（0.551±0.190比1.416±0.139，t＝6.362，P＝0.003），bax的表达增加（0.553±0.055比1.345±0.155，t＝8.335，P＝0.001）。结论人食管癌细胞株Eca109沉默MUC1基因表达，可以导致细胞对顺铂耐药性下降。MUC1基因可能通过抑制凋亡激活途径，增加食管癌细胞对顺铂的耐药。