制何首乌产地加工炮制一体化新方法的优势分析

目的:分析产地加工炮制一体化新方法与传统方法对制何首乌成分和药理作用的影响,阐释新方法所制备饮片的“减毒增效”优势。方法:取道地产区鲜何首乌,分别采用产地加工炮制一体化新方法(压力0.1 MPa,120℃隔水加黑豆汁蒸制10.5 h)和传统方法(隔水加黑豆汁蒸制36 h)进行炮制。2种方法均在炮制过程取样,其中新方法取样时间点依次为0.5、3、5.5、8、10.5 h,传统方法每隔4 h取样1次(共炮制36 h)。采用高效液相色谱法(HPLC)建立指纹图谱并确定共有峰,蒽酮-硫酸比色法测定多糖类成分含量,按2020年版《中华人民共和国药典》何首乌与制何首乌“含量测定”项下方法检测不同炮制品中蒽醌类及二苯乙烯苷含量。在药效实验中,90只SD大鼠随机分为空白组,生品、常压24 h炮制品、常压30 h炮制品、加压8 h炮制品的低、高剂量组(4.1、16.5 g·kg^(-1)),每组10只,雌雄各半。均连续灌胃给药29 d,1次/d。末次给药后腹主动脉取血,分离血清,称取大鼠体质量、肝脏质量,计算脏器指数;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏组织病理变化,生化法检测血清中肝功能指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平及脑组织中氧化指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。结果:在生何首乌、新方法和传统方法制何首乌指纹图谱中共确定了14个共有峰,并指认其中3个色谱峰分别为二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚。各炮制品在0~25 min特征峰面积变化较为明显,表明不同炮制方法对制何首乌中极性较高的成分含量存在影响,2种方法的变化趋势相似,以新方法变化程度较高。含量测定结果显示,与传统方法比较,新方法所得炮制品中补益类成分多糖含量升高、肝损伤类成分二苯乙烯苷、结合蒽醌含量降低。药理学指标显示,与空白组比较,常压24 h炮制品低、高剂量组雄鼠AST、LDH明显降低(P<0.05,P<0.01),加压8 h炮制品低、高剂量组雄鼠AST均显著降低(P<0.01);与同剂量生品组比较,常压30 h炮制品低剂量组雄鼠AST、LDH水平明显降低(P<0.05,P<0.01),加压8 h炮制品低、高剂量组雄鼠AST均显著降低(P<0.01),各给药组雌鼠各项生化指标与空白组比较差异无统计学意义。结论:制何首乌产地加工炮制一体化新方法8 h即可达到相关规定品质,该法所得炮制品在“减毒增效”方面较传统方法更具优势,且节能、避免成分损失,可为制何首乌优质饮片生产、其他根及根茎类中药的产地加工炮制一体化方法提供思路。

基于传统及现代方法的白花蛇舌草及其地方习用品鉴别研究

目的通过对白花蛇舌草及其2种地方习用品(伞房花耳草、纤花耳草)的性状、显微特征和HPLC指纹图谱全面分析比较,对三者进行鉴别研究。方法采用传统方法观察三者性状,鉴别茎横切面、叶横切面、果实横切面、种子横切面及药材粉末特征;采用HPLC指纹图谱比较三者色谱峰差异。结果性状项下,白花蛇舌草茎为圆柱形,蒴果单生或双生于叶腋,扁球形,直径2~3 mm,果柄长;伞房花耳草和纤花耳草为四棱柱形,伞房花耳草为2~5蒴果呈伞房花序生于叶腋,球形,直径1~1.5 mm,具细长的柄;纤花耳草1~3蒴果簇生于叶腋,卵圆形,边缘有纵棱,直径约1.5 mm,无柄,叶干时边缘反卷呈长针状。鉴别项下,白花蛇舌草茎横切面呈类圆形,叶中脉处下方突起,内果皮纤维层由2层纤维细胞组,种皮细胞表面观为多边形,壁上密布细小红棕色或黄棕色的疣状点;伞房花耳草茎横切面为四棱形,种皮细胞表面观为多边形,壁波状弯曲,壁上没有疣状点;纤花耳草中脉上方略四陷,下方不突起;内果皮纤维层由8~13层纤维细胞组成。HPLC指纹图谱分析结果显示,白花蛇舌草与常见地方习用品有各自特征色谱峰,有一定差别。结论传统和现代方法均显示白花蛇舌草及伞房花耳草、纤花耳草在性状、组织显微横切面、粉末特征、化学成分方面存在一定差异,可有效区分白花蛇舌草及其2种地方习用品。