DLL3蛋白在人小细胞肺癌细胞中的功能及其机制

为探讨DLL3(human notch ligand delta-like 3)过表达对人小细胞肺癌细胞的影响及可能的作用机制,通过PCR方法扩增人DLL3基因全长序列,并克隆至慢病毒表达载体Lenti-EFS-FLAG-puro而构建人DLL3基因过表达慢病毒表达质粒,酶切及测序鉴定质粒正确。通过慢病毒包装及感染,构建DLL3稳定过表达的人小细胞肺癌细胞株,并通过Western blot验证DLL3蛋白的表达。采用CCK-8法检测DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的增殖的影响。采用平板克隆实验检测DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的克隆形成的影响。Western blot检测DLL3过表达对细胞周期相关蛋白CyclinD1,CyclinD3的表达水平的影响。结果表明:人DLL3过表达慢病毒表达质粒构建成功;CCK-8实验显示DLL3过表达促进人小细胞肺癌细胞的增殖。平板克隆实验显示DLL3过表达提高人小细胞肺癌细胞的克隆形成能力。Western blot结果表明DLL3过表达增加细胞周期蛋白CyclinD1,CyclinD3的表达水平。可见DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的增殖具有促进作用。

唾液酸、C反应蛋白对阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征合并2型糖尿病的影响

目的探讨唾液酸(SA)、C反应蛋白(CRP)对阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并2型糖尿病(T2DM)患者的影响。方法选取2019年1月-2019年8月在徐州医科大学附属淮安医院呼吸与危重症医学科住院患者75例,其中,OSAHS组45例,OSAHS合并T2DM组30例。选取同期在该院体检中心健康体检者30例为健康对照组。收集研究对象的一般资料,检测CRP、SA、纤维蛋白原(FIB)水平,采用便携式多导睡眠记录仪记录患者的呼吸暂停低通气指数(AHI)、平均血氧饱和度(MSaO_(2))、低通气指数(HI),并进行数据分析。影响因素的分析采用多元逐步线性回归或Logistic逐步回归分析。相关性分析用Spearman法。结果OSAHS组和OSAHS合并T2DM组患者CRP、SA水平高于健康对照组(P<0.05);OSAHS合并T2DM组患者CRP、SA水平高于OSAHS组(P<0.05)。OSAHS合并T2DM组和OSAHS组患者的AHI、MSaO_(2)、HI与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),OSAHS合并T2DM组AHI、HI和MSaO_(2)与OSAHS组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BMI、SA和FBG为低通气的危险因素(P<0.05)。Logistic逐步回归分析显示,CRP[OR=1.258(95%CI:1.014,1.561)]、SA[OR=4.232(95%CI:1.026,17.460)]和HI[OR=1.264(95%CI:1.003,1.594)]是OSAHS患者合并T2DM的独立危险因素(P<0.05)。相关性分析发现,血清SA、CRP与AHI呈正相关(P<0.05),与FBG呈正相关(P<0.05),与MSaO_(2)呈负相关(P<0.05)。结论SA水平与OSAHS患者疾病严重程度相关,SA、CRP和HI是OSAHS患者合并2型糖尿病的独立危险因素,检测OSAHS患者的血清SA水平或许可评估患者体内的炎症状态及合并T2DM的可能风险。

基于D-二聚体分层策略的急诊患者肺栓塞临床可能性评估新模型

目的评价基于D-二聚体分层策略的肺栓塞临床可能性评估方法用于预测评估急诊患者肺栓塞的效果,探寻适合急诊科的肺栓塞临床可能性评估新模型。方法对徐州医科大学附属淮安医院急诊科诊治的262例疑似肺栓塞患者检测血浆D-二聚体水平,确定其最佳截断值并联合简化Wells评分、修订版Geneva评分进行分层评估并改良YEARS法,评价它们与YEARS评估法对肺栓塞的预测效能。采用CT肺动脉造影(CTPA)用于确诊肺栓塞。最后将预测效能最高的临床可能性评估方法与D-二聚体最佳截断值纳入logistic回归分析,建立Nomogram模型预测急诊患者疑似肺栓塞的临床可能性,并使用AUC、校准曲线验证模型效能。结果:在联合D-二聚体进行分层评估策略下,简化Wells评分、修订版Geneva评分及YEARS法、改良YEARS法的ROC曲线下面积依次为0.757、0.660、0.638及0.716;敏感度依次为94.25%、86.21%、97.7%及95.40%,特异度依次为49.14%、42.29%、22.29%及41.71%,准确率依次为64.12%、56.87%、47.33%及59.54%,差异有统计学意义(P<0.05)。Nomogram预测模型显示,模型有较好的预测能力。结论D-二聚体分层联合简化Wells评分对急诊患者肺栓塞的评估价值最高,适当提高YEARS法的D-二聚体分层界值进行评估,可提高YEARS法预测效能。新构建的Nomogram模型是预测评估急诊患者疑似肺栓塞实用且有价值的临床工具。

间质性肺病小鼠外周血循环纤维细胞的变化及依那西普的干预作用

目的:观察博来霉素(BLM)诱导的间质性肺病(ILD)小鼠外周血循环纤维细胞的数量变化,依那西普干预对ILD和循环纤维细胞的作用。方法:60只SPF级昆明小鼠随机分为3组:模型组(A组,n=20)、依那西普干预组(B组,n=20)、生理盐水对照组(C组,n=20)。分别于造模后第7、14、21、28天,流式细胞仪检测小鼠外周血中循环纤维细胞百分比,HE染色和Masson染色观察肺组织炎症及肺纤维化程度,免疫组织化学染色观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,碱水解法测定羟脯氨酸含量,并对实验结果进行统计学分析。结果:A组在BLM处理后第14天炎性症状最明显,第21天纤维化最明显,B组纤维化评分在第14、21、28天和炎症评分在第14、21天较A组低(P <0. 01);B组各个时期羟脯氨酸含量较A组低(P <0. 05);B组在第14天和第21天α-平滑肌肌动蛋白表达较A组少;A组外周血循环纤维细胞百分比在第7天达到最高,之后呈下降的趋势,B组在第7、14、21天显著低于同一时期A组的循环纤维细胞百分比(P <0. 01);A组和B组外周血循环纤维细胞数量与肺部炎症、纤维化评分及羟脯氨酸含量呈正相关(r=0. 540,0. 384,0. 535;n=40,P <0. 05)。结论:在BLM诱导小鼠ILD的病理进程中,循环纤维细胞可能参与了ILD的发生发展。依那西普减轻小鼠ILD,同时减少外周血循环细胞数量。