SGLT2抑制剂治疗射血分数保留的心力衰竭作用机制的研究进展

综述钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂在射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)治疗中改善心力衰竭的作用机制。SGLT2抑制剂可明显降低HFpEF病人心血管死亡或因心力衰竭再住院的风险,但其心血管获益机制尚未完全明确。

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者心外膜脂肪组织的生物信息学研究

背景心血管疾病(CVD)是常见病和多发病,患病率和死亡率呈快速上升趋势。动脉粥样硬化(AS是缺血性CVD的病理基础,研究表明心外膜脂肪组织(EAT)通过分泌外泌体(EXO)和生物活性物质促进AS进展,但其作用机制仍需进一步研究。目的通过生物信息学方法挖掘冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者EAT中的关键基因,探讨免疫细胞浸润情况,联合CAD患者EXO间差异表达基因(DEGs)推测EAT来源EXO间DEGs并进行验证,从细胞及分子水平上探讨EAT在CAD疾病过程中的作用机制。方法从基因表达综合数据库(GEO)中下载关于EAT的数据集GSE64554、GSE120774,根据临床信息将EAT的测序数据分为CAD组和健康对照组,使用R语言及相关软件包进行生物信息学分析。首先使用R语言筛选CAD组与健康对照组EAT间DEGs,并进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,评估所选基因的生物学功能及可能参与其调控的转录因子。构建GSE64554数据集中EAT的加权基因共表达网络(WGCNA),获取同CAD表型相关的基因模块,将所获EAT间DEGs与模块内hub基因取交集获得关键基因,采用Cibersort反卷积算法对EAT组织的免疫细胞浸润情况进行分析。通过exoRbase数据库获取CAD组与健康对照组血液EXO间DEGs,CAD组和健康对照组EAT间DEGs与EXO间DEGs取交集作为CAD的诊断、治疗标志物,收集临床样本通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对其进行验证。对所选基因进行GO/KEGG富集分析和Metascape富集分析。结果共筛选出CAD组与健康对照组EAT间DEGs 1511个,其中表达上调的基因956个,表达下调的基因555个。通过对CAD表型相关的模块内枢纽基因与EAT间DEGs取交集获得EAT在CAD发生、发展中的关键基因DDX47、FEM1C、NOL11、SRP54、ABI1、PATL1、BNIP2、C1orf159、CHCHD4。免疫细胞浸润分析显示,CAD组EAT中幼稚CD4+T细胞表达丰度升高而静息树突细胞表达丰度减低(P<0.05)。筛选获得CAD EXO间DEGs 1658个,其中表达上调的基因278个,表达下调的基因1380个,EAT间DEGs与EXO间DEGs取交集,共获得129个基因,选取表达丰度较高的BPI、BIRC5、CXCL12、RNASE1、F2R作为CAD患者潜在诊断、治疗标志物,经qRT-PCR验证结果显示,CAD组与健康对照组比较BPI、BIRC5、CXCL12和RNASE1的mRNA水平升高(P<0.05),F2RmRNA水平下降(P<0.05)。GO/KEGG富集分析显示EAT间DEGs主要富集于细胞质基质、MHC蛋白复合物、RNA降解、抗原加工和呈递等,构建PPI网络,通过Cytoscape软件CytoHubba插件MCC算法获得连接度最高的基因RPS27A。Metascape富集分析显示DEGs主要富集于细胞对DNA损伤刺激反应、RNA代谢、调节细胞对压力的反应、适应性免疫系统等,TRRUST数据库预测CIITA转录因子可能参与了EAT间DEGs的调控。结论(1)EAT可能通过促炎和免疫途径参与CAD的发生和发展,DDX47、FEM1C、NOL11、SRP54、ABI1、PATL1、BNIP2、C1orf159、CHCHD4、RPS27A可能作为关键基因并发挥重要作用。(2)CAD患者EAT中幼稚CD4+T细胞表达丰度升高而静息树突细胞表达丰度减低。(3)BPI、BIRC5、CXCL12、RNASE1、F2R可能由EAT分泌并可作为CAD的诊断、治疗标志物。

沙库巴曲缬沙坦治疗扩张型心肌病疗效及安全性的Meta分析

目的:系统评价沙库巴曲缬沙坦治疗扩张型心肌病所致心力衰竭的疗效及安全性。方法:通过计算机全面检索中国知网、万方、维普、PubMed、EMbase、the Cochrane Library中沙库巴曲缬沙坦对比血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)治疗扩张型心肌病的随机对照试验(RCT)。纳入符合标准的文献,进行数据提取及文献质量评价后,采用Review Manager 5.3和Stata14.0统计软件进行数据分析及发表偏倚检验。结果:共纳入18项RCTs,涉及1415例病人。试验组N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)[MD=-543.68,95%CI(-717.27,-370.09),Z=6.14,P<0.00001]、左心室舒张末期内径(LVEDD)[MD=-3.64,95%CI(-4.34,-2.93),Z=10.14,P<0.00001]、左心室收缩末期内径(LVESD)[MD=-4.05,95%CI(-6.68,-1.43),Z=3.02,P=0.002]、左房内径(LAD)[MD=-1.71,95%CI(-2.12,-1.30),Z=8.14,P<0.00001]均明显低于对照组。试验组左室射血分数(LVEF)[MD=4.20,95%CI(3.40,4.99),Z=10.40,P<0.00001]、6 min步行试验(6MWT)[MD=48.46,95%CI(43.90,53.02),Z=20.84,P<0.00001]、治疗有效率[OR=2.92,95%CI(2.24,3.81),P<0.05]高于对照组。两组低血压、严重头晕、肾功能损害、高钾血症发生率比较,差异均无统计学意义。结论:现有证据表明,沙库巴曲缬沙坦能有效改善扩张型心肌病病人的心功能,且安全性较好。

Inclisiran与动脉粥样硬化性心血管疾病的研究进展

综述Inclisiran的最新临床结果、科研资料以及对动脉硬化性心血管病变的疗效和未来应用前景。血脂异常在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着重要的作用,特别是低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高,是其主要风险原因之一,因此,降低血浆中LDL-C的水平,能够减少或者预防动脉粥样硬化的发生。Inclisiran是一种新型降脂药物,目前,美国食品药品监督管理局(FDA)和欧洲药品管理局(EMA)均已经对该药进行授权。

硫化氢对氧应激所致心肌细胞损伤的影响及机制

目的探讨硫化氢供体硫氢化钠对过氧化氢诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护机制。方法采用胶原酶消化分离培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,过氧化氢诱导建立氧化应激模型。经硫氢化钠和LY294002预处理探讨硫化氢对过氧化氢诱导心肌细胞损伤的保护作用,观察心肌细胞形态学变化,检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量和超氧化物歧化酶的活性,Western blot检测凋亡相关蛋白表达,流式细胞术检测心肌细胞的凋亡。结果过氧化氢可引起乳鼠心肌细胞乳酸脱氢酶、丙二醛含量升高,Akt磷酸化水平下降,Bcl-2/Bad比值降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);硫氢化钠预处理能减轻过氧化氢引起的心肌细胞损伤,乳酸脱氢酶、丙二醛含量下降,Akt磷酸化水平升高,Bcl-2/Bad比值升高,细胞凋亡率下降(P<0.05);PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002能部分减轻硫氢化钠的保护作用(P<0.05)。结论硫氢化钠预处理能使Akt的磷酸化水平升高,Bcl-2/Bad比值升高,在一定程度上减轻过氧化氢诱导的心肌细胞损伤及凋亡,硫化氢可能通过激活PI3K/Akt信号转导通路发挥保护作用。

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响及机制分析

目的观察氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响并探讨其可能作用机制。方法采用胰蛋白酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞,取2～5代用于实验,随机分为:①对照组用RPMI1640培养基;②氧化型低密度脂蛋白不同浓度(5、25、50和75mg/L)组;③氧化型低密度脂蛋白作用不同时间(6、12、24、48和72h)组;④氧化型低密度脂蛋白+p38MAPK特异性阻断剂SB203580组;⑤p38MAPK特异性阻断剂SB203580组。用RT-PCR及ELISA法检测Fractalkine mRNA及蛋白表达水平,用Westernblot法检测p38MAPK磷酸化表达水平。结果①氧化型低密度脂蛋白在一定浓度范围及作用时间呈时间-剂量依赖方式诱导Fractalkine mRNA及蛋白表达增加,最佳作用时间为48h,最佳作用浓度为50mg/L;②与对照组比较,氧化型低密度脂蛋白诱导组人脐静脉内皮细胞p38MAPK磷酸化表达水平显著增加(P<0.05);使用SB203580干预后p38MAPK磷酸化水平明显下降,与氧化型低密度脂蛋白诱导组相比差异有统计学意义(P<0.05)。③预先用p38MAPK特异性阻断剂SB203580(20μmol/L)与内皮细胞共同孵育60min后,再加入氧化型低密度脂蛋白作用48h后,Fractalkine表达水平明显降低,与氧化型低密度脂蛋白组比较有统计学差异(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白可诱导内皮细胞Fractalkine表达增加,其作用机制可能是通过p38MAPK信号转导通路。

兔饮食所致高同型半胱氨酸血症血管内皮功能的实验研究

目的 :观察高同型半胱氨酸血症对血管内皮功能的影响。方法 :建立兔高同型半胱氨酸血症模型。将 18只新西兰兔随机分为 :正常对照组 (control组 ) 6只、高蛋氨酸饮食组 (M组 ) 12只 ;于实验第 4周始 ,将M组再随机分为两组 ,M +0组 6只 ,继续饲高蛋氨酸饮食 ;M +F组 6只 ,在高蛋氨酸饮食基础上 ,再加以叶酸、VitB12 ,继续观察 3周 ;6周时统一处死动物 ,取腹主动脉 ,制备主动脉血管环 ,比较M +0组与M +F组及C组主动脉血管对Ach的最大舒张反应。同时 ,对 3组高同型半胱氨酸血症形成过程中 0周、3周、6周时血清中Hcy、ET - 1、Ang -II、NO2 ˉ/NO3 ˉ、NOS各指标及处死动物时局部血管组织中ET - 1、Ang -II、NO2 ˉ/NO3 ˉ、NOS指标进行检测并进行比较。结果 :(1)M +0组主动脉血管对Ach的最大舒张反应性 (Emax=2 6 . 73± 4 . 5 1)低于M +F组 (Emax=4 7. 84± 5 . 6 2 ,P <0 . 0 5 )及control组 (Emax=5 6 . 4 2± 7 .82 ,P <0 . 0 5 ) ;(2 ) 3周时 ,M +0组及M +F组血清中Hcy、ET - 1、Ang -II各指标均明显高于对照组及 0周时 (P <0 . 0 5 ) ;NO2 ˉ/NO3 ˉ、NOS明显低于对照组及 0周时 (P <0 . 0 5 ) ;(3) 6周时 ,M +0组上述指标继续升高 ;M +F组血清中Hcy低于M +0组 (P <0 . 0 5 ) ;NO2 -/NO3 -。

阿托伐他汀对TNF-α和IL-1β诱导的大鼠主动脉内皮细胞PAPP-A表达的影响

目的:研究阿托伐他汀对炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)诱导大鼠主动脉内皮细胞表达妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的影响。方法:原代培养大鼠主动脉内皮细胞,选择生长良好的第3-4代细胞用于实验。实验分组:(1)空白对照组:不加干预措施原培养液继续培养;(2)阿托伐他汀浓度组:加入浓度分别为0.1、1、10μmol/L的阿托伐他汀作用24 h;(3)阿托伐他汀时间组:加入浓度为10μmol/L的阿托伐他汀分别作用6、12、24 h;(4)阿托伐他汀干预组:加入TNF-α(60μg/L)或者IL-1β(20μg/L)作用1 h后,再加入不同浓度的阿托伐他汀(0.1、1、10μmol/L)进行培养,分别于作用6、12、24 h终止实验。MTT法观察药物对细胞增殖的影响,RT-PCR技术测定细胞中PAPP-A mRNA的表达,ELISA方法检测上清液中PAPP-A蛋白水平。结果:(1)外源性加入阿托伐他汀及TNF-α或者IL-1β后,分别作用3、6、12、24、48 h,同对照组相比,细胞增殖能力无明显变化(P<0.05),说明干预药物本身对细胞没有毒性作用。(2)单独加入阿托伐他汀,细胞PAPP-A表达水平与空白对照组比较没有明显差异(P<0.05)。(3)炎症因子作用一段时间后再加入阿托伐他汀,PAPP-A mRNA和蛋白表达水平随着阿托伐他汀浓度和作用时间的增加而逐渐降低,有一定的浓度-时间依赖关系,与TNF-α组和IL-1β组比较明显下降(P<0.05)。结论:阿托伐他汀本身对细胞表达PAPP-A没有影响,但在一定程度上抑制TNF-α和IL-1β诱导的内皮细胞PAPP-A的表达,并有浓度-时间依赖关系。

脂联素对氧应激所致心肌损伤的影响

目的:通过原代培养SD大鼠的乳鼠心肌细胞建立过氧化氢(H2O2)心肌细胞氧应激损伤模型,观察脂联素(adiponectin)对氧应激所致心肌细胞损伤的影响。方法:采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,α-肌动蛋白免疫荧光法进行细胞鉴定。选用培养至3-4d的细胞,用H2O2建立细胞损伤模型,细胞损伤前用脂联素和阿糖胞苷(Ara-A)进行预处理。观察心肌细胞形态的变化,测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放、丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,通过琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术来检测心肌细胞的凋亡。结果:脂联素预处理可以明显降低H2O2损伤后心肌细胞LDH的释放(P<0.05)和MDA的含量(P<0.05),DNA ladder条带减弱,心肌细胞凋亡率也下降(P<0.05),而心肌细胞SOD活性较H2O2损伤组增高(P<0.05)。Ara-A(终浓度为1mmol/L)能够部分阻断脂联素预处理后对心肌细胞损伤的影响。结论:H2O2可以诱导心肌细胞的损伤及凋亡,脂联素可以通过单磷酸腺甘(AMP)激活蛋白激酶(AMPK)通道发挥保护作用。

阿托伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的观察阿托伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响。方法原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞中先加入50μg/L的肿瘤坏死因子α,1h后加入不同浓度(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L和1×10-5mmol/L)的阿托伐他汀,继续孵育24h后,收集细胞,采用逆转录聚合酶链反应检测培养的平滑肌细胞中内皮脂肪酶mRNA的表达情况。另外,取阿托伐他汀1×10-5mmol/L浓度,分别在6、12和24h用同样的方法检测培养细胞中内皮脂肪酶mRNA表达情况。结果随阿托伐他汀浓度的增加,肿瘤坏死因子α诱导的平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA表达水平呈下降趋势,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),不同浓度组之间比较亦有统计学意义(P<0.05);在1×10-5mmol/L阿托伐他汀作用下,随着作用时间的延长平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA表达水平亦呈下降趋势,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),不同时间组之间比较亦有统计学意义(P<0.05)。结论随着阿托伐他汀浓度的增加与作用时间的延长,肿瘤坏死因子α诱导的平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA的表达均呈下降趋势。

肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β对内皮细胞妊娠相关血浆蛋白A表达的影响

目的观察肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β对内皮细胞妊娠相关血浆蛋白A表达的影响并探讨其机制。方法原代培养大鼠主动脉内皮细胞,选择生长良好的第3～4代细胞用于实验。实验分组:①空白对照组;②10、20、40、60及100μg/L肿瘤坏死因子α培养细胞24h组;③1、5、10、20及50μg/L白细胞介素1β培养细胞24h组;④60μg/L肿瘤坏死因子α培养细胞2、4、8、16、24及48h组;⑤20μg/L白细胞介素1β培养细胞2、4、8、16、24及48h组;⑥核因子κB抑制剂BAY11-7082干预组:预先用核因子κB抑制剂BAY11-7082(20μmol/L)与内皮细胞共同孵育60min后,再加入60μg/L肿瘤坏死因子α或20μg/L白细胞介素1β作用48h。实验结束后收集细胞及培养上清液,用乳酸脱氢酶试剂盒检测各组培养上清液中乳酸脱氢酶活性,用逆转录聚合酶链反应测定细胞中妊娠相关血浆蛋白AmRNA的表达,用酶联免疫吸附法检测上清液中妊娠相关血浆蛋白A蛋白水平。结果不同浓度肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β作用24h后,大鼠内皮细胞妊娠相关血浆蛋白AmRNA及上清液中妊娠相关血浆蛋白A蛋白表达水平随肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β浓度的增加而升高(P<0.05);60μg/L肿瘤坏死因子α和20μg/L白细胞介素1β作用于大鼠内皮细胞不同时间,妊娠相关血浆蛋白A表达水平显著高于空白对照组(P<0.05),且随刺激时间的延长,妊娠相关血浆蛋白A的表达逐渐升高;核因子κB抑制剂BAY11-7082作用后,妊娠相关血浆蛋白A表达水平明显降低(P<0.05)。结论肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β上调内皮细胞妊娠相关血浆蛋白A的表达,而核转录因子的活化是其对内皮细胞妊娠相关血浆蛋白A表达上调的主要机制。

胰高血糖素样肽1对高糖所致乳鼠心室肌细胞氧化应激的影响及机制

目的观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)对高糖所致乳鼠心室肌细胞氧化应激的影响,并探讨PI3K-Akt通路在其中所起的作用。方法将酶消化法经α-肌动蛋白免疫荧光法鉴定的原代培养72～96 h的心室肌细胞分为5组:正常组、高糖组、高糖+GLP-1组(HG组)、高糖+GLP-1+LY294002组(HGL组)和高渗对照组。采用PCR凝胶电泳检测NADPH P47phox亚基mR-NA的变化,采用荧光显微镜及流式细胞术检测心室肌细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,采用流式细胞术检测心室肌细胞的凋亡率。结果 NADPHP47phox亚基mRNA PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果分析发现,各组内参基因条带的亮度基本一致;NADPHP47phox亚基高糖组条带比正常组亮,HG组条带较高糖组暗,HGL组条带较HG组亮度有所增加,高渗对照组条带亮度与正常组相比无明显差异。荧光显微镜下见ROS阳性细胞内呈绿色荧光;正常组与高渗对照组几乎无绿色荧光的细胞;高糖组可见明显的绿色荧光细胞;HG组可见绿色荧光细胞,但细胞数较高糖组减少,且荧光的强度较高糖组下降;HGL组细胞的荧光强度较HG组增强,但较高糖组下降。流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率发现,正常组与高渗对照组细胞几乎无凋亡细胞,大部分细胞位于B3区;高糖组细胞凋亡率(11.2%±1.68%)与正常组相比差异有统计学意义;HG组细胞凋亡率(6.27%±1.00%)与高糖组相比显著下降;HGL组细胞凋亡率与HG组相比有所升高(P<0.05)。结论胰高血糖素样肽1可以逆转高糖所致的心室肌细胞氧化应激损伤及凋亡,对心室肌细胞起保护作用;PI3K-Akt通路抑制剂LY294002可以阻断胰高血糖素样肽1对心室肌的保护作用。

LOX-1特异性小发夹RNA表达载体的构建及其效应

氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）在动脉粥样硬化形成和发展过程中起着关键的作用，而血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）是OX—LDL在血管内皮细胞上的主要受体，它在介导ox—LDL对血管内皮细胞的损伤、参与动脉粥样硬化的形成和发展过程中发挥了重要作用。

老年冠心病患者血浆OXLDL、VitC、VitE水平的检测及相关性研究

目的 探讨OXLDL及抗氧化VitC、VitE在老年冠心病患者发病中的作用。方法 对 2 0 0例体检者体内OXLDL、VitC、VitE水平进行了检测 ,并对其相关性进行了分析。OXLDL的测定采用酶联免疫吸附法 ,VitC、VitE的检测采用化学比色法。结果 ①老年健康者组体内OXLDL水平明显高于老年前期健康者组 [(4 0 4± 15 8) μg/dl与 (32 8± 13 6 ) μg/dl,P<0 0 5 ];老年健康者组体内VitC、VitE水平 [(38 2± 15 7) μg/ml,(17 1± 7 4 ) μg/ml]明显低于老年前期健康者组 [(5 2 0±18 5 ) μg/ml,(2 2 5± 6 6 ) μg/ml,P <0 0 5 ]。②老年冠心病组 ,约 73 2 %患者体内OXLDL水平 >5 0 μg/dl,高于老年前期冠心病患组 ,6 0 5 % (P <0 0 5 )。③老年健康组血浆VitC与OXLDL水平呈负相关 (r =- 0 372 ,P <0 0 5 ) ;血浆VitE与OXLDL水平呈负相关 (r=- 0 4 13,P <0 0 5 ) ;老年性冠心病组血浆OXLDL与VitC、VitE水平呈负相关 (r =- 0 .5 6 1,P <0 .0 5 ;r=- 0 .6 11,P <0 .0 5 )。结论 老年健康者及老年冠心病患者体内均存在较高的OXLDL水平及较低的抗氧化VitC、VitE水平 ;并且体内VitC、VitE与OXLDL水平呈现负相关 ,结果提示OXLDL很可能在老年冠心病患者的发病中起着重要作用 ,有可能是 5 0岁以后冠心病发?

血浆脑钠素水平与慢性心力衰竭患者心脏收缩功能的关系

目的 :探讨血浆脑钠素水平与慢性心力衰竭患者心脏收缩功能的关系。方法 :应用放射免疫法对 6 2例慢性心力衰竭患者及 18例健康对照者血浆脑钠素水平进行检测 ,并与其超声心动图心脏收缩功能的检测指标的相关性进行分析。结果 :慢性心力衰竭患者血浆脑钠素水平较健康对照组明显增高 (P<0 .0 5 ) ,在慢性心力衰竭观察组 ,心功能 NYHA分级 级、 级患者血浆脑钠素水平明显高于心功能 级、 级组 (P<0 .0 5 )。血浆脑钠素水平与左心室舒张末期内径及左心室射血分数相关 (P<0 .0 5 )。结论 :慢性心功能不全患者进行血浆脑钠素水平检测具有重要的意义 ,尤其是对一些行心脏超声心动图检查受条件限制的患者。