医院耐甲氧西林葡萄球菌的耐药性分析

目的了解我院耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的分离情况以及其连续十年的耐药性变化，为临床治疗葡萄球菌感染提供依据。方法药物敏感试验采用K—B法，用WHONET 5．4软件对临床葡萄球菌分离情况和药物敏感试验结果进行统计分析。结果我院MRS的分离率逐年增高，主要分布在病房，尤其是ICU（19．3％）、呼吸内科（14．1％）以及外科（32．6％）。MRS对庆大霉素、环丙沙星耐药率均在70％～80％，对红霉素敏感率仅在5％～30％之间，对克林霉素耐药率也在60％以上，对利福平敏感率在70％以上，没有发现耐万古霉素的葡萄球菌。840株葡萄球菌中，β-内酰胺酶阳性的有587株，占69．9％。结论合理使用抗菌药物，采取有效措施防止MRS导致的医院感染传播和流行。

210株肠道致病菌的分类及耐药性分析

目的 :探讨本地区肠道致病菌的分类及主要致病菌的耐药性 ,给临床治疗腹泻疾病提供指导。方法 :药敏试验采用K B法 ,用WHONET4软件进行数据分析。结果 :2 10株肠道致病菌中 ,志贺菌属占70 % ,沙门菌属占 3% ,致病性大肠埃希菌占 4 8% ,副溶血弧菌占 3 8% ,阴沟肠杆菌占 3 3% ,鼠伤寒沙门菌占 2 4 % ,霍乱弧菌占 1 9% ,其他占 10 8%等 ;在志贺菌属中 ,福氏占 87% ,宋内占 13%。福氏和宋内志贺菌对三代头孢和IMP较敏感 ,对复方新诺明耐药率较高。结论 :福氏志贺菌是肠道的主要致病菌 ;临床怀疑菌痢时 ,应首选三代头孢、IMP。

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药性监测分析

目的了解医院1998年1月至2006年12月期间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,监测并分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药特性,为临床合理使用抗生素提供指导。方法对分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感试验,用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONET5.4软件进行数据分析。结果947株大肠埃希菌中,产ESBLs的有311株,占32.8%;293株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs的有69株,占23.5%。产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05),产ESBLs菌株呈现多重耐药。结论医院产ESBLs菌的阳性率较高,应加强对产ESBLs菌株的耐药性监测,合理使用抗菌药物,防止ESBLs菌株的增长、扩散与流行。

志贺菌产ESBLs酶的检测及其耐药性分析

目的了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)志贺菌的检出率以及耐药情况,为临床治疗菌痢提供试验依据。方法E-test试验进行ESBLs志贺菌的检测,改良三维试验检测AmpC酶,K-B纸片扩散法进行药敏试验,用WHONET5.4软件进行数据分析。结果275株志贺菌中,产ESBLs志贺菌12株,检出率为4.4%,未检测出产AmpC酶菌株。产ESBLs组对第1代、第2代、第3代头孢菌素和氨曲南耐约性均明显高于非产ESBLs组,氨苄西林、氯霉素、四环素、复方新诺明耐药率在两组均有较高水平,对亚胺培南、头孢西丁、环丙沙星、庆大霉素较敏感。结论本地区ESBLs志贺菌检出率虽然较低,但已经有院内感染向社区感染转化的趋势,应引起重视,合理使用抗菌药物至关重要。

整合子在产ESBLs志贺菌中的检测

目的:探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)志贺菌多重耐药与整合子的关系,研究其耐药机制。方法:圆盘扩散方法检测抗菌药物敏感性,改良三维试验对可疑产ESBLs志贺菌进行检测,多重PCR检测、、类整合子,并对整合子进行DNA测序以确定携带的耐药基因盒。结果:在10株产ESBLs志贺菌中全部检出类整合子,其可变区含有dfrA17-aadA5基因盒。结论:本地区产ESBLs志贺菌全部含有类整合子,分别编码磺胺类和氨基糖苷类多重耐药性。

82株淋病奈瑟菌的耐药性分析

目的了解本地区淋病奈瑟菌的耐药性,为临床治疗提供实验依据。方法细菌鉴定采用API鉴定条,药敏试验采用K-B法,并进行统计分析。结果82例淋病奈瑟菌中,产β-内酰胺酶菌株25株,阳性率为30.5%;淋病奈瑟菌对大观霉素、头孢曲松较敏感,对青霉素、环丙沙星有较高的耐药性。结论青霉素、四环素以及氟喹诺酮类药物已不宜作为本地区治疗淋病的常规药物;大观霉素、头孢曲松可作为治疗淋病的首选药物,同时应加强淋病奈瑟菌的耐药性监测。

产超广谱β-内酰胺酶细菌及其多重耐药性

随着三代头孢菌素、免疫抑制剂和介入治疗在临床上的广泛应用,医院感染呈上升趋势.在抗菌药物的选择压力下,细菌耐药性逐渐增强,甚至出现了多重耐药细菌或泛耐药细菌,给临床治疗造成很多困难,严重威胁人们的健康.在美国,每年发生医院感染达200万例,6～9万人因医院感染死亡,医疗花费高达数十亿美元.

整合子介导产生超广谱β-内酰胺酶志贺菌的多重耐药研究

目的探讨产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL)志贺菌的耐药特性及其耐药机制。方法采用K-B法药敏试验筛选可疑产ESBL志贺菌株;通过改良三维试验、E-test试验及相对水解率测定对可疑产ESBL志贺菌进行鉴定;采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组和CTX-M-9组β-内酰胺酶通用引物进行PCR检测,并对TEM和CTX-M-9组全编码基因引物等PCR扩增产物进行DNA序列分析;对产ESBL志贺菌进行结合传递试验,供体菌和接合子用稀释法进行MIC测定。对ESBL菌株进行Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子的多重PCR检测,Ⅰ类整合子可变区PCR扩增产物进行DNA测序,确定耐药基因盒的种类和数量。结果275株志贺菌中有12株为产ESBL志贺菌,其基因型为CTX-M-14和CTX-M-1组;产ESBL志贺菌结合传递试验全部阳性,其结合子只对β-内酰胺类抗生素耐药。12株ESBL志贺菌只含Ⅰ类整合子,整合子可变区含有dfrA17-aadA5耐药基因盒。结论济南地区志贺菌对β-内酰胺类抗生素的交叉耐药由质粒介导,对磺胺类和氨基糖苷类多重耐药由整合子介导。

整合子介导产超广谱酶β-内酰胺酶细菌多重耐药研究

随着抗菌药物的广泛使用，特别是广谱抗菌药物在临床的应用，细菌的耐药性越来越强，多重耐药菌株不断增加，这意味着掌握目前细菌的耐药现状和了解细菌的耐药机制。合理使用现有的抗菌药物是非常重要的。整合子（integron）被认为是介导耐药基因在质粒之间或质粒与染色体之间转移及集聚重排的重要工具，

慢性肾衰竭患者单核细胞增生性李斯特菌血流感染1例

单核细胞增生性李斯特菌(LM)是细胞内寄生的革兰阳性杆菌,属于李斯特菌属,也是李斯特菌属中唯一对人致病的细菌,由其感染导致的疾病为李斯特菌病。LM是一种食源性致病菌,为人畜共患病的病原菌,通常引起败血症、脑膜炎、脑炎及自发性流产等,临床病死率为20%~70%[1]。近年来,LM不断在脑膜炎患者、肿瘤患者、新生儿及孕妇中被检出,但在慢性肾衰竭患者中的检出情况国内未见报道。本院从1例慢性肾衰竭患者的血液标本中分离出LM,现将此病例报道如下。

济南地区产ESBL福氏志贺菌耐药性及耐药基因型分析

目的了解产ESBL福氏志贺菌的耐药特征及传播方式,确定产ESBL菌株流行基因型。方法用纸片扩散法对产ESBL菌株初步筛选,PCR检测编码ESBL的基因,用接合试验确认产ESBL菌株耐药性的传递方式。结果 53株福氏志贺菌中16株(30.2%)产ESBL。药敏结果显示,16株产ESBL福氏志贺菌对氨苄西林、头孢噻肟、四环素、氯霉素、磺胺甲噁唑和甲氧苄啶完全耐药,对头孢西丁、亚胺培南和庆大霉素完全敏感,其中75.0%(12/16)的菌株对头孢他啶、头孢吡肟和氨曲南耐药,37.5%(6/16)对环丙沙星耐药;所有产ESBL株接合试验阳性;16株产ESBL志贺菌扩增出CTX-M、TEM和OXA基因,测序结果分别为blaCTX-M-15(12/16)和blaCTX-M-14(4/16)、blaTEM-1(11/16)、blaOXA-30(16/16)。结论济南地区福氏志贺菌存在严重多重耐药现象,流行的ESBL基因型为CTX-M-14和CTX-M-15。

左氧氟沙星联合头孢哌酮/舒巴坦对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌防耐药突变浓度的影响

目的探讨左氧氟沙星(levofloxacin,LVX)、头孢哌酮/舒巴坦(cefoperazone/sulbactam,CFS)单用及联合使用对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)防耐药突变浓度(mutant prevention concentration,MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定抗菌药物对鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606和60株临床分离CRAB的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数。用肉汤富集浓度为1013 CFU/L CRAB,采用琼脂平板稀释法测定LVX和CFS单用及联合使用鲍曼不动杆菌对标准菌株ATCC19606和60株临床分离CRAB的MPC,并计算相应的选择指数(SI)。结果 LVX联合CFS后,主要表现为协同和相加作用,无拮抗作用。对鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606:LVX和CFS联用前后,MPC分别由8.0 mg/L、16.0 mg/L降为1.0 mg/L、2.0 mg/L;SI均下降了7/8,且均有统计学意义。对60株临床分离菌株:LVX和CFS联用前后,MPC分别由64~256 mg/L、128~256 mg/L降为8~64 mg/L、64~128 mg/L;SI均明显下降。结论 LVX与CFS联用后,可降低其单用对CRAB的MPC,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌株的产生。

致泪囊炎多杀巴斯德菌的鉴定及临床分析

近年来，随着养宠物的人增多，很多寄生于宠物身上的细菌也不可避免的感染到人类，导致人类致病，多杀巴斯德菌就是其中之一。多杀巴斯德菌是一种小的革兰阴性球杆菌，常寄生于脊柱动物的上呼吸道和消化道的黏膜，尤其是猫或狗。人感染此菌大多因猫狗咬伤或抓伤而致病，也可通过密切接触或吸人被细菌污染的气溶胶而被感染。2012年9月，我们从一泪囊炎患者的眼部分泌物中分离出1株多杀巴斯德菌。采用生化试验和分子生物学方法对此菌株进行了重新鉴定并结合临床情况进行了分析，旨在增强人们对此菌的认识，警惕多杀巴斯德菌感染的发生。

志贺菌β-内酰胺酶基因型分布

细菌性痢疾由志贺菌引起，其发病率居我国传染病的第二位，严重威胁人类的健康。细菌性痢疾的高发病率在全球属于一个严重的公共卫生问题，主要集中在卫生条件较差的发展中国家和贫穷地区，据报道全球每年发病超过1．4亿例，导致大约60万例患者死亡，其中60％的死亡人数集中在5岁以下的儿童。近年来，由于抗菌药物的不合理使用，志贺菌耐药性逐渐增强，

一株携带blaCTX-M-15不发酵乳糖致病性大肠埃希菌026：K60的检测及临床分析

在发展中国家，致病性大肠埃希菌是引起婴幼儿细菌性腹泻的主要病原菌。2010年10月笔者从济南市第四人民医院一腹泻患儿大便中分离到一株携带blaCTX-M-15舶致病性大肠埃希菌026：K60，且此菌株不发酵乳糖，比较罕见，现报告如下。

质粒介导的志贺菌产超广谱β内酰胺酶及其耐药基因型

目的探讨产生超广谱β内酰胺酶（ESBLs）志贺菌的特性及与耐药质粒的关系。方法用K-B法做药敏试验并筛选可疑产ESBLs志贺菌株；ESBLs表型确证试验检测可疑产ESBLs志贺菌；采用TEM、SHV、CTX—M-1组、CTX—M-2组、CTX—M-9组B内酰胺酶通用引物进行PCR检测，TEM、CTX—M-9组全编码基因引物进行PCR测定，对扩增产物进行DNA序列分析；对产ESBLs志贺菌进行接合传递试验，供体菌和接合子用稀释法进行MIC测定。结果在275株志贺菌中有12株为产ESBLs志贺菌，其中8株志贺菌基因型为CTX—M-14型，4株为CTX—M-3型；产ESBLs志贺菌接合传递试验全部阳性，其接合子只对B内酰胺类抗生素耐药。结论本地区志贺菌对B内酰胺类抗生素的严重交叉耐药是由ESBLs所致，产ESBLs志贺菌可通过质粒传递耐药性。

福氏志贺菌CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性

目的产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)福氏志贺菌的耐药性及其基因型。方法 K-B法检测福氏志贺菌对抗菌药物的敏感性,改良三维试验检测菌株是否产生ESBLs,ESBLs的基因型通过PCR扩增、DNA测序的方法进行。结果 148株福氏志贺菌检测出6株产ESBLs,其基因型为CTX-M-3和CTX-M-14;产ESBLs福氏志贺菌对氨苄西林、头孢噻肟、复方新诺明、四环素均耐药,对头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星敏感。结论应加强对福氏志贺菌的耐药性监测,合理使用抗生素,防止产ESBLs福氏志贺菌的流行和传播。

整合子及其耐药基因盒在临床分离多重耐药志贺菌中的分布

目的分析整合子类型、耐药基因盒在志贺菌中的分布及其与耐药性之间的关系。方法采用最低抑菌浓度（MⅠC）测定志贺菌药物敏感性，PCR扩增Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类整合子及其耐药基因盒，限制性内切酶及DNA测序确定各基因序列。结果在分离的62株志贺菌中，57株存在多重耐药现象，占91．9％。在多重耐药株中，Ⅰ类、Ⅱ类整合子基因阳性株分别为52和55株，分别占91．2％和96．5％（其中仅含Ⅰ类整合子2株，仅含Ⅱ类5株，Ⅰ类、Ⅱ类整合子均含的50株）。未检测到Ⅲ类整合子基因。典型Ⅰ类整合子8株，耐药基因盒为dfrV和dfrA17-aadA5；非典型Ⅰ类整合子44株，耐药基因盒均为blaOXA-30-aadA1。6株福氏志贺菌中存在典型和非典型Ⅰ类整合子共存现象。Ⅱ类整合子耐药基因盒均为dfrA1-satl—aadA1。结论本研究分离的志贺菌存在严重多重耐药，多重耐药株中普遍携带非典型Ⅰ类整合子和Ⅱ类整合子的耐药基因盒，部分菌株存在典型和非典型Ⅰ类整合子共存现象。

REP、RAPD和PFGE方法在志贺菌分子分型中的应用评价

目的探索一种简便、准确、快速的分子分型方法用于志贺菌传染源的追溯和调查。方法采用细菌基因组重复序列(REP)、随机扩增多态性分析(RAPD)、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分别对62株志贺菌进行分子分型,根据分型结果比较3种方法的优点与不足。结果 REP仅分出A、B 2个型,RAPD可分出A、B、C、D、E、F 6个型,53株福氏志贺菌共分5个PFGE带型,9株宋内志贺菌为1个型,包括3个亚型。结论 REP用于相似度较高的菌株分辨效果较差,不适用于区域内菌株的分型;PFGE分型准确度高,但操作繁琐、时间较长;RAPD分型虽与PFGE分型有所差异,但分辨效果较好,且操作简便、价格低廉。RAPD可用于细菌性痢疾暴发事件的分子流行病学调查。