实验动物兔角膜Orbscan-Ⅱ检测

目的了解兔眼角膜的解剖学特征,为眼的动物实验提供参考数据。方法对46只新西兰白兔的92只眼角膜行Orbscan-Ⅱ检测,并分析各项检查参数。结果兔眼的平均角膜直径为(11.72±0.65)mm;平均角膜中央厚度为(391.91±21.78)μm,角膜最薄点厚度平均为(371.57±22.27)μm;兔眼的平均前房深度为(2.41±0.29)mm;兔眼角膜3mm光学区的平均屈光力为(46.53±2.02)D,5mm光学区的平均屈光力为(46.16±1.88)D;兔眼角膜前后表面高度图按形状可分为中央岛、不完全桥、规则桥、不规则桥及未分类型;兔眼Kappa角为(6.59±3.26)°。结论兔眼的上述测量参数多与人眼接近,但角膜厚度比人眼薄,角膜屈光力大于人眼,可作为眼表疾病和部分角膜屈光手术的实验动物。

TGF—β2反义寡核苷酸抑制兔角膜瘢痕组织增生的研究

目的探讨转化生长因子β2反义寡核苷酸（TGF-β2艮ASON）在兔角膜创伤愈合过程中对瘢痕组织形成的作用。方法实验研究。新西兰大白兔192只，以随机数字表法，随机分为4组（A组、B组、C组、D组），每组实验动物48只。4组动物右眼均制备角膜穿孔伤模型。A组术后右眼滴TGF—β2ASON溶液（TGF—β2ASON组）；B组术后右眼滴地塞米松滴眼液（地塞米松组）；C组术后右眼滴去离子水（去离子水组），D组术后右眼不做任何处理（单纯手术组）。4组动物分别于术后4、7、14、28d取角膜组织，应用HE染色、免疫组织化学和荧光定量PCR等检测方法进行观察。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Bonferroni检验。结果HE染色：术后同一时间点A组与B组阳性成纤维细胞数均比C组和D组明显减少，差异具有统计学意义（F=510．79，178．12，79．14，P〈0．05），但A组与B组、C组与D组间对比差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组织化学观察：（1）α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）：A组的01．SMA染色阳性的成纤维细胞于术后4d开始增生（9．44±0．47个／高倍镜视野），7d达高峰（12．50±0．81个／高倍镜视野），14d回到基线水平（0．85±0．43个／高倍镜视野），同一时间点与B组（9．49±0．95，12．42±0．70，0．86±0．79个／高倍镜视野）相比差异无统计学意义（P〉0．05），与C组（20．14±0．78，18．19±1．28，4．87±0．58个／高倍镜视野）和D组（20．21±0．92，18．25±1．39，5．00±2．217个／高倍镜视野）相比均明显减少，差异具有统计学意义（P〈0．05）；（2）纤维连接蛋白：同一时间点，A、B组纤维连接蛋白染色强度较C、D组明显减弱。逆转录实时荧光PCR：A、B组各时间点TGF-β2的mRNA相对表达量均较C、D组明显降低，差异均有统计学意义（F=554．25，610．68，636．80，89．51，P〈0．05），但A组与B组、C与D组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论TGF-β2 ASON可有效抑制TGF-β2的活性，减轻角膜损伤后结缔组织的增生而发挥抗瘢痕化的作用。在角膜损伤修复的早期，即术后7d内用TGF—β2 ASON进行干预调控是抑制术后瘢痕增生的关键。