Circ-ZNF609通过miR-224-5p调控食管癌细胞生物学特性的作用机制

目的探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组:NC(空白)组、si-NC(转染si-NC)组、si-Circ-ZNF609(转染si-Circ-ZNF609)组、miR-NC(转染miR-NC)组、miR-224-5p(转染miR-224-5p)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-NC(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-NC)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-224-5p(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-224-5p)组;采用实时荧光(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测Circ-ZNF609、miR-224-5p表达量;采用Western印迹检测细胞周期素蛋白(Cyclin)D1、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、β-catenin蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞活力、细胞周期和凋亡率;双荧光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。结果与正常食管内皮细胞NEC比较,食管癌细胞Eca-109、KYSE30、KYSE-450中Circ-ZNF609表达水平明显升高,miR-224-5p表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-Circ-ZNF609组细胞活力与S期细胞比例明显降低(P<0.05),G2/M期细胞明显比例升高(P<0.05),CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与miR-NC组比较,miR-224-5p组细胞活力与S期细胞比例明显降低,G2/M期细胞比例明显升高,CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白产生明显增加(P<0.05);Circ-ZNF609可靶向调控miR-224-5p;抑制miR-224-5p表达可逆转Circ-ZNF609沉默对食管癌细胞生物学行为的作用。结论干扰Circ-ZNF609能够通过促进miR-224-5p表达而调控食管癌细胞生物学特性,此影响可能涉及Wnt/β-catenin信号通路的失活。

核黄素磷酸钠联合复方苦参注射液治疗鼻咽癌放射性口腔黏膜炎临床疗效观察

目的:探讨核黄素磷酸钠联合复方苦参注射液治疗鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤的疗效。方法:选择2014年6月至2017年3月收治的鼻咽癌患者132例,随机分为3组,联合治疗组、核黄素组、复方苦参组,各44例。联合治疗组为观察组,单药组为对照组,各组均经调强放射治疗,且在放疗开始分别给予相应治疗,比较三组患者在放疗后第2周、第4周、第6周口腔黏膜损伤程度、口腔黏膜疼痛VAS评分、不良反应及总住院费用。结果:随着放疗时间的延长,各组患者黏膜损伤程度分级和疼痛VAS评分逐渐加重,但联合治疗组在放疗后2周、4周、6周的黏膜损伤程度和疼痛VAS评分均显著轻于核黄素治疗组和苦参治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05),但核黄素治疗组和苦参治疗组患者在放疗后2周、4周、6周黏膜损伤程度和疼痛VAS评分无统计学差异(P>0.05),三组患者治疗过程中均未出现严重药物相关不良反应,患者总住院费用无统计学差异(P>0.05)。结论:核黄素磷酸钠联合复方苦参注射液治疗鼻咽癌放射性口炎黏膜损伤疗效较佳,能延缓放射性口腔黏膜炎发生时间,减轻放射性黏膜损伤程度,可有效缓解疼痛,且临床应用安全。

抗辐射球菌pprI基因活体电转染对受照小鼠睾丸病理学作用的研究

观察抗辐射球菌pprI基因活体电转染小鼠受γ射线辐照后睾丸组织的形态学变化,探讨一种新的原核基因表达对哺乳动物生殖系统损伤的防治作用。将含有pprI基因的pCMV-HA-pprI质粒注入小鼠肌肉内,然后采用活体基因电转染技术将该基因导入细胞内,对照组小鼠和转基因组小鼠均采用60Coγ射线全身照射,吸收剂量为6 Gy,分别于辐照后第1、7、14、28和35天取下注射部位肌肉组织,提取组织总蛋白,进行PprI蛋白的Western blotting检测。同时取小鼠睾丸组织,石蜡包埋制片,苏木精-伊红染色,进行镜下病理学观察。PprI蛋白在辐照后第1天有较强的表达,说明pprI质粒成功转染至小鼠体内。对照组小鼠在照后第1天生精小管结构完整,各级生精细胞未见明显病理变化;第7天在部分生精小管观察到少量精原细胞坏死;第14天生精细胞变性坏死明显加重,生精小管萎缩变细,相互"远离";至第28天各级生精细胞及精子极度减少,生精小管内细胞分层结构基本消失,甚至空虚,仅残留支持细胞,间质疏松;第35天空虚的生精小管内开始出现新生精原细胞。而转基因组小鼠辐照后第1天生精细胞未见明显病理变化;第7天部分生精小管见少量精原细胞坏死,较单纯照射组轻;第14天生精细胞变性坏死加重,各级生精细胞数量减少;第28天局部生精小管内出现新生精原细胞,基底层结构基本显现;第35天转基因组局部生精小管内新生生精细胞增多,出现分层现象。研究结果表明,pprI基因活体电转染对小鼠睾丸γ辐射损伤具有显著的防治作用,睾丸辐射损伤修复明显提前。

抗辐射球菌pprI基因活体电转染救治小鼠γ射线损伤的实验研究

为研究抗辐射球菌pprI基因活体电转染对哺乳动物急性放射损伤的影响,探讨一种新的救治放射损伤的转基因技术。将自行构建的pCMV-HA-pprI质粒注入接受γ射线照射的小鼠肌肉内,采用活体基因电转导技术将该基因导入细胞内,观察照后第1、7、14、28和35天小鼠死亡率、血细胞计数以及骨髓细胞、脾脏和胸腺淋巴细胞凋亡的变化。结果显示,6Gyγ射线可引起小鼠急性致死性放射损伤,转基因组小鼠死亡率(1/10)明显低于单纯照射组小鼠死亡率(4/10)。与单纯照射组和空载体转染组比较,pprI基因转染组小鼠外周血白细胞总数及红细胞总数于照后第7天显著增高(p<0.05);血小板数于第7、14天显著增高(p<0.05);血淋巴细胞百分率于照后35天恢复正常;pprI基因转染组脾细胞凋亡率于第7、14、28天显著降低(p<0.05);胸腺细胞凋亡率于第1、7、14、35天显著降低(p<0.05);骨髓细胞凋亡率于第1、7、14和28天显著降低(p<0.05),并且胸腺细胞和骨髓细胞凋亡率均于照后28天恢复正常。结果表明,抗辐射菌pprI基因活体电转染对动物急性致死性放射损伤具有明显的防治作用。

细胞免疫功能指标与新型冠状病毒肺炎患者病情的相关性

目的分析细胞免疫功能指标与新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者病情的相关性。方法收集2020年1月22日至3月9日河南省人民医院收治的51例COVID-19患者的临床资料。将普通型患者纳入对照组(23例),将重型或危重型患者纳入观察组(28例)。比较两组年龄、性别、合并基础疾病和入院时外周血白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEU)、单核细胞计数(MONO)、总淋巴细胞计数(LYM)、C反应蛋白(CRP)、T淋巴细胞计数、NK细胞计数、B细胞计数、CD4^(+)T淋巴细胞计数、CD4^(+)T淋巴细胞比率、CD8^(+)T淋巴细胞计数、CD8^(+)T淋巴细胞比率、CD3^(+)T淋巴细胞比率、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值、CD19^(+)细胞比率、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)细胞比率。结果与对照组比较,观察组年龄较大,合并基础疾病占比、WBC、NEU、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值较高,CD8^(+)T淋巴细胞比率较低(P<0.05)。未合并基础疾病和较高的CD8^(+)T淋巴细胞比率为重症或危重症COVID-19发生的保护因素,而较高的CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值为重症或危重症COVID-19发生的危险因素(P<0.05)。结论合并基础疾病、CD8^(+)T淋巴细胞比率、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值是重症或危重症COVID-19发生的影响因素。

血型嵌合体一例血清学特点及基因学测序分析

目的:对一例疑似血型嵌合体进行血清学及基因学鉴定。方法:采用血清学标准方法鉴定ABO血型;PCR扩增ABO基因7个外显子及其侧翼序列,通过测序分析进行基因学定型;采用凝聚胺介质和Liss-coombs卡进行交叉配血试验。结果:血清学正定型表现为抗A凝集(强度为4+),抗B呈混合凝集(±)且抗B管底部有大量红细胞。反定型显示A、B、O型细胞均不凝集。家系调查显示其父为B型,母为A型,子为O型,正反定型均一致。测序结果显示ABO基因第6、7外显子存在3个等位基因A102、B101和O02,其中O02和B101来自于其父,A102来自于其母。配血试验表明AB型悬浮红细胞配血主、次侧均无溶血、无凝集;A、B、O型悬浮红细胞配血主侧无溶血、无凝集,次侧无溶血、有凝集。结论:患者是嵌合体血型。

临床常用指标在辅助诊断COVID-19中的价值

目的探讨临床常用指标在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)辅助诊断中的价值。方法选取COVID-19确诊患者53例,按病情严重程度分为普通型组(24例)和重型组(29例)。收集所有对象的临床资料(性别、年龄、基础疾病比例、就诊间隔时长),并检测血常规[白细胞(WBC)计数、淋巴细胞百分比(LYMPH%)、淋巴细胞绝对数(LYMPH#)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、中性粒细胞绝对数(NEUT#)]、C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)及淋巴细胞亚群[淋巴细胞总数、CD3^(+)细胞计数、CD3^(+)细胞百分比(CD3^(+)%)、CD4^(+)细胞计数、CD4^(+)细胞百分比(CD4^(+)%)、CD4^(+)/CD8^(+)比值]。采用非条件多因素Logistic多元回归分析评估重型COVID-19发生的危险因素。结果普通型组与重型组之间WBC计数、LYMPH%、NEUT%、NEUT#、LDH、CD4^(+)%、CD4^(+)/CD8^(+)比值差异均有统计学意义(P<0.05),LYMPH#、淋巴细胞总数、CRP、CD3^(+)%、CD3^(+)细胞计数及CD4^(+)细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05)。非条件多因素Logistic回归分析结果显示,基础疾病、就诊间隔时长、淋巴细胞总数是重型COVID-19的危险因素[风险比(HR)分别为116.47、1.24、9.83,95%可信区间(CI)分别为4.83~2805.89、1.04~1.48、1.91~466.20]。结论WBC计数、NEUT#、NEUT%、LYMPH%、LDH、CD4^(+)%、CD4^(+)/CD8^(+)比值在COVID-19的辅助诊断中有一定的价值。

过敏性哮喘小鼠树突状细胞负荷Der p2后改变及与T细胞增殖分化的关系研究

目的:探讨哮喘小鼠与正常小鼠骨髓源性树突状细胞(DC)负荷Der p2抗原后表达表面分子(CD11c、CD86)和细胞因子(IL-10、IL-12p70)的差异及其对Th1和Th2型细胞因子平衡的影响,进一步研究过敏性哮喘发生中DC的可能作用。方法:分别从哮喘组和对照组提取骨髓培养DC,第五天负荷Der p2,24小时后吹打收集细胞,观察DC形态,用流式细胞仪检测孵育后细胞表面CD11c、CD86表达。并留取负荷Der f2前后培养上清,ELISA法检测IL-10及IL-12p70含量。同时以DC:反应细胞比例为1:10混合培养,72 h后ELISA法检测混合培养上清中IL-4、IL-5、IFN-γ的水平。结果:1负荷Der p2后,哮喘组CD86、CD11c表达比对照组高,分别为(t=11,P<0.05)(t=4.9,P<0.05),差异有统计学意义;2在细胞因子分泌方面,Der p2负荷前,两组DC均能分泌IL-10与IL-12p70,IL-10水平哮喘组高(t=9.5,P<0.05),而IL-12p70水平对照组高(P<0.05);负荷Der p2后,对照组IL-10、IL-12p7分泌量比负荷前明显增加(P<0.05),哮喘组无明显差异(P>0.05);3在DC刺激同种T细胞因子分泌方面,负荷Der p2后哮喘组DC刺激T细胞分泌IL-4、IL-5分泌能力明显增强(P<0.05),而刺激INF-γ能力降低(P<0.05)。结论:DC在过敏性哮喘中起着重要作用,异常DC通过增加CD86、CD11c的表达和减少IL-10及IL-12的合成,致使T细胞向Th2细胞优势分化。

抗-M抗体引起的血型鉴定困难分析及配血影响

目的 探讨抗-M抗体干扰血型鉴定及其对配血的影响.方法 血型及抗体鉴定按照血型血清学试验操作标准操作.37 ℃氯化钠注射液洗涤4次后用试管法做正定型,洗涤后的红细胞加等量自身血清在4℃吸收≥4 h,离心后做反定型.确定抗体性质用2-Me破坏IgM型 抗体前后的血清标本进行抗体鉴定红细胞检测,并进一步用自制NN型反定型红细胞检测患者血清.配血选择与受血者ABO同型的MM型和NN型红细胞,依次采用盐水法,凝聚胺法,抗人球蛋白介质法进行配血试验.结果 NN型的反定型细胞正反定型一致,患者标本与抗-M不凝集,与抗-N则均凝集.患者与红细胞上存在M抗原的供血者进行常规交叉配血时,卡式法均有凝集,而当选择不含有M抗原的红细胞,配血均相合.结论 患者血清中存在的影响血型鉴定的抗-M抗体.

MiR-129-5p靶向抑制高迁移率族蛋白B1表达增加甲状腺髓样细胞MZ-CRC-1放射敏感性的实验研究

目的探讨miR-129-5p靶向抑制高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对甲状腺髓样细胞MZ-CRC-1放射敏感性的影响机制。方法建立抗辐射细胞株MZ-CRC-1/R;克隆形成实验分析细胞存活分数;qRT-qPCR检测miR-129-5p在MZ-CRC-1和MZ-CRC-1/R细胞中的表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光酶报告基因实验验证miR-129-5p与高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)之间的靶向关系;Western blot检测HMGB1和p-AKt的蛋白表达。结果与MZ-CRC-1细胞相比,MZ-CRC-1/R细胞的细胞存活分数显著提高(t=3.038、4.330、4.885、4.568,P<0.05);细胞活力增加(t=3.637、7.734、11.896、14.522,P<0.05);与MZ-CRC-1细胞(1.00±0.06)相比,miR-129-5p在MZ-CRC-1/R细胞中的表达(0.26±0.03)显著降低(t=19.107,P<0.05);与miR-NC-inhibitor组细胞相比,miR-129-5p-inhibitor组细胞的细胞活力显著增加(t=5.156、6.005、9.649,P<0.05),细胞凋亡率降低(t=8.659,P<0.05)。与miR-NC组细胞相比,miR-129-5p mimic组细胞的细胞活力显著降低(t=3.118、5.034、6.005、7.488,P<0.05),细胞凋亡率升高(t=6.362,P<0.05);过表达miR-129-5p可抑制HMGB1及p-AKt信号通路的表达(t=9.325、10.614, P<0.05);与miR-129-5p inhibitor组细胞相比,miR-129-5p inhibitor+si-HMGB1组细胞的细胞凋亡率显著升高(t=6.700,P<0.05);与miR-129-5p mimic组细胞相比,miR-129-5p mimic + si-HMGB1组细胞的细胞凋亡率显著降低(t=7.073,P<0.05)。结论miR-129-5p可靶向抑制HMGB1增加甲状腺髓样细胞MZ-CRC-1的放射敏感性。

过敏性哮喘小鼠树突状细胞负荷Der p2抗原后表面标志物表达与细胞因子分泌水平的研究

目的探讨哮喘小鼠与正常小鼠骨髓源性树突状细胞负荷Der p2抗原后33D1、CD11c、CD86的表达及IL-10、IL-12p70分泌水平的差异,研究过敏性哮喘发病机制中树突状细胞的作用。方法分别从哮喘组和对照组小鼠提取骨髓培养树突状细胞,第7 d负荷Der p2抗原,24 h后观察树突状细胞形态,用流式细胞仪检测孵育后细胞表面33D1、CD11c、CD86的表达。并留取负荷Der p2前后培养上清液,ELISA法检测IL-10及IL-12p70含量。结果负荷Der p2抗原后,哮喘组CD86、CD11c表达较对照组显著升高[(54.02±5.32)%比(26.79±5.21)%,(67.51±5.99)%比(51.49±7.72)%,P<0.05];两组树突状细胞均表达小鼠树突状细胞特异性标志33D1,但表达水平均不高。在Der p2负荷前两组突状细胞均能分泌IL-10和IL-12p70,哮喘组IL-10水平高于对照组(P<0.05),IL-12p70水平低于对照组(P<0.05);在负荷Der p2后,对照组IL-10、IL-12p70分泌量较负荷前明显增加(P<0.05),而哮喘组负荷前后无明显变化。结论树突状细胞在过敏性哮喘中起着重要作用,异常树突状细胞通过增加CD86、CD11c的表达和减少IL-10及IL-12的合成,致使T细胞向Th2细胞优势分化。

LncRNA LINC00261下调miR-620表达调控鼻咽癌放射敏感性实验研究

目的探讨LINC00261对鼻咽癌放射敏感性影响及其作用机制。方法用qRT-PCR检测放射敏感、放射抵抗鼻咽癌组织中miR-620和LINC00261的相对表达水平。采用0、2、4、6、8 Gy 60Coγ射线照射鼻咽癌细胞系6-10B、HNE-3细胞后,qRT-PCR法检测miR-620和LINC00261的相对表达水平。LINC00261过表达或沉默LINC00261表达、抑制miR-620表达后,使用X线照射4 Gy。克隆形成实验检测鼻咽癌细胞放射敏感性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达水平;荧光素酶报告实验检测LINC00261和miR-620的靶向关系;裸鼠移植瘤实验检测细胞成瘤变化。结果相较于放射敏感组织,放射抵抗组织中LINC00261下调表达,miR-620上调表达(P<0.05)。6-10B、HNE-3细胞经不同剂量照射后LINC00261下调表达,miR-620上调表达(P<0.05)。过表达LINC00261和干扰miR-620表达后,6-10B、HNE-3细胞中Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达水平升高,细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞存活分数增大(P<0.05)。LINC00261靶向调控miR-620;过表达miR-620表达可减弱LINC00261过表达对鼻咽癌细胞的放射增敏及促凋亡作用。LINC00261过表达可降低裸鼠鼻咽癌成瘤重量(P<0.05)。结论过表达LINC00261可提高鼻咽癌细胞的放射敏感性,其可能通过靶向调控miR-620发挥作用。

lncRNA UNC5B-AS1在食管癌组织中的表达对EC9706细胞生物学行为和放射敏感性的影响

目的观察食管癌组织lncRNA非协调性分子5同源蛋白B-反义RNA 1(uncoordinated-5-homolog B-antisense RNA 1,UNC5B-AS1)表达变化,探讨其对食管癌EC9706细胞生物学行为和放射敏感性的影响及可能机制。方法食管癌患者35例,取手术切除癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA UNC5B-AS1和miR-218相对表达量。取对数生长期EC9706细胞,采用双荧光素酶报告基因实验验证UNC5B-AS1与miR-218的关系。取对数生长期EC9706细胞分为转染组(转染siRNA-UNC5B-AS1)、阴性对照组(转染对照序列siRNA-NC),转染+抑制剂组(共转染siRNA-UNC5B-AS1与anti-miR-218),转染+抑制剂对照序列组(共转染siRNA-UNC5B-AS1与anti-miR-NC)。转染后,采用实时荧光定量PCR法检测转染组和阴性对照组UNC5B-AS1和miR-218相对表达量;4组采用CCK-8法检测细胞增殖,采用克隆形成实验检测细胞克隆形成数及放射增敏比,采用细胞划痕实验检测细胞迁移,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭。结果食管癌组织UNC5B-AS1相对表达量(3.68±0.23)高于癌旁组织(1.00±0.11)(t=62.189,P<0.001),miR-218相对表达量(0.15±0.03)低于癌旁组织(0.98±0.10)(t=47.033,P<0.001)。转染miR-218 mimics和WT-UNC5B-AS1的细胞荧光素酶活性(0.14±0.01)低于共转染miR-NC和WT-UNC5B-AS1的细胞(0.98±0.05)(t=28.533,P<0.001),共转染miR-218 mimics和MUT-UNC5B-AS1的细胞荧光素酶活性(0.99±0.05)与共转染miR-NC和MUT-UNC5B-AS1的细胞(0.97±0.06)比较差异无统计学意义(t=0.444,P=0.680)。转染组UNC5B-AS1相对表达量(0.23±0.02)低于阴性对照组(1.00±0.00)(t=115.500,P<0.001),miR-218相对表达量(4.19±0.07)高于阴性对照组(1.00±0.00)(t=136.714,P<0.001)。转染组细胞增殖吸光度值(0.45±0.02)、细胞划痕愈合率[(25.59±0.82)%]均低于阴性对照组[1.17±0.08、(56.29±2.47)%](P<0.05),克隆形成数[(45.33±1.70)个]、侵袭细胞数[(75.67±2.49)个]均少于阴性对照组[(101.33±3.09)、(168.00±5.72)个](P<0.05);转染+抑制剂组细胞增殖吸光度值(1.00±0.05)、细胞划痕愈合率[(47.92±1.88)%]均高于转染+抑制剂对照序列组[0.45±0.02、(25.48±0.88)%],克隆形成数[(92.00±2.94)个]、侵袭细胞数[(150.00±5.10)个]多于转染+抑制剂对照序列组[(45.00±1.63)、(76.33±2.05)个](P<0.05);转染组与转染+抑制剂对照序列组细胞增殖吸光度值、细胞划痕愈合率、克隆形成数、侵袭细胞数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与阴性对照组比较,转染组细胞增敏比为1.665;与转染+抑制剂对照序列组比较,转染+抑制剂组细胞增敏比为0.830。结论食管癌组织中UNC5B-AS1表达上调,miR-218表达下调;下调UNC5B-AS1可负调控miR-218抑制EC9706细胞增殖、迁移、侵袭性及放射敏感性。

ABO基因c.2T>C突变致GTA翻译异常引起的A_xB表型一例及机制分析

目的:对1例ABO正反定型不一致患者的血标本进行鉴定,并探索其潜在的分子机制。方法:血清学标准方法鉴定ABO血型,并进行血浆总体A糖基转移酶(glucanotransferase,GTA)活性测定。对ABO基因7个外显子及其侧翼序列行PCR扩增、直接测序或克隆后测序分析。结果:本例血清学鉴定为A_xB亚型;血浆总体GTA活性明显下降(效价为±);ABO基因外显子1的第2位核苷酸存在T>C错义突变。结论:ABO基因c.2T>C突变导致翻译起始位点被跨膜结构域或茎区域中的Met替代,从而形成N端截短的GTA的表达,进而引起此例患者A_xB表型。

循环miR-143水平在宫颈癌患者同步放化疗后肿瘤残留的早期预测

目的探讨血清miR-143水平结合MRI在预测宫颈癌同步放化疗(CCRT)早期反应的价值。方法收集85例经病理证实的宫颈癌患者,在CCRT前均行常规MRI、腔内非相干运动扩散加权成像(IVIM-DWI)和动态增强MRI(DCE-MRI),并收集患者的活检组织和血清样品。应用微阵列芯片分析活检组织中miRNA差异性表达。采用qRT-PCR分析血清样品中miR-143水平。根据术后MRI表现,将患者分为非残留肿瘤组和残留肿瘤组。对两组患者术前临床因素、MRI参数和miR-143进行单因素和多因素分析,绘制受试者工作曲线(ROC)曲线,估计治疗后残留肿瘤发生的最佳阈值和预测性能。结果CCRT完成后1个月,无残留组52例,残留组33例。残留组肿瘤的国际妇产科联合会分期、表观扩散系数、D和V^(e)明显高于非残留组(P<0.05),K^(trans)明显低于非残留组(P<0.001)。miRNA阵列分析显示两组间有16个miRNAs表达差异(P<0.05),其中miR-143的升高在残留组患者中最为显著。与残留组相比,非残留组的血清miR-143表达显著下调(P=0.002)。与Siha细胞相比,SiHa-R细胞的miR-143表达明显上调(P<0.05)。多因素分析显示只有miR-143、D、K^(trans)和V^(e)是独立的预后因素。ROC曲线分析显示MRI-miR-143组合参数的曲线下面积最高(AUC=0.975),敏感性为84.8%,特异性为96.2%。结论治疗前MRI参数与血清miR-143的结合进一步提高了CCRT后残留肿瘤的预测性能,有助于宫颈癌的个性化治疗。

香砂六君子汤加减对胃溃疡患者Hp转阴及炎症反应的影响研究

研究香砂六君子汤加减对胃溃疡患者Hp转阴及炎症反应的影响价值。方法:应用医学实验随机数字表法,遴选筛查我院2020年5月-2021年5月98例胃溃疡患者,依照治疗环节所用措施方法差异,分为病患数相同的对照组和试验组两小组。分别予以对照组和试验组一般西医治疗药物治疗、西药联合香砂六君子汤加减治疗,就两组治疗后的Hp转阴疗效、用药不良反应及其炎症反应变化情况进行对比分析。结果:试验组和对照组在治疗后的Hp转阴疗效为97.96%(48/49)和71.43%(35/49)、用药不良反应发生情况为2.04%(1/49)和28.57%(14/49),统计学意义特征对比明显(P<0.05)。试验组IL-6(白细胞介素-6)、TNF-α(肿瘤坏死因子)结果水平上显著低于对照组,统计学意义特征对比明显(P<0.05)。结论:香砂六君子汤加减对胃溃疡患者Hp转阴疗效差异突出,并可显著降低患者的炎症反应,改善患者预后,可在后续患者的治疗中加以推广实施。

麻杏石甘汤加减对呼吸道感染后慢性咳嗽患者的治疗效果观察

研究对呼吸道感染后慢性咳嗽患者的中药汤剂治疗效果。方法:选择我院2020年1月-12月收治的80例呼吸道感染后慢性咳嗽患者患者,分为两组,采用区别治疗,对比疗效。结果:观察组患者总有效率97.5%,对照组患者总有效率90.0%,差异显著(P<0.05),观察组、对照组患者慢性咳嗽停止时间分别为(70.24±19.74)h、(92.47±21.65)h,差异显著(P<0.05)。观察组患者出现1例嗜睡,对照组患者出现2例便秘、2例嗜睡,1例恶心,不良反应率差异显著(P<0.05)。结论:对呼吸道感染后慢性咳嗽患者运用中药汤剂治疗方式效果良好,是对西药治疗方式的一种重要补充,综合运用效果良好。

安罗替尼对胶质瘤放疗的增敏作用及其机制

目的观察安罗替尼对胶质瘤的放疗增敏作用并探讨其作用机制。方法(1)培养胶质瘤细胞人脑胶质母细胞瘤系(U87MG),对照组,置于6MV-X射线照射,安罗替尼组,将安罗替尼加入U87MG联合6MV-X射线照射,细胞克隆法绘制生长曲线,比较两组的放疗敏感性,蛋白质印迹法(Western blot)法检测小窝蛋白(Caveolin-1)蛋白及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达。(2)建立U87MG动物模型,随机数字表法分为4组,对照组,不处理;单放组,6MV-X射线照射,安罗替尼组,安罗替尼灌胃,联合组,安罗替尼灌胃联合6MV-X射线照射,记录瘤重,计算抑瘤率,检测凋亡表达,Caveolin-1蛋白表达。采用t检验和方差分析。结果细胞实验,对照组的细胞存活分数(sF2)、终斜率的倒数(Do)、准阈剂量(Dq)值分别为0.64、1.83 Gy、1.34 Gy;安罗替尼组的sF2、Do、Dq值为0.47、1.25 Gy、0.92 Gy;增敏比(SER)值为1.47,差异有统计学意义(t=2.066,P<0.05)。Western blot检测安罗替尼组Caveolin-1蛋白水平,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平低于对照组。动物实验发现单放组、安罗替尼组及联合组小鼠肿瘤体积低于对照组,瘤重分别为(6391.89±114.06)、(3367.19±60.61)、(4763.02±71.65)、(2982.77±54.30)mg,差异有统计学意义(F=331.631,P<0.05)。流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,单放组、安罗替尼组及联合组比高于对照组细胞凋亡率,凋亡率分别为(8.92±0.53)%、(26.75±1.19)%、(24.43±0.79)%、(17.64±0.65)%,差异有统计学意义(t=6.873,P<0.05)。免疫组织化学染色法检测单放组、安罗替尼组及联合组小鼠肿瘤Caveolin-1表达率低于对照组。结论体内外实验发现安罗替尼对胶质瘤有放疗增敏作用,Caveolin-1表达下降调控MAPP磷酸化通路改变可能是其作用机制之一。

多发性骨髓瘤全凝集血型处理及输血实践

目的:对多发骨髓瘤全凝集病例进行血清学及分子生物学定型,并探讨其输血实践。方法:初检血型呈全凝集者,红细胞37℃生理盐水洗涤3遍,正定型检测仍有凝集时,56℃水浴箱热放散1 min,再次洗涤后做正定型;血浆用多人份O型洗涤红细胞4℃进行吸收4 h,离心取上清做反定型,结果不理想者复做一次;仍未能判读者取上清置37℃水浴30 min再次如上方式进行反定型检测。经上述处理结果仍然不理想时,进一步应用二硫苏糖醇(DTT)处理检测红细胞或患者红细胞。同时采用中和抑制试验测定患者唾液中和血型物质及PCR扩增1～7外显子测序佐证血型。结果:血型全部得以确认;唾液中和试验与基因定型结果与血清学结果一致;配血试验血红蛋白均有提升。结论:全凝集患者血型定型正确,输血效果良好。

新型冠状病毒肺炎转归的影响因素分析

目的分析影响新型冠状病毒肺炎(COVID-19)转归的因素,为临床提供切实可行的实验室指导。方法回顾性分析河南省人民医院2020年1月22日至2020年3月9日收治的53例确诊新型冠状病毒肺炎患者的临床资料,根据病情轻重分为普通组、重症组、危重症组。对三组患者从初发症状到就诊间隔时长、基础病、并发症等临床资料加以研究,并对初入院白细胞、C-反应蛋白(CRP)、淋巴细胞百分比、乳酸脱氢酶(LDH)以及治疗前后总T淋巴细胞绝对值等实验室数据加以分析。结果新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染者的年龄、初发症状至就诊间隔时长、基础病等均影响疾病的转归(P<0.05);COVID-19患者外周血白细胞总数正常或减少,危重症白细胞多正常或增高;普通型CRP多升高和LDH多正常,危重症型初期多为增高(P<0.05),淋巴细胞百分比多降低(P<0.05);确诊患者总T淋巴细胞绝对值降低,治疗好转后有所提升(P<0.05)。结论早发现、早隔离、早诊断、早治疗是改善COVID-19预后的最佳防治措施,白细胞、CRP、淋巴细胞百分比、LDH以及总T淋巴细胞绝对值等都与疾病转归存在相关性。