Th17细胞在肺纤维化小鼠中的动态变化及作用机制

目的:研究Th17细胞在博来霉素致肺纤维化小鼠中的动态变化及作用机制.方法:小鼠随机分为对照组、博来霉素组和全反式维甲酸组.博来霉素组和维甲酸组利用博来霉素建立小鼠肺纤维化模型,维甲酸组在造模第0天每只腹腔注射全反式维甲酸.评价小鼠肺组织病理形态变化;检测肺组织中羟脯氨酸含量和维甲酸相关孤儿受体(RORγt) mRNA的表达;应用流式细胞术分析脾中Th1、Th2、Th17细胞的动态变化.结果:博来霉素组和维甲酸组羟脯氨酸(HYP)含量逐渐升高,博来霉素组第7、14、28天高于对照组和维甲酸组,第28天时达最高;博来霉素组、维甲酸组在4个时间点与对照组比较,Th17、Th2细胞均明显增高,Th1细胞低于对照组,RORγt mRNA表达水平上调.其中维甲酸组Th17、Th2细胞及RORγt mRNA表达水平低于博来霉素组,Th1细胞高于博来霉素组.结论:Th17细胞可能参与特发性肺纤维化的发病机制,并通过调节Th1、Th2细胞分化来发挥作用.

耐顺铂肺癌A549细胞中自噬和Wnt/β-catenin通路的变化

目的:观察肺癌A549细胞产生顺铂耐药过程中自噬水平及β-catenin表达的变化。方法:逐渐增加顺铂浓度建立耐药细胞株A549/DDP。应用MTT实验检测细胞增殖率,单酰戊二胺(MDC)染色检测细胞自噬水平。实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法测定不同耐药水平A549细胞LC3Ⅱ、β-catenin的表达。结果:与对照组比较,不同浓度顺铂都能抑制不同耐药水平A549细胞的生长,各耐药组细胞耐药性越强,细胞存活率越高(P<0.05);随着耐药水平的提高,肺癌A549细胞的自噬水平逐渐增高,高水平耐药细胞株内自噬泡的数量、LC3Ⅱ、β-catenin的RNA和蛋白表达较低水平耐药细胞株明显增高(P均<0.05)。结论:肺癌A549顺铂耐药细胞系中β-catenin通路与自噬在其耐药性的形成发挥了重要的作用。

氨基胍对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

目的探讨氨基胍(AG)对博莱霉素(BLM)诱导SD大鼠肺纤维化中的干预作用。方法将116只SD大鼠随机分成5组:正常对照组、BLM组、AG组、激素组和AG+激素组。经气道给予BLM或生理盐水后,每天给不同组别相应的药物或生理盐水连续28 d。分别在第7,14,21,28天随机处死各组老鼠5只。处死前,取肺泡灌洗液用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的表达。用碱水解法测肺组织中羟脯氨酸的含量及用RTPCR检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1 mRNA的相对表达量。结果①与BLM组比较,AG组、激素组和AG+激素组支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的表达在第7,14天下降(P<0.05),肺组织羟脯氨酸含量减少(P<0.05)。②各治疗组肺组织TGF-β1 mRNA的相对表达量和BLM组比较在7,14,21 d明显增加(P<0.05)。结论 AG可以降低BLM诱导的肺纤维化程度,作用机制可能是通过抑制TGF-β1的基因表达。

活性维生素D对老年慢性阻塞性肺疾病病人免疫状态及肺功能的影响研究

目的探讨活性维生素D(骨化三醇)对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人免疫功能及肺功能的影响。方法本研究纳入我院124例稳定期老年COPD病人(COPDⅡ~Ⅳ级,年龄≥65岁),采用自身前后对照的方法,在活性维生素D给药前、给药后6个月及12个月分别测定纳入对象的肺功能,并采用细胞因子微球检测技术(CBA)检测外周血中干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-4、IL-10的浓度。结果服用骨化三醇6个月后,病人肺功能无明显改善;服用12个月后,与治疗前相比,第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)以及第1秒有力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比,治疗6个月后血清IFN-γ、TNF-α浓度降低(P<0.05),IL-4和IL-10浓度上升(P<0.05);12个月后,IFN-γ和TNF-α浓度进一步降低(P<0.05),IL-4和IL-10浓度进一步升高(P<0.05)。结论老年COPD病人长期服用活性维生素D可以通过调节免疫功能的方式改善其肺功能。