PM_(10)和PM_(2.5)对哮喘小鼠Th17细胞分化的影响

目的 探讨PM_(10)和PM_(2.5)对哮喘小鼠Th17细胞分化的影响及其对Stat3和Irf4转录因子的作用。方法 腹腔注射卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏和滴鼻吸入OVA激发构建哮喘模型,并对哮喘模型分别给予PM_(10)、PM_(2.5)刺激,对照组则全部用生理盐水代替进行致敏、激发和刺激。病理切片染色和细胞计数观察气道炎症表型,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测Th17相关细胞因子表达变化。结果 与对照组相比哮喘各组气道炎症明显增强,炎症细胞明显增多,Th17相关细胞因子明显增高(P<0.05)。与PM_(2.5)处理组相比,PM_(10)处理组中支气管肺部炎症细胞浸润明显增多(P<0.05),肺细支气管重塑现象明显加重;Th17细胞型细胞因子IL-17A、IL-21、IL-22、IL-23分泌明显增多(P<0.05);肺组织中Irf4转录水平及蛋白水平均明显增高(P<0.05);而Stat3 mRNA表达组间差异无统计学意义(P>0.05),其活化形式磷酸化的Stat3(pStat3)蛋白有微弱的表达。结论 PM_(10)可能比PM_(2.5)具有更强的促炎效应,且这种影响可能主要是通过Irf4和Stat3通路增加Th17细胞在哮喘中的累积实现的。

水通道蛋白1、5在LPS诱导大鼠急性肺损伤组织中的表达

目的探讨水通道蛋白1、5(AQP1、AQP5)在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)组织中的表达变化及意义。方法将Wistar大鼠48只随机分为对照组(NC)和急性肺损伤(ALI)组,ALI组通过尾静脉注射脂多糖(LPS),分别于2、6、12和24 h采集标本。HE染色观察肺组织病理;测定肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)水平;Western blot、免疫组化和real-time PCR法检测肺AQP1、AQP5蛋白和mRNA变化。结果与对照组比较,ALI组TNF-α、MIP-1α均有显著性升高(P<0.05),至24 h点逐渐恢复。注射LPS后2 h出现肺泡和间质水肿,炎性细胞浸润,以12 h最明显;肺W/D比、肺泡灌洗(BALF)蛋白含量、肺通透指数均较对照组明显升高(P<0.05),12 h点达峰值。ALI组各时间点肺AQP1及AQP5mRNA及蛋白表达均较对照组明显下调(P<0.01),以12 h点下降最明显。肺AQP1、AQP5 mRNA表达与肺W/D比、血清TNF-α,MIP-1α存在明显负相关。结论脂多糖诱导大鼠急性肺损伤,其肺水肿的形成可能与AQP1、AQP5的表达下调有关。

脂多糖对大鼠肺损伤及肺组织中AQP1和AQP5表达的影响

目的:探讨大鼠经静脉注射脂多糖(LPS)对急性肺损伤(ALI)及肺组织中水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,阐明其作用机制。方法:SPF级2月龄雄性Wistar大鼠48只随机分为对照组和LPS组(n=24),分别经尾静脉注射生理盐水和LPS,每组分别于注射后2、6、12和24h时间点采集标本,每个时间点6只。HE染色观察肺组织病理学变化;测定大鼠肺湿/干质量(W/D)比、肺渗透指数;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP^(-1)α)水平;采用Western blotting、免疫组织化学和Real-Time PCR方法检测大鼠肺组织中AQP1和AQP5蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,LPS组大鼠血清TNF-α和MIP^(-1)α水平在注射LPS后2、6和12h时间点均明显升高(P<0.05),至24h时逐渐恢复正常。HE染色,注射LPS后2h大鼠肺组织出现水肿和炎性细胞浸润,以12h时间点最明显;LPS组各时间点大鼠肺W/D比、肺渗透指数均较对照组明显升高(P<0.05),12h时间点最明显。与对照组比较,LPS组各时间点大鼠肺组织中AQP1和AQP5mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P<0.01),以12h时间点下降最明显。结论:LPS可导致大鼠ALI和肺组织中AQP1及AQP5表达水平下调,并参与了肺水肿的形成。

地塞米松对内毒素性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5表达的影响

目的探讨内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）大鼠肺水通道蛋白1、5（AQP1、AQP5）表达的变化及不同剂量地塞米松（DEX）对其干预作用。方法将Wistar大鼠随机分为五组：对照组（NC）、ALI组、三种剂量的DEX干预组（小剂量0．5mg／kg、中剂量1．0mg／kg、大剂量5．0mg／kg）。ALI组通过尾静脉注射LPS，干预组注射LPS后给予不同剂量的DEX，于2、6、12和24h采集标本。HE染色观察肺组织病理，测定肺湿／干质量比（W／D）、肺通透指数，ELISA检测血清TNF-α、MIP-1α水平；Western blot、免疫组化和Real—TimePCR法检测肺AQPl、AQP5蛋白和mRNA变化。结果与对照组比较，AL1组TNF—α、MIP—1α均明显升高（P〈0．01），至24h逐渐恢复；与ALI组比较，DEX干预各组上述炎症因子随时间延长逐渐下降（Pc0．05）。ALI组出现肺泡和间质水肿，炎性细胞浸润，以12h最明显；而DEX干预各组肺损伤病理明显减轻。经LPS处理各组肺W／D比值、肺通透指数均较对照组明显升高（P〈0．05），12h达峰值；与ALI组比较，DEX干预各组上述指标随时间延长逐渐下降（P〈0．05），但各干预组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Au组各时间点肺AQP1及AQP5表达均较对照组明显下调（P〈0．01），以12h时间点下降最明显；与ALI组比较，DEX干预各组AQP表达上调，随时间延长，AQP表达逐渐恢复，但各干预组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论LPS能诱导大鼠ALI，DEX对肺损伤具有保护作用，其作用机制可能与DEX上调AQP1、AQP5的表达有关，与DEX剂量无量效关系。

来曲唑联合生长激素治疗青春期生长激素缺乏症男孩对成年身高的影响

目的：比较来曲唑联合基因重组人生长激素（rhGH）与单用rhGH对青春期生长激素缺乏症（GHD）男孩的治疗效果。观察治疗前后生长速率（GV）、骨龄（BA）、预测成年身高（PAH）和骨龄的身高标准差积分（HtSDSBA）变化，及来曲唑对血脂、性激素的影响。方法选取2010年10月～2014年1月，厦门大学附属第一医院儿科内分泌专科50例青春期GHD男孩，随机分为两组，A组20例单用rhGH，B组30例来曲唑联合rhGH，疗程2年。结果治疗后B组GV、PAH、HtSDSBA较A组提高，BA较A组减慢，差异有统计学意义。B组治疗后胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）与治疗前比较，差异无统计学意义；低密度脂蛋白（LDL-C）较治疗前升高（P＜0.05）；停药3个月与治疗后比较，LDL-C回落（P＜0.001）。而A组治疗后、停药后血脂与治疗前比较差异无统计学意义。A、B两组治疗前雌二醇（E2）、睾酮（T）差异无统计学意义，治疗后B组T较治疗前升高，亦较A组升高（P＜0.05）。停药后3个月与治疗后比较，E2回升（P＜0.05）、T降低（P＜0.001）。结论来曲唑联合rhGH治疗青春期GHD患儿，能更好地提高PAH，安全性及耐受性良好，对血脂及性激素的影响为可逆性。

儿童急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤中毒后成功解救1例并文献复习

急性淋巴细胞性白血病(ALL)是儿童较为常见的恶性肿瘤,随着分子生物学的发展,其诊断更加精准,治疗方案更加完善,5年以上长期无病生存(long term disease free survival,L-DFS)率已达到80%以上[1-2]。其中大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)冲击化疗(>1g/m^2)可透过血脑、血眼、血睾丸屏障,作为庇护所治疗和全身巩固治疗的有效手段,在清除微小病灶、降低肿瘤复发率及预防髓外白血病的发生等起着重要作用。但随着甲氨蝶呤(MTX)剂量的增加,相关副作用也增多,甚至可危及生命。现通过复习1例ALL患儿大剂量MTX中毒(48h MTX血药浓度高达58.32μmol/L)后成功解救的病例,并结合相关文献探讨其临床表现、发病机制、诊断、并发症、治疗及预后。

闽南地区儿童实体肿瘤单中心研究

目的了解2015—2019年我院儿童实体肿瘤收治情况,为儿童实体肿瘤的防控诊治提供参考依据。方法对2015年1月—2019年12月五年间我院14周岁以下467例新发儿童实体肿瘤患者病历进行统计分析。结果467例儿童实体肿瘤患者初次就诊科室各异,儿外科共收治205例,占43.9%,其次是儿内科98例,占21.0%;男性238例,女性229例,男女之比为1.04∶1;0~3岁病例数占比最高为52.9%,11~14岁年龄组最低为9.0%;手术/活检率99.1%;病理诊断率100%;良性肿瘤353例,占比75.6%,恶性肿瘤93例,占比19.9%,交界性21例,占比4.5%;良性肿瘤发病顺序为血管瘤、钙化上皮瘤、错构瘤等,恶性肿瘤则为恶性畸胎瘤、视网膜母细胞瘤、中枢神经系统和其他颅内和脊髓内肿瘤、淋巴瘤和网状内皮细胞肿瘤等;恶性肿瘤基因检测率达到31.2%(29/93)。结论儿童实体肿瘤有自己的年龄及种类特点,发病率不容小觑,随着诊断技术的进步和治疗手段的改善,我们更需加强多学科合作使儿童实体肿瘤的防控得到进一步的落实。

初发儿童急性B淋巴细胞白血病细胞遗传学特征及首次治疗反应危险因素分析

目的探讨初发儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的细胞遗传学特征及首次治疗反应相关影响因素。方法回顾性收集2019年4月至2021年9月厦门大学附属第一医院收治的49例初发B-ALL患儿资料,获得患儿临床特征、细胞遗传学和分子生物学检查结果、治疗前后临床指标等数据。按照儿童ALL诊疗规范(2018版),进行基因分型和首次诱导化疗后临床危险度分层及化疗方案制订。分析B-ALL患儿不同基因分型与临床指标的关系,采用Spearman等级相关分析法分析临床危险度分层与各指标的相关性。结果49例患儿中位年龄3.0岁(四分位数间距:3.2岁),男性32例(65.3%),女性17例(34.7%),男女比1.88∶1。治疗前基因突变35例(71.4%),无突变14例(28.6%)。基因突变35例中,E2A-PBX15例(10.2%),其中伴费城染色体(Ph)样1例;IKZF1缺失8例(16.3%),其中伴Ph样4例,伴Ph阳性1例,伴MLL重排1例;MLL重排3例(6.1%);单独Ph样12例(24.5%);TEL-AML16例(12.2%),其中伴Ph样2例;单独Ph阳性1例(2.0%)。临床危险度分层高危7例(14.3%),中危28例(57.1%),低危14例(28.6%)。诱导化疗前基因突变患者临床危险度高、中危患者比例[20.0%(7/35)比0.0%(0/14)、62.9%(22/35)比42.9%(6/14)]及诱导化疗第33天基因突变情况发生改变患者比例[42.9%(15/35)比0.0%(0/14)]均高于治疗前基因未突变患者(均P<0.01),诱导化疗前是否基因突变与性别、初诊时白细胞计数、激素敏感性、诱导化疗第15天至第19天骨髓微小残留病(MRD)、诱导化疗第33天MRD均不相关(均P>0.05)。患儿临床危险度分层与初诊时白细胞计数(r=0.392,P=0.005)、中性粒细胞计数(r=0.453,P=0.001)、淋巴细胞计数(r=0.418,P=0.001)、单核细胞计数(r=0.359,P=0.017)、血尿酸水平(r=0.378,P=0.007)、治疗前(r=0.316,P=0.027)和诱导化疗第15天至第19天(r=0.399,P=0.005)及诱导化疗第33天骨髓幼稚淋巴细胞比例(r=0.408,P=0.028)以及诱导化疗第33天骨髓MRD≥0.0001患儿比例(χ^(2)=15.42,P<0.001)、治疗前基因突变患儿比例(χ^(2)=9.10,P=0.005)均相关。结论B-ALL患儿初发时血液中高水平的白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、幼稚淋巴细胞、血尿酸以及化疗第15天至第19天,第33天幼稚淋巴细胞、化疗第33天MRD、基因型与治疗反应不佳可能相关。临床危险度分层与基因突变情况相关,基因突变可能是B-ALL患儿治疗反应重要指标。

纳洛酮注射液联合氨茶碱注射液治疗小儿急性呼吸衰竭的临床研究

目的观察纳洛酮注射液联合氨茶碱注射液治疗小儿急性呼吸衰竭的临床疗效和安全性。方法将120例小儿急性呼吸衰竭患儿随机分为对照组和试验组,每组60例;对照组给予常规疗法联合尼可刹米治疗,尼可刹米3 mg加入0.9%NaCl或5%的葡萄糖溶液500 mL中,静脉滴注,50 mL·h^(-1),bid,共7 d;试验组在对照组基础上,加用纳洛酮0.01~0.05 mg·kg^(-1)与氨茶碱4~8 mg,静脉推注,50 mL·h^(-1),bid,共7 d。比较2组患者的临床疗效、治疗前后的血气指标,以及药物不良反应发生率。结果治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为85.00%(51例/60例)和66.67%(40例/60例),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的酸碱度(p H)分别为7.01±0.06,7.11±0.29;动脉血氧分压(PaO_2)分别为(68.99±11.44),(59.34±10.30)mm Hg;动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)分别为(63.24±10.54),(70.69±18.98)mm Hg;动脉血氧饱和度(SaO_2)分别为(85.57±13.79)%,(69.01±10.03)%;一秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)分别为(40.43±12.47)%,(35.07±11.83)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组的药物不良反应主要有皮疹、呕吐、抽搐,对照组的药物不良反应主要有皮疹、呕吐、抽搐、心律失常。试验组和对照组的药物不良反应发生率分别为11.67%(7例/60例)和26.67%(16例/60例),差异有统计学意义(P<0.05)。结论纳洛酮联合氨茶碱治疗小儿急性呼吸衰竭有较好的临床疗效,安全性较高。

血管紧张素Ⅱ及其受体在脂多糖诱导的大鼠急性肺、肾损伤中的变化

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体在脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺、肾损伤中的表达变化及意义。方法将Wistar大鼠48只随机分为对照组和LPS组,LPS组通过尾静脉注射LPS,对照组通过尾静脉注射等量的生理盐水,分别于2 h、6 h、12 h和24 h采集标本。通过HE染色观察肺、肾组织病理;测定肺湿/干重比、血清肌酐、尿素氮;应用放射免疫分析法检测血浆及肺、肾组织中AngⅡ浓度变化,Western blot、免疫组织化学法检测肺、肾组织血管紧张素受体1(AT1R)、血管紧张素受体2(AT2R)蛋白变化。结果与对照组相比,LPS组大鼠肺、肾组织病理显示不同程度损伤,肺湿/干重比、血清肌酐、尿素氮水平显著升高(P<0.05),血浆AngⅡ含量在2 h、6 h明显升高(P<0.05);肺、肾AngⅡ含量在各时间点均显著升高(P<0.05),肺、肾AT1R蛋白表达明显下降(P<0.05),AT2R蛋白表达明显升高(P<0.05),且AngⅡ、AT2R与肺、肾功能损伤指标呈正相关,AT1R与肺、肾功能损伤指标呈负相关。结论LPS导致大鼠的肺、肾功能出现损伤及肾素-血管紧张素系统改变,且AngⅡ及血管紧张素受体变化与肺、肾损伤存在相关性,血管紧张素Ⅱ及其受体可能参与内毒素诱导的肺、肾损伤。