中药伍铜铁复合制剂对癌细胞恶性程度影响的研究

ＢＡＬＢ／ｃ小鼠荷腹水型肝癌，连续灌喂中药伍铜铁复方制剂（ＣＨＣＦ）１０天，流式细胞光度分析结果表明：ＣＨＣＦ可使癌细胞ＤＮＡ含量降低；增殖指数（ＰＩ）下降（对照组８３．４±２．６，给药组７８．８±１．５或对照组６７．２±１．３，给药组６４．２±１．６，Ｐ＜０．０５）；Ｇ１期细胞数明显增多，而Ｓ＋Ｇ２Ｍ期细胞数明显减少（Ｐ＜０．０５～０．０１）；ＤＮＡ组方图中二倍体峰明显增高变大，而多倍体峰变小。再移植实验证明：经ＣＨＣＦ处理过的癌细胞再移植的动物有２／１０不长肿瘤，肿瘤抑制率为７１．７％～８８．３％；再移植动物存活期明显延长，从２６．１±１１．８天延长至３８．１±９．６天或延长至３９．６±７．２天，生命延长率（Ｔ／Ｃ）分别为４６％和５２％。因而证明：该制剂降低了小鼠肝癌细胞的恶性程度，其作用机理可能是激活癌细胞膜的氧化磷酸化过程。

克癌7851对小鼠HepA肝癌细胞DNA及细胞周期影响的流式细胞光度分析

取灌喂克癌7851(160 mg/kg)20d的荷HepA肝癌小鼠的腹水癌细胞进行细胞生物学特性的研究,把经过一系列处理和荧光染色的癌细胞在FACS 420型流式细胞光度计上进行分析。结果表明:①克癌7851可使癌细胞的DNA含量明显下降(从1511.7±1.2降至133.5±4.4 AU或从157.0±1.7降至146.0±3.0 AU);②DAN指数(DI值)和增殖指数(PI值)亦明显下降(p<0.05和p<0.01);③可使癌细胞的G1期细胞数明显增加,从43.2±4.5％增加到78.3±5.5％,而S期和G 2M期的细胞数明显减少,而且DNA组方图的多倍体峰变得低平。提示克癌7851可以抑制癌细胞的DNA合成。

气功外气对肿瘤作用的实验研究

本文观察了气功师外气对小鼠肝癌的作用。气功在距癌细胞悬液10厘米处发放外气15分钟,平均每10~5个癌细胞中有5.8×10~3个死亡。将此细胞悬液植入小鼠腹腔,腹水癌发生率较对照组降低20％,而且癌性腹水发展缓慢,量少。将未经外气作用的癌细胞植入小鼠腹腔后,气功师连续20天对小鼠发放外气,每次15分钟,每日二次。腹水癌发生率降低15％,死亡癌细胞数为4.0×10~3/10~5,然而腹水发展速度比对照组快而且量也多。但癌细胞增殖分裂受到抑制,对照组分裂指数为45‰,气功组为25％。作者认为气功对治疗肿瘤的效应问题,有待深入研究。

克癌7851对荷瘤小鼠造血与免疫功能的影响

本文观察了克癌7851对荷瘤小鼠骨髓造血和免疫功能的影响。结果表明,对照组每根股骨造血祖细胞数量为16856.7±3237.8,给药组为32355.7±4568.9。给药动物的胸腺及脾指数高于对照动物,对淋巴细胞转化及 IL-2产生也有不同程度的促进作用。

老化机体造血功能研究——大鼠造血祖细胞的定量观察

本文采用制备大鼠肺条件培养基进行单层软琼脂法培养大鼠骨髓造血祖细胞(GM—CFU),进行定量研究。结果显示肺条件培养基的刺激因子(GM—CSF)活性好,15％浓度的CM刺激2.5月龄大鼠骨髓每4×10~5个有核细胞中形成细胞集落92.5±23.8。定量研究结果表明,老年大鼠的GM—CFU明显下降,如青年大鼠(2.5月龄)的GM—CFU为92.5±23.8,而老年大鼠(24月龄)的GM—CFU则为25.4±9.6。进一步观察发现有随年龄增长而下降的趋势,提示老化的机体其骨髓造血功能是低下的。

分枝杆菌多糖对小鼠造血功能的影响

观察了分枝杆菌多糖（ＭＰＳ）对环磷酰胺抑制ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓作用的影响。结果表明：给予ＣＰＡ使小鼠骨髓ＧＭ－ＣＦＵ抑制约３０％左右。１．０ｍｇ／ｋｇ的ＭＰＳ对ＧＭ－ＣＦＵ有促进作用（第１批实验ＣＰＡ对照组３１６．５±３４．６，实验１组４５４．５±１９．１，Ｐ＜０．０５；第２批实验ＣＰＡ对照组２０８．７±４３．７，实验２组４３７．８±５４．１，Ｐ＜０．０２）；而０．１５ｍｇ／ｋｇＭＰＳ无促进作用。在０．１５和１．０ｍｇ／ｋｇ剂量下，小鼠血清ＧＭ－ＣＳＦ活性水平明显提高；０．１５和１．０ｍｇ／ｋｇＭＰＳ可分别刺激小鼠每０．１ｍＬ血清产生５００Ｕ和８５０ＵＧＭ－ＣＳＦ。分析认为ＭＰＳ与日本的Ｚ－１００活性水平相当，这些作用可能通过激活单核或Ｔ细胞而间接产生。

人外周血T淋巴细胞亚群的克隆培养与分析研究

人T细胞克隆培养始于70年代末,目前国内尚未见报告。本文是简化的一步法获得成功。培养体系中,PHA 2μl/ml,2-ME 5×10^(-5)M/ml,SRBC 0.1%为最佳条件。在 T 克隆中,E-玫瑰花结形成细胞数为90.9%,OKT-4阳性率51.3%,OKT-8为44.1%,OKT-4:OKT-8之比为1.2:1。培养7例淋巴瘤细胞(T 淋巴瘤3例,B 淋巴瘤4例),均可获得克隆成功。这一克隆体系将应用于 T 细胞系的建株,评价各类病人及婴幼儿的 T细胞功能以及用于研究中药对细胞免疫功能的影响等。

克癌7851对癌细胞的作用

经口连续给荷Ehrlich腹水癌的BALB/c小鼠克癌7851(AC 7851 160 mg/kg)15d,结果表明癌细胞死亡率明显增加,而腹水量明显减少,二者呈高度相关。AC 7851体外实验用扩散合细胞培养法,结果对空白对照组(不加任何药物)、阴性对照组(黄芪提取液0.6mg/ml)肝癌细胞无杀伤效应;而阳性对照组(阿霉素0.8μg/ml)明显地杀伤了癌细胞(死亡率为14.9±0.8％),AC 7851组(剂量为16μg/ml)也杀伤了大量的癌细胞(死亡率为6.9±1.3％)。扫描电镜下见癌细胞微绒毛大量脱落,许多细胞崩解破坏,破损的细胞粘连在一起形成团块。透射电镜观察到,胞膜、胞核、线粒体及异染色质等均有不同程度的损伤,乃至细胞崩解破坏,核内可见许多圆形的、电子密度高的致密颗粒,其杀伤效应有随AC 7851剂量增加而增加的趋势。在同样条件、同样剂量下,AC 7851对正常淋巴细胞损伤较轻。

仙龙冲剂的抗肿瘤活性及其作用机理的研究

目的:研究仙龙方的体内、体外抑癌作用及机理。方法:用 BALB/C 小鼠,荷肝癌和艾氏癌实体瘤,经口给药,观察肿瘤的抑制程度和动物的生存状况。结果:给药组肿瘤生长曲线明显低于对照组。仙龙方还能延长荷瘤动物的生存期,生命延长率为30%～69%。体外实验显示仙龙方对人癌细胞的抑制有一个良好的剂量—效应关系,肝癌的曲线之回归系数 r=0.9983,IC_(50_值为14.8±2.8μg/ml;胃癌曲线的系数 r=0.9995,IC_(50)值为9.7±5.1μg/ml,表明胃癌细胞更敏感些。细胞学研究发现癌细胞的不同程度的损伤、核染色质的凝聚现象及内质网肿胀,流式光度术分析 DNA 组方图上出现了凋亡峰。结论:仙龙方有诱导癌细胞凋亡作用。

增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡作用的机制探讨

目的 :观察预防性应用增液汤注射剂对幼鼠胸腺细胞凋亡及其相关基因的影响。方法 :给 4～ 5周龄Wistar大鼠腹腔注射增液汤注射剂和地塞米松 ,采用原位末端标记 (TUNEL)法分析不同处理组的凋亡细胞 ,同时采用免疫组化方法检测幼鼠胸腺细胞bcl 2和bax基因蛋白表达情况。结果 :用TUNEL法标记凋亡细胞 ,荧光显微镜下 ,地塞米松组可见致密浓染的黄绿色荧光 ,呈局灶状分布 ;而增液汤组只有散在的荧光。光镜观察地塞米松组TUNEL阳性细胞数目较多 ,其凋亡指数为 0 4 1± 0 0 1;增液汤组TUNEL阳性细胞数目较少 ,凋亡指数为 0 0 7± 0 0 0 4 ,与地塞米松组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。免疫组织化学结果表明 ,地塞米松组bcl 2基因蛋白呈低表达 ,其蛋白阳性率为 (0 196 0± 0 0 0 6 0 ) % ,bax蛋白过度表达 ,蛋白阳性率为 (0 4 315± 0 0 16 5 ) % ,bcl 2 /bax <1;相反增液汤组细胞bcl 2基因蛋白呈高表达 ,bax基因蛋白仅有少量表达 ,其蛋白阳性率为 (0 5 0 10± 0 0 170 ) %和 (0 185 4± 0 0 0 9) % ,bcl 2 /bax >1。两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :通过调控凋亡基因bcl 2 /bax表达 ,增强胸腺细胞对地塞米松的抵抗 ,进而抑制细胞凋亡 ,可能是增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡的重要作用环?

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GMCFU的影响

对分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭＣＦＵ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭＣＦＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６～１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ＞０．０５）。

不同月龄实验大鼠造血细胞的定量观察

目的观察老年大鼠与青年大鼠造血功能的差别。方法采用含有15%刺激因子(GM-CSF)的大鼠肺条件培养基进行单层软琼脂法培养大鼠骨髓造血祖细胞,进行定量观察。结果肺条件培养基内刺激因子(GM-CSF)浓度为15%时活性最好。2.5月龄大鼠骨髓,每4×105个有核细胞中形成细胞集落(GM-CFU)为92.5±23.8,而24月龄老年大鼠则为23.1±9.6。以2.5月龄青年大鼠GM-CFU为100%,12月龄大鼠为37%,18月龄大鼠为35.7%,24龄大鼠则为27.2%。结论骨髓造血功能随月龄的增加逐渐减弱,老龄大鼠骨髓造血功能明显下降。

地塞米松诱导幼龄大鼠胸腺细胞凋亡模型

目的 :建立一个比较实用且成型时间短的地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡模型。方法 :给幼龄大鼠 ( 4周～ 5周 )腹腔注射地塞米松 ( 0 0 2 g/kg) ,采用形态学 (光镜和电镜 )、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度分析等方法研究 3、 6、 9、 1 5、 2 4h等不同注射时间胸腺细胞凋亡变化。结果 :在 1 5h内 ,地塞米松诱导的大鼠胸腺细胞凋亡百分率随时间延长 ,凋亡发生率从 6 2 %逐渐增至 58 5% ;注射地塞米松 1 5h ,在光镜和电镜下均观察到胸腺细胞凋亡的典型形态变化 ;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形条带 ;流式细胞光度分析可见凋亡峰出现。结论 :幼龄大鼠腹腔注射地塞米松 ( 0 0 2 g/kg) 1 5h可成功地诱导出一个比较理想的体内胸腺细胞凋亡模型。该模型成型时间短 ,适用于凋亡调控药物及其作用机理的研究。

LEEP刀治疗宫颈上皮内瘤变108例分析

目的探讨LEEP刀治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床疗效。方法108例CIN患者均行LEEP术。术后随访6个月,采用宫颈液基细胞薄层制片(TCT)全程随访。结果阴道镜下活检病理诊断与最后诊断的符合率为56.5%(61/108),升级率为4.6%(5/108),降级率为38.9%(42/108),108例患者术后6个月细胞学复查转阴率为100.0%。结论LEEP刀治疗CIN疗效好,是一种理想的CIN诊断、治疗手段。

沙棘蜂王浆的抗肿瘤作用及其对免疫、造血功能的影响

沙棘蜂王浆可提高荷瘤动物的动态生存曲线、提高存活率(20％～42％)和延长生存期。对瘤体增长有明显抑制作用,抑瘤率为27％～48％。在接种瘤细胞后即开始服用,可降低肿瘤发生率(20％～33.3％),并提高巨噬细胞吞噬功能、促进淋巴细胞转化、增强B细胞反应;对骨髓造血祖细胞的功能也有明显促进。可作为癌症治疗的辅助药物。

宽馏分重整汽油及直馏汽油芳烃快速分析

建立了对宽馏分的重整原料油及生成油芳烃的色谱分析方法 ,采用OV - 2 75为固定液的色谱柱 ,试验表明该方法简捷 ,准确度和重现性良好 ,适用于汽油质量监控快速分析。

仙龙冲剂抗癌作用及其对巨噬细胞吞噬功能影响的实验研究

目前,抗癌中药大体上有四方面的作用:抑杀肿瘤细胞的祛邪作用;调整机体免疫功能等抗癌潜能的扶正作用;提高手术、放疗、化疗等效果的增敏作用;降低其他治疗(放疗、化疗)毒副反应的减毒作用。仙龙冲剂是中药与微量元素中西医结合的复方,笔者从抑瘤作用和对免疫功能的影响两大方面对其进行研究。报告如下。

仙龙冲剂对荷瘤小鼠自然杀伤细胞活性的影响

有文献报道仙龙冲剂对HepA肝癌有较高的抑制率,对荷瘤小鼠有较高的生命延长率,明显地提高荷瘤小鼠单核巨噬细胞吞噬功能。自然杀伤细胞在机体免疫监视和抗肿瘤生长中起着重要作用。本实验采用MTT法,探讨仙龙冲剂对荷瘤小鼠NK细胞活性的影响。1

仙龙冲剂对荷瘤小鼠淋巴细胞转化功能的影响

<正> 文献报道仙龙冲剂对HePA肝癌小鼠的肿瘤有较高的抑制率,对荷瘤小鼠有较高的生命延长率。本实验研究其对脾T淋巴细胞转化的影响。所有体外淋巴细胞转化实验的原理是淋巴细胞可受多种方式刺激(PHA,ConA等)而发生有丝分裂变化,有时称母细胞变化,并分裂成子细胞。转化的多少可进行定量测定是本实验的基础。1 材料和方法1.1 动物及分组 选用18～22g雄性健康NIH小鼠,由中日友好临床医学研究所提供,取HePA肝癌小鼠腹水癌细胞中科院肿瘤所,配制成1×10~7/ml浓度,常规消毒接种于右腋后皮下,将荷瘤小鼠随机分成模型、阳性对照和3个给药组,每组10只动物。