5种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法在室内测定了5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌的毒力。结果表明,5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌菌丝生长均有较好的抑制作用,其中10%苯醚甲环唑微乳剂对苹果轮纹病病原菌的抑菌效果最佳,EC50(抑制中浓度)为0.0971mg/kg,其次为43%戊唑醇悬浮剂,EC50为0.2567mg/kg。

美国蓝莓病毒病及病毒类似病害的发生与防治

简要介绍了美国不同蓝莓种植区发生的病毒病害,对主要病毒病害的种类、各病毒病害的症状特征和经济危害、流行学特性、防控措施等进行了说明,以期为我国近些年兴起的蓝莓产业的安全生产和可持续发展提供一定的借鉴作用。

7种杀菌剂防治苹果炭疽病田间药效试验

2007—2008年7种杀菌剂防治苹果炭疽病田间试验结果表明,40%福美双.福美锌可湿性粉剂250倍液防效最好,防效在90%以上;40%福美双.福美锌可湿性粉剂300倍液,50%甲基硫菌灵.代森锰锌可湿性粉剂500、1000倍液,25%溴菌腈可湿性粉剂500倍液防效也较好,防效在88%以上;其他药剂防效稍低,但防效均在80%以上。

几种药剂对苹果果实轮纹病的田间防效研究

比较了5种不同复配剂对苹果果实轮纹病的防效,结果表明:在田间推荐使用浓度下,5种药剂对苹果果实轮纹病均有较好的防控效果。70%福美双.甲基硫菌灵可湿性粉剂700倍液、600倍液,32.8%苯醚甲环唑.多菌灵可湿性粉剂2000倍液、1500倍液,30%多菌灵.戊唑醇可湿性粉剂800倍液、55%甲硫.锰锌可湿性粉剂600倍液,6%福.戊可湿性粉剂300倍液采收期和贮后30 d防效均在80%以上;而30%多菌灵.戊唑醇可湿性粉剂1000倍液、55%甲硫.锰锌可湿性粉剂800倍液,6%福.戊可湿性粉剂400倍液在采收期和贮后30 d防效稍低但均在75%以上。

苹果MADS-box转录因子的生物信息学及其在不同组织中的表达

【目的】分析已知苹果(Malus×domestica)MADS-box基因基本信息,研究其在不同组织中表达情况。【方法】利用NCBI数据库查询并获得苹果MADS-box基因,采用CLC Combined Workbench version 6、WebLogo 3、MEGA4.1、MapInspect和MEME等软件对其蛋白序列进行生物信息学分析。采用RT-PCR技术研究MdMADS基因在不同组织中的表达情况。【结果】共得到26个苹果MADS-box基因。MADS-box结构域分析显示,氨基酸10(I)、16-19(RQVT)、22-23(KR)、29-31(KKA)、33(E)、37-39(LCD)、42(V)和48(S)是保守不变的。保守元件分析表明,苹果MADS-box基因包含4个保守元件:元件1、3为MADS盒;元件2、4为K盒。所有苹果MADS-box蛋白都包含有MADS盒(除MdMADS9)和K盒。进化树分析结果显示,苹果MADS基因共分为5个亚组。MdMADS1、3、4、6、7、8、11、18属于SEP亚组;MdMADS2、5、12属于AP1亚组;MdMADS10、14、15、19、22和MdAGL属于AG亚组;MdMADS16、17、21、MdSOC1、MdSOC1a和MdSOC1c属于SOC1亚组;MdMADS13、23和MdPI属于AP3亚组;MdMADS20属于SVP亚组。染色体定位分析显示,MdMADS在8号染色体上分布最多,共有4个;其次是染色体2、14和17,均分布3个;染色体1、5、6、7、11和16均分布1个;染色体3、4、12和15则没有分布。RT-PCR结果分析显示,SEP和AGL亚组表达模式较为一致,主要在花和果实中表达;AP1亚组除在花和果实中表达外,在其它组织器官中也有表达。【结论】苹果MADS-box基因结构高度保守,多数成员参与调控花和果实发育过程。

渤海湾苹果产区主要病虫害发生动态及综合防治策略

全面分析了渤海湾苹果产区主要病虫害的发生动态及防治现状,对造成苹果树主要病虫害动态变化的原因进行了分析,并提出病虫害综合防治策略。

‘富士’花药培养选育出苹果新品种‘华富’

‘华富’品种是采用单倍体育种技术,由‘富士’苹果花药培养选育出的高品质新品种。果 实近圆形,平均单果质量236.5g;果形指数0.86;果皮底色淡黄,盖色红色,有条纹;果肉黄色、硬脆中 细,果肉硬度9.2～9.96kg/cm2,可溶性固形物平均16.9%;可溶性糖平均13%;风味酸甜适度,有淡 香,品质上等或极上等;果实成熟期10月20日左右。

蓝莓葡萄座腔菌枝枯病研究进展

葡萄座腔菌科真菌是木本果树及林木上的重要病原菌,其中最主要的种葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的枝枯病是蓝莓生产中的重要病害之一。综述了蓝莓葡萄座腔菌枝枯病(简称蓝莓枝枯病)的症状特点、侵染过程、发生及流行规律以及综合防治研究,从病害宏观流行学角度提出了亟待解决的病害防控问题。

苹果炭疽叶枯病菌GcAP1复合体β亚基基因的克隆及功能分析

【目的】明确衔接蛋白(adaptor protein)GcAP1复合体β亚基在苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)生长发育和致病过程中的功能,检测GcAP1β在该菌中的时空表达模式,并揭示其是否调控多聚半乳糖醛酸内切酶(endopolygalacturonase)基因CgPG1和CgPG2、果胶裂解酶(pectin lyase)基因pnl-1和pnl-2以及果胶酸酯裂解酶(pectate lyase)基因pelA和pelB的表达,为深入开展苹果炭疽叶枯病菌衔接蛋白在致病信号传导途径中的分子机制研究打下基础。【方法】通过构建GcAP1β基因敲除载体和GcAP1β-gfp融合表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术(ATMT)获得Δgcap1β突变体和GcAP1β恢复菌株Δgcap1β-GcAP1β,并由RT-PCR和Southern杂交分析进行鉴定。以野生型菌株W16为对照,对Δgcap1β突变体和GcAP1β恢复菌株Δgcap1β-GcAP1β的生长速度、产孢能力、分生孢子萌发率及附着胞形成率和致病性进行测定。利用生物信息学软件Prot Comp 9.0和TMHMM对GcAP1β蛋白进行结构分析,并结合GcAP1β-GFP信号观测,进行GcAP1β的亚细胞定位。利用qRT-PCR技术,检测GcAP1β在菌丝、分生孢子、芽管、附着胞和侵染阶段的表达量,并检测CgPG1、CgPG2、pnl-1、pnl-2、pelA和pelB在野生型菌株和Δgcap1β突变体中的表达量。【结果】GcAP1β基因全长2 321bp,含有3个内含子,编码720个氨基酸。与野生型菌株W16相比,Δgcap1β突变体菌落成褶皱状,菌丝生长速度明显减慢,而分生孢子产量、分生孢子萌发率、附着胞形成率无显著差异。Δgcap1β致病力明显降低,仅在苹果叶片上引起极小的点状斑。GcAP1β基因恢复菌株Δgcap1β-GcAP1β完全修复了因GcAP1β基因缺失造成的表型缺陷。荧光检测显示,融合蛋白GcAP1β-GFP分布于细胞质中。qRT-PCR检测结果表明,GcAP1β在苹果炭疽叶枯病菌各个发育阶段都有表达,且在侵染后表达量相对最高。GcAP1β的缺失导致CgPG1表达量降低至20.3%,CgPG2表达量降低至16.5%,pnl-1表达量降低至8.2%,pnl-2表达量降低至14.4%,pelA表达量降低至4.4%,pelB表达量降至0.8%。【结论】衔接蛋白GcAP1复合体分布于细胞质中,是苹果炭疽叶枯病菌生长发育所需要的;GcAP1调控CgPG1、CgPG2、pnl-1、pnl-2、pelA和pelB的表达,是苹果炭疽叶枯病菌一个重要的毒力因子。

辽西地区苹果树腐烂病调查

通过对辽西地区6个乡镇10个苹果园2010年苹果树腐烂病发病情况进行调查,初步明确了辽西地区苹果树腐烂病的发病率与品种关系不密切,与树龄和管理方式关系密切;发病类型中的枝枯型发病与灌溉关系密切,发病部位以剪锯口发病最多,病斑复发所占比例也较大。加强田间管理、合理修剪、病斑刮治、伤口保护是防治苹果树腐烂病的关键。

生长期喷施氨基酸硒叶面肥对苹果树腐烂病的控制作用研究

在苹果树生长期连续多年喷施氨基酸硒叶面肥的基础上,通过田间调查与室内离体枝条接种,调查氨基酸硒叶面肥对苹果树腐烂病的控制作用。结果显示,生长期喷施氨基酸硒叶面肥可明显提高苹果树枝条对苹果树腐烂病的抗扩展能力,休眠期和生长期离体枝条测定病斑长度分别为15.7、9.7 mm,显著低于对照;喷施氨基酸硒叶面肥新病增长率分别为92.79%、100.98%,显著低于对照;田间平均防效分别为11.52%、27.23%,对控制苹果树腐烂病的发生有一定的作用。

苹果轮纹病菌DNA提取方法研究

由贝氏葡萄座腔菌梨专化型引起的苹果枝干轮纹病是苹果生产上发生最严重的病害之一，致病菌基因组DNA提取是其分子生物学研究的基础。针对其菌丝富含多糖、纤维素及其他次生代谢物质而且菌丝培养缓慢的特点，用采自辽宁兴城的6个苹果轮纹病菌菌株为试材，进行菌丝的液体和PDA平板培养，然后采用改良的CTAB法从菌丝中提取DNA。通过752型紫外光栅分光光度计检测，所提取的DNA的0D260nm／OD280nm比值介于1．80—2．07之间，最后将所提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳得到了较清晰的图谱。证明这两种菌丝培养方法都可用于苹果轮纹病菌DNA提取，但是PDA平板培养是一种更快捷地获得病原菌菌丝的方法；本试验采用的改良CTAB法是提取苹果轮纹病菌DNA的一种有效方法。

苹果白绢病菌生物学特性及室内药剂毒力测定

在辽宁绥中县发现苹果白绢病发生为害,为明确病原菌种类,将采集的病样进行分离培养,并采用柯赫氏法则验证致病性,根据病原菌形态和rDNA-ITS和LSU序列分析对病菌进行分子鉴定,同时进行了病菌生物学特性及防治药剂毒力测定。结果表明,分离株的菌落形态与齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.一致,经分子鉴定,其ITS序列和LSU序列与齐整小核菌的有性型序列同源性达100%,将引起苹果白绢病的病原菌鉴定为齐整小核菌。病原菌在10~35℃均可生长,25~30℃时生长最快;病原菌在pH值为3~12时均可生长,碱性环境不适宜病菌生长。室内毒力测定结果显示,戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻呋酰胺、咯菌腈和氟硅唑等5种药剂均对白绢病菌有抑制作用,其中,噻呋酰胺抑菌效果最好,EC50值为0.056 5 mg/L。

葡萄病毒AMP基因RNA干扰载体的构建

RNA干扰(RNAi)介导的植物抗病毒研究是近年来引起广泛关注的一项植物抗病毒基因工程策略。以GVA运动蛋白(MP)基因为模板扩增出了418 bp的基因片段,根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向分别插入到载体pFGC5941内含子的两侧以便其转录过程中高效产生RNA发夹结构。经PCR扩增证明已成功构建以GVA MP基因为靶标的干扰载体pFGC5941-GVAFR,并成功转入农杆菌EHA105中,为后续探讨干扰载体的干涉效果奠定了基础。

5种杀菌剂对蓝莓枝枯病菌Neofusicoccum parvum的毒力测定及对病害的防效研究

采用室内菌丝生长速率法测定了代森锰锌、百菌清、戊唑醇、甲基硫菌灵及咯菌腈5种杀菌剂对蓝莓枝枯病菌（Neofusicoccum parvum）的抑制作用，并对盆栽蓝莓和田间蓝莓植株进行了5种杀菌剂的药剂保护及治疗试验。室内毒力测定试验结果表明，代森锰锌、百菌清、戊唑醇、甲基硫菌灵及咯菌腈对蓝莓枝枯病菌菌丝生长均有一定的抑制作用，EC50值介于0．0515—4．1179mg／L，其中以咯菌腈的室内抑菌效果最佳。温室盆栽及田间药效试验结果表明，5种杀菌剂对蓝莓枝枯病均具有一定的预防效果，以百菌清及戊唑醇对枝条的保护效果较好，但对已经发病的枝条无治疗效果。因此，在田间生产中，应注重枝干伤口的保护，及时在修剪后喷施杀菌剂预防病原菌的侵染发生。

解淀粉芽孢杆菌GB1水悬浮剂的制备方法

以GB1菌浆为原材料,通过添加润湿分散剂、增稠剂、防腐剂、紫外保护剂等助剂,按照一定比例混合,并均质乳化,即制得解淀粉芽孢杆菌GB1水悬浮剂。确定最佳配方:在GB1菌浆(1×1010CFU/m L)中加入1.50%农乳602#、1.50%农乳34#、1.50%OP-10、0.10%黄原胶、0.2%尿素、0.06%对羟基苯甲酸甲酯、0.20%正辛醇。所制得的解淀粉芽孢杆菌GB1水悬浮剂具有良好的物化稳定性,且无霉变现象。

蓝莓枝枯病菌Botryosphaeria dothidea的寄主范围研究

以7种果树寄主离体枝条为试材,采用菌丝块接种法,测定了蓝莓枝枯病菌(Botryosphaeria dothidea)的寄主范围,将蓝莓枝枯病菌(B.dothidea)和苹果轮纹病菌(B.dothidea)分别在苹果枝条、果实以及蓝莓枝条上进行交互接种试验。结果表明,蓝莓枝枯病菌还可以侵染桃、李、樱桃、葡萄、苹果、梨等6种果树寄主,来源于我国辽宁地区的蓝莓枝枯病菌与苹果轮纹病菌可以交互侵染。

苹果树腐烂病病菌分生孢子获取方法研究

采用4种方法对苹果树腐烂病病菌的产孢条件进行了研究。结果表明,采用灭菌苹果枝条和30%ABA培养基能够快速、大量获得苹果树腐烂病病菌分生孢子,持续光照和25℃培养也是病菌产孢的必要条件。

8种杀菌剂防治梨黑星病试验

田间防治试验结果表明,40%福星(氟硅唑)乳油9000倍液防效明显好于其他药剂,防效在95%以上;10%苯醚甲环唑水分散粒剂6000倍液、30%己唑醇悬浮剂7500倍液、25%戊唑醇水乳剂2500倍液和40%腈菌唑悬浮剂9000倍液防效为88%～92%,并且田间表现出对梨黑斑病有一定的控制作用;50%苯菌灵可湿性粉剂800倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂800倍液和50%多菌灵可湿性粉剂600倍液防效稍低。生产上建议在果树萌芽期彻底清除病芽梢,于花后10天开始施药,各药剂交替使用。

辽西地区苹果黑点病发生调查

2011年对辽西地区苹果黑点病的发生情况进行了调查,结果显示,辽西地区苹果黑点病总体发病较重,品种间发病存在差异,珊夏、富士、金冠品种发病重;药剂的选择和果袋质量是苹果黑点病发生的关键。田间病果分离结果表明,辽西地区苹果黑点病主要是由粉红聚端孢霉引起的真菌病害,6月连阴雨的气象因素是造成该病流行发生的主要因素。根据调查结果和影响病害发生的各种因素,我们提出套袋前将治疗性和保护性杀菌剂混用来控制苹果黑点病发生的防治措施。