盐酸川芎嗪对小鼠Lewis肺癌细胞转移及上皮-间质转化的影响

目的:探讨盐酸川芎嗪对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭黏附能力及上皮-间质转化的影响及其作用机制。方法:对绿色荧光蛋白(GFP)标记的小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC-GFP)进行体外培养,经盐酸川芎嗪干预24 h后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞黏附实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、黏附能力的改变,流式细胞技术、Western Blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)与N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化。结果:与对照组比较,盐酸川芎嗪呈剂量依赖性抑制LLC-GFP细胞的增殖;Transwell实验显示,与对照组比较,用药组细胞的侵袭能力呈剂量依赖性下降(P<0.01);细胞黏附实验显示,与对照组黏附抑制率(14.01±1.36)%比较,应用盐酸川芎嗪需药物浓度达到2,000μg/m L时才可显著增高黏附抑制率(P<0.01);流式细胞技术及Western blot实验结果显示,与对照组比较,盐酸川芎嗪可下调N-cadherin蛋白,并上调E-cadherin蛋白的表达(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:盐酸川芎嗪可显著地抑制LLC-GFP细胞的生长,抑制侵袭和黏附,其机制可能与直接抑制肿瘤细胞侵袭,抑制相关黏附蛋白N-cadherin,促进黏附分子E-cadherin蛋白表达有关。

从“肾络瘀损”探讨高血压肾损害的中医病机与治疗

高血压是影响人类健康的主要疾病之一,而肾脏是高血压损害的主要靶器官之一,长期高血压可引起肾脏小动脉硬化,并逐渐进展为慢性肾衰竭。研究显示：在过去十余年中,美国的终末期肾病（end-stage renal disease,ESRD）以约每年9%的速度增长;在其病因中,高血压引起的ESRD占29%,位居第二,仅次于糖尿病肾病[1]。

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ及肾功能的影响

目的观察降压通络方对自发性高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)及肾功能的影响,探讨该方对高血压肾损害大鼠肾脏的保护机制。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertension Rat,SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方高、中、低剂量组、并设正常血压大鼠(Wistar Kyoto,WKY)为空白对照,分别灌胃给药。于给药后4周和8周分别测定大鼠尾动脉压力、血肌酐、尿素氮及肾脏Ang II蛋白含量,并进行大鼠肾脏病理组织学检查。结果给药4、8周后,与模型组比较,各治疗组大鼠血压、肾脏Ang II含量明显降低(P<0.01,P<0.05),但给药4周各组之间比较无统计学意义,给药8周缬沙坦及降压通络方高、中剂量组均明显低于低剂量组(P<0.05);缬沙坦及降压通络方能显著降低模型组大鼠血肌酐、尿素氮(P<0.01,P<0.05),改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方能降低高血压肾损伤大鼠肾脏Ang II含量,从而有效降低大鼠血压,改善肾脏病理损害,保护肾功能。

侯雁治疗痛经的临床经验总结

痛经是常见的妇科疾病之一,以月经期及其前后小腹部、腰骶部疼痛,伴恶心、呕吐、腹泻,严重者出现晕厥为主要表现,分原发性痛经和继发性痛经。随着社会节奏加快,竞争压力加大,情绪负担过重,加上恣食生冷、饮食无节,痛经的发病率居高不下,是困扰女性健康的常见问题。痛经为常见妇科疾病,分为原发性痛经和继发性痛经,侯雁主任从临床实践出发,总结出行之有效的治疗经验。痛经病因与胞络受阻、血行不畅有关,寒凝血瘀引起的痛经占绝大多数,治疗首选少腹逐瘀汤、温经汤等;热性痛经临床亦不可忽视,治疗以芩连四物汤、桃红四物汤、大黄黄连泻心汤为主。对于继发性痛经,应归于癥瘕致病的范畴,非经期治疗以理冲汤祛瘀消癥,经期合用少腹逐瘀汤、温经汤等。另外,临证中也要跳出专病专治的思维局限,全面捕捉四诊信息,重视“肺为水之上源”在痛经发病中的重要作用。针灸、刺络放血等疗法作为补充手段,可迅速缓解痛经急性发作。

丹参酮ⅡA磺酸钠联合顺铂对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白表达的影响

目的探讨活血化瘀药丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)联合顺铂(DDP)对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法运用CCK8法摸索STS不同浓度对肿瘤细胞的抑制率影响;Western-blot检测E-cadherin蛋白的表达水平;Transwell小室侵袭转移实验检测各组细胞转移数量。结果浓度为0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL的STS与空白对照组比较,细胞的抑制率明显升高且呈浓度依赖性(P<0.05);STS联合DDP处理后,肺癌细胞侵袭能力和黏附能力明显减弱(P<0.05);药物处理后E-cadherin蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论活血化瘀药STS联合DDP能调节小鼠lewis肺癌细胞E-cadherin表达并抑制其侵袭转移,在肺癌转移过程中具有重要作用。

外泌体与肿瘤免疫微环境的研究进展

外泌体最早被认为是细胞排出无功能废物的“垃圾袋”[1],近年来的研究表明外泌体在参与调控细胞重要生理功能、调节机体免疫应答、参与细胞凋亡及肿瘤的发生发展过程中均发挥着重要的作用[2]。外泌体存在于各种体液中,并且能参与广泛的免疫反应,在肿瘤微环境的发展、演变过程中也发挥着不可替代的作用。

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏及血浆ADM的影响

目的:观察降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏及血浆肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)表达的影响,探讨降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏的保护机制。方法:将16周龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertension rat,SHR)随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方组,同时设16周龄正常血压大鼠(wistar kyoto,WKY)为正常对照组。缬沙坦组、降压通络方组分别给予缬沙坦、降压通络方灌胃干预,模型组及正常对照组大鼠给予等容积的生理盐水灌胃,连续8周。分别于给药前、给药4周、给药8周末测定大鼠血压;给药4周、8周末,检测血肌酐、尿素氮及肾脏、血浆ADM的含量。结果:给药4周、8周后,降压通络方组、缬沙坦组大鼠血压、肌酐、尿素氮均低于模型组(P<0.05或P<0.01);而大鼠肾脏ADM含量高于模型组(P<0.05或P<0.01);给药4周后,模型组及降压通络方组、缬沙坦组大鼠血浆ADM明显高于正常对照组,8周后模型及降压通络方组、缬沙坦组血浆ADM低于正常对照组,但两个时间点模型组与降压通络方组、缬沙坦组之间比较,差异无统计学意义。结论:降压通络方可降低高血压肾损害大鼠血压,保护肾功能,可能机制为上调肾脏局部ADM的表达。

中药标准品对人肺癌耐药细胞A549/DDP的逆转效果研究

目的:研究中药标准品对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的逆转效果。方法:通过细胞增殖实验研究耐药细胞株(A549/DDP)的耐药倍数和对所选中药标准品的耐受情况。回归分析计算中药标准品对A549/DDP的IC5作为其逆转耐药的工作浓度。研究中药标准品在工作浓度下对A549/DDP耐顺铂的逆转效果。结果:A549/DDP的耐药指数为31.79。A549/DDP对川芎嗪、苦参碱耐受良好。盐酸小檗碱、北豆根碱(蝙蝠葛碱)和冬凌草甲素对A549/DDP细胞增殖均有一定的抑制作用,且存在明显的量效关系,工作浓度时,均能逆转A549/DDP对顺铂的耐受性(P<0.01)。结论:所选的中药标准品能有效逆转A549/DDP对顺铂的耐药性。

中药穴位贴敷治疗化疗相关性呕吐的组方规律分析

目的挖掘中药穴位贴敷治疗恶性肿瘤化疗后恶心呕吐的组方用药规律,发现新处方。方法检索中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库、万方医学网、维普中文期刊数据库中2020年5月31日前收录的相关临床研究文献,提取文献中的方剂到Excel 2010建立处方数据库,录入中医传承辅助平台(V2.5)软件中,运用该系统集成的数据挖掘技术对录入的方药进行数据分析。结果共纳入文献174篇,涉及处方176首,中药94味。组方以性温热、味辛苦、脾胃肺经的药物为主,使用频次前5位依次是半夏、生姜、吴茱萸、丁香、党参;得出常用药物组合34个,核心组合18个,演化出新方9首。结论中药穴位贴敷治疗化疗后呕吐以温中化痰、健脾补虚、和胃降逆为法,常用化痰、止呕、温里、补虚药辩证配合理气、清热、祛湿药,其组方规律及挖掘出的新方可为临床治疗提供参考。

川芎对恶性肿瘤侵袭与转移影响研究进展

血瘀证是恶性肿瘤常见证型,而中药川芎具有活血化瘀、消炎镇痛、益气补血等功用,应用川芎抗肿瘤及防治肿瘤转移和复发的研究近年来取得了较大的进展。本文从抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,抑制癌基因的表达,改善血液高凝状态,抗肿瘤血管生成、改善乏氧微环境,影响肿瘤细胞侵袭、迁移及黏附能力,增强免疫监视和免疫调控、化疗药物增效减毒等方面概述了川芎防治恶性肿瘤转移的作用机制。目前川芎对肿瘤生长及转移的作用及对肿瘤治疗效果及机制的研究仍需更多的临床及实验依据,需进一步认识血瘀证的本质及川芎的作用机理和靶点,同时活血化瘀中药抗肿瘤及转移的研究还存在思路及方法上的问题。今后应进一步拓宽研究范围,提高研究深度,运用更科学的方法和更规范的研究,使活血化瘀中药抗肿瘤机制得到更全面的揭示。

盐酸川芎嗪联合顺铂对Lewis肺癌细胞侵袭转移能力的影响

目的:探讨盐酸川芎嗪联合顺铂(TMP+DDP)对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭转移的影响及可能的分子机制。方法:体外培养绿色荧光蛋白(GFP)标记的小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC-GFP),盐酸川芎嗪和顺铂处理后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞黏附实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、黏附能力的改变,Western Blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达变化。结果:与对照组相比,盐酸川芎嗪呈剂量依赖性抑制小鼠Lewis肺癌细胞的增殖;Transwell实验、细胞黏附实验显示,盐酸川芎嗪联合顺铂作用细胞24h后,与对照组相比,细胞的侵袭、黏附能力均有不同程度的下降,其抑制率呈剂量效应(P<0.01);Western Blot实验表明,盐酸川芎嗪联合顺铂作用细胞24h后,与对照组相比,LLC-GFP细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。结论:盐酸川芎嗪联合顺铂可显著地抑制LLC-GFP细胞的生长、侵袭、黏附能力,其机制可能与其能上调E-cadherin蛋白表达水平相关。

胃瘫外敷方穴位贴敷治疗消化系统肿瘤患者术后胃瘫的多中心临床研究

目的探讨胃瘫外敷方治疗消化系统肿瘤患者术后胃瘫（寒证）患者的疗效。方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照临床试验，以优效性设计，收集北京4家三级甲等医院确诊的消化系统肿瘤术后胃瘫、且腹部症状中医局部辨证为寒证的患者入组。区组随机化将患者按1∶1比例分组，在常规治疗（营养支持、胃肠减压、促胃动力药）的基础上，治疗组和对照组患者分别给予胃瘫外敷方或安慰剂穴位（中脘、神阙穴）贴敷，治疗14 d或达到有效标准。结果2013年7月15日至2015年6月3日，共招募患者128例，最终120例患者入组进入全分析集（FAS），其中治疗组60例，对照组60例。88例患者进入符合方案数据分析集（PPS），其中治疗组45例，对照组43例。FAS中治疗组患者的临床有效率为68.3%，明显优于对照组（41.7%，P=0.003）。治疗组达到治疗有效所需的中位时间为8 d，明显短于对照组（10 d，P=0.017）。FAS中治疗组有3例患者出现不良事件，发生率为5.0%（3/60），分别为轻中度脱皮、瘙痒、恶心，停药后自行缓解；对照组患者未出现不良反应，两组差异无统计学意义（P=0.244）。结论胃瘫外敷方是消化系统肿瘤术后胃瘫（寒证）患者的一种新的治疗选择。临床试验注册英国国际标准随机对照试验号注册库，ISRCTN18291857。

通脉益肾方拮抗肾间质纤维化的作用机制

目的观察通脉益肾方对肾间质纤维化模型大鼠肾脏肾上腺髓质素及肾小管上皮细胞表型转化的影响,探讨其拮抗肾间质纤维化的作用机理。方法采用单侧输尿管结扎的方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为假手术组、模型组、通脉益肾方组和缬沙坦组。通脉益肾方组、缬沙坦组分别给予通脉益肾方1.5 g/(kg.g)和缬沙坦10 mg/(kg.d)灌胃治疗,假手术组及模型组给予等量的生理盐水。观察梗阻侧肾脏肾上腺髓质素(ADM)、肾小管上皮细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达,做相关性分析;采用HE及天狼星红染色观察各组大鼠肾脏的病理改变。结果模型组及各治疗组大鼠肾脏中ADM蛋白表达较假手术组明显降低(P<0.05),通脉益肾方组、缬沙坦组的ADM的蛋白含量及表达均高于模型组(P<0.05),但两治疗组之间无显著性差异。模型及各治疗组α-SMA的蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.05),通脉益肾方组、缬沙坦组的表达均低于模型组(P<0.05),但两治疗组之间无显著性差异。ADM与α-SMA的表达呈明显负相关。结论通脉益肾方可能通过上调间质纤维化大鼠肾脏ADM的表达、抑制肾小管上皮细胞的表型转化起到拮抗肾间质纤维化的作用。

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾上腺髓质素表达的影响

目的观察降压通络方对高血压病肾损害大鼠肾脏肾上腺髓质素(ADM)表达的影响,探讨其对高血压肾损伤大鼠肾脏的保护作用。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方组、并设正常血压大鼠(WKY)为空白对照。降压通络方组、缬沙坦组分别给予降压通络方14.2 g/(kg·d)和缬沙坦10 mg/(kg·d)灌胃治疗,模型组及正常对照组给予等量的生理盐水。观察各组大鼠在给药前、给药2周、4周、8周后血压的变化,测定大鼠24 h尿蛋白定量,同时观察肾功能及肾脏病理组织学改变,检测大鼠肾脏中ADM的蛋白含量,并与大鼠的血压进行相关性分析。结果模型组及各治疗组大鼠血压、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)较正常对照组明显升高,降压通络方组、缬沙坦组均明显低于模型组(P<0.01),但2个治疗组之间比较无显著性差异;模型及各治疗组大鼠肾脏ADM蛋白含量较正常对照组明显降低(P<0.01),与模型组比较,降压通络方及缬沙坦组大鼠肾脏ADM蛋白含量明显升高(P<0.01),并与大鼠的血压呈明显负相关(γ=-0.740,P<0.001),但2个治疗组之间比较无明显差异。HE染色显示降压通络方能显著改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方通过上调高血压肾损害大鼠肾脏ADM的表达,扩张肾脏局部小血管,改善肾脏缺血,在保护肾脏功能方面起到重要作用。

肌成纤维细胞转化在恶性肿瘤转移过程中的作用

肿瘤转移过程是一个多因素调控、多步骤协同的交互过程。肿瘤微环境中肌成纤维细胞转化是促进肿瘤及转移发生的重要病理过程,这一过程可以通过以下作用实现:(1)构成适合肿瘤细胞生长的代谢体系;(2)提供立体生长形态支架;(3)促进肿瘤细胞上皮间质转化;(4)分泌血管内皮生长因子,促进微循环形成;(5)形成鞘状结构保护肿瘤细胞免受药物及免疫细胞伤害;(6)分泌生长因子和细胞炎性因子,促使纤维细胞和成纤维细胞发生肌成纤维细胞转化。而以上作用很可能是化痰类和活血化瘀类中药抗癌、抗转移的核心作用机制。

盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞黏附能力的影响

[目的]探讨盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭黏附能力的影响及其作用机制。[方法]小鼠Lewis肺癌细胞体外培养,细胞黏附侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,Western Blot检测各组细胞Twist、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的变化。[结果]经DDP与TMP干预36h后,与对照组相比,用药组细胞的侵袭能力呈剂量依赖性下降,且DDP联合TMP组与单独使用DDP组相比,抑制细胞侵袭的能力更为显著（P〈0.05,P〈0.01）。细胞黏附实验显示,与对照组（23.76±1.64）相比,单独应用顺铂（47.40±0.85）可显著性增高细胞黏附抑制率（P〈0.01）,而单独应用TMP需药物浓度达到2000μg/ml时才可显著性增高黏附抑制率（P〈0.01）,两药联合组黏附抑制率均高于单独使用DDP组,尤以高剂量组抑制率最为显著（P〈0.01）。与单独用药相比,DDP＋TMP可降低Twist、N-cadherin蛋白,并上调E-cadherin蛋白的表达（P〈0.01）。[结论]盐酸川芎嗪联合顺铂能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的侵袭和转移,其机制可能与直接抑制肿瘤细胞侵袭,抑制相关基因蛋白Twist及N-cadherin,促进黏附分子E-cadherin蛋白表达有关。