不同生物活性基团修饰的纳米磁珠在核酸提取中的效能比较

目的评价不同生物活性基团修饰的纳米磁珠核酸提取效能,为临床应用及结果评价提供一些依据。方法通过不同生物活性基团修饰的纳米磁珠对检测乙型肝炎病毒的标本进行核酸提取,采用微量分光光度计(NanoDrop One~c)检测核酸的浓度及纯度,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测样本的CT值。结果在几种纳米磁珠提取法中,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸浓度及纯度最高(浓度平均为953.3 IU/mL),其次是二氧化硅磁性微球与羧基微球混合纳米磁珠及纳米磁性氧化物MnFe_(2)O_(4)提取法。羟基修饰二氧化硅颗粒以及壳聚糖包覆的磁珠提取的核酸浓度较高,但纯度较差(A260/280及A260/230比值均超出标准范围)。对于同一样本,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸扩增CT值为(21.28±0.36),核酸提取效率明显高于离心柱提取法,且具有统计学意义。二氧化硅磁性微球和羧基微球混合纳米磁珠、羟基修饰二氧化硅纳米磁珠及壳聚糖包覆的纳米磁珠核酸提取效率均低于离心柱提取法。此外,超顺磁性羧基纳米微粒的提取时间可缩短至15分钟。结论超顺磁性羧基纳米微粒核酸提取效率、精密度及核酸产物纯度最高,有较大的临床应用价值。

咳嗽变异性哮喘患者气道病理与临床的相关性研究

目的:探讨咳嗽变异性哮喘(CVA)与典型哮喘的内在联系。方法:选择18例咳嗽变异型哮喘及17例典型哮喘患者,并设对照组20例,观察肺功能一秒钟用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)与基底膜厚度的关系。结果:与对照组比较,CVA组FEV1%呈下降趋势,典型哮喘组FEV1%明显降低,且差异均有统计学意义(P<0.05),典型哮喘组与CVA组比较亦有下降趋势。CVA组及典型哮喘组基底膜厚度均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),典型哮喘组又显著高于CVA组(P<0.05)。基底膜厚度与FEV1%呈明显负相关(r=-0.738,P<0.05),而与PC20无明显相关关系(P>0.05)。结论:基底膜增厚是咳嗽变异性哮喘的重要特征,咳嗽变异性哮喘可能是哮喘的一种早期特殊表现。

慢性阻塞性肺疾病患者ADAM33基因单核苷酸多态性的研究

目的检测ADAM33基因S2位点多态性在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的分布频率,探讨S2位点单核苷酸多态性与COPD的相关性,寻找COPD发病的易感基因,为COPD高危人群的筛选、早期预防和临床治疗提供理论依据。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)技术及DNA测序的方法,对112例COPD患者(COPD组)及105例健康人(对照组)进行ADAM33基因S2位点单核苷酸多态性分析。结果 ADAM33基因S2位点COPD组和对照组中基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律;ADAM33基因S2位点3种基因型CC、CG、GG在COPD组的分布为54.5%、34.8%、10.7%,在对照组的分布为69.5%、26.7%、3.8%,两组比较P均<0.05。COPD组ADAM33基因S2位点等位基因C和G的频率分别为0.719、0.281;对照组ADAM33基因S2位点等位基因C和G频率分别为0.829、0.171。COPD组与对照组C及G等位基因频率比较P均<0.05。结论 ADAM33基因S2位点存在CC、CG、GG多态性;ADAM33基因S2位点多态性与COPD有明显相关性。

布地奈德降低哮喘小鼠肺中去整合素-金属蛋白酶33表达

去整合素-金属蛋白酶33（a disintegrin and metalloproteinase,ADAM33）与哮喘气道的损伤修复有着密切的关系。布地奈德（budesonide,BUD）是临床治疗哮喘应用较广泛的糖皮质激素,其能否通过干预ADAM33的表达来干预哮喘气道重塑,目前相关的报道较少。本研究观察BUD干预对慢性哮喘小鼠模型中肺组织ADAM33表达水平的影响,探讨其对小鼠哮喘气道重塑的干预作用。

环孢素A对实验大鼠肺纤维化的干预作用

目的研究环孢素A(CsA)对大鼠肺纤维化的干预作用。方法平阳霉素(BLM)气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,观察CsA对支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞成分和转化生长因子-β(TGF-β)的含量、肺组织学变化,应用SABC法检测肺组织中纤维连接蛋白(FN)和血小板衍化生长因子(PDGF)表达的作用。结果应用BLM后第7天即有严重肺泡炎性改变,第28天有严重的肺纤维化,而CsA组,早期只有轻度炎性改变,BALF中细胞计数及TGF-β含量较BLM组低(P<0.05),FN及PDGF表达显著弱于BLM组(P<0.01)。结论CsA可能通过抑制FN、PDGF的表达及TGF-β的生成干预BLM致肺纤维化。

环孢菌素A对大鼠肺纤维化的治疗作用

目的 :研究环孢菌素A(CsA)对肺纤维化的治疗作用。方法 :应用博莱霉素 (BLM )复制大鼠肺纤维化模型 ,观察CsA对支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞成分、肺组织学变化以及应用SABC法检测肺组织中纤维连接蛋白 (FN)和血小板衍化生长因子 (PDGF)表达的作用。结果 :应用博莱霉素后第 7天即有严重肺泡炎性改变 ,晚期有严重的肺纤维化 ,而CsA组 ,早期只有轻度炎性改变 ,BALF中细胞计数较BLM组低 (P <0 .0 0 1) ,FN及PDGF表达显著弱于BLM组 (P <0 .0 1)。结论 :CsA通过抑制FN及PDGF的表达治疗肺纤维化。

糖皮质激素对稳定期COPD患者气道炎症影响的探讨

目的探讨糖皮质激素对稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者气道炎症的影响。方法30例稳定期COPD患者根据舒张试验第1秒用力呼气容积（FEV1）占预计值百分比较用药前提高率（简称FEV1提高率）将COPD患者分为COPDⅠ组（FEV，提高率为0～7％）和COPDⅡ组（FEV，提高率为8％～15％），再以14例中度哮喘患者（哮喘组）作为对照。所有患者均吸入布地奈德治疗4周，治疗前后均测肺通气功能、诱导痰细胞学及嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）、嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ECP）。结果与COPDⅠ组比较，COPDⅡ组、哮喘组治疗前嗜酸粒细胞比例、eotaxin、ECP差异均有统计学意义（P〈0．05），而COPDⅡ组与哮喘组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；治疗后嗜酸粒细胞比例、eotaxin、ECP及FEV1占预计值百分比与治疗前比较，COPDⅡ组和哮喘组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论吸入糖皮质激素对稳定期COPD患者部分有效，可能通过抑制气道嗜酸粒细胞聚集、趋化，减少eotaxin和ECP的分泌和释放，而减轻气道炎症，改善肺功能。

贝那普利和氯沙坦联合阻断肾素—血管紧张素系统对自发性高血压大鼠左心室重构的影响

目的探讨贝那普利和氯沙坦单独与联合治疗对改善及逆转老龄自发性高血压大鼠左心室重构的影响。方法选55周龄Wistar京都大鼠18只,同龄自发性高血压大鼠54只,随机抽取Wistar京都大鼠和自发性高血压大鼠各6只检测,以确定左心室肥厚,其余分为Wistar京都大鼠对照组、自发性高血压大鼠对照组、贝那普利组10 mg/(kg.d)、氯沙坦组30 mg/(kg.d)及贝那普利10 mg/(kg.d)+氯沙坦15 mg/(kg.d)联合用药组。监测动脉收缩压及左心室质量指数,光镜观察心肌组织结构改变,免疫组织化学法测心肌胶原纤维表达,TUNEL末端标记法进行细胞凋亡检测。结果各药物干预组均可降低左心室质量指数(P<0.01),改善心肌组织结构的改变,降低总胶原及Ⅰ型胶原表达(P<0.01),并轻度降低Ⅲ型胶原表达,均以联合用药组更显著(P<0.01);贝那普利组心肌细胞凋亡率显著高于自发性高血压对照组(P<0.01),氯沙坦组及联合用药组心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论贝那普利和氯沙坦联合治疗自发性高血压大鼠对改善和逆转左心室重构优于单剂。

经皮肺穿刺近距离放射治疗肺癌的疗效观察

目的:探讨CT导向下经皮肺穿刺125I粒子近距离放疗对肺癌的近期疗效。方法:对53例肺癌患者在CT导向下经皮肺穿刺,瘤体内植入125I粒子。观察手术前后局部肿瘤大小、血常规、肝肾功能及免疫指标的变化。结果:对62个病灶行81次穿刺,术后1、2、3、6个月原发部位肿瘤治疗有效率分别为33.87%(21/62)、51.61%(32/62)、91.94%(57/62)、95.16%(59/62)。外周血常规、肝肾功能、免疫功能等指标手术前后无明显变化。5例出现气胸(6.17%),9例发生咳血(11.11%)。植入后第6个月2例患者出现粒子丢失。结论:CT导向下经皮肺穿刺125I粒子近距离放疗对肺癌局部控制率高,对血常规、肝肾功能、免疫功能无明显影响,是一种疗效确切、安全简便的肿瘤微创治疗技术。

动员自体骨髓干细胞对大鼠脑缺血/再灌注损伤及细胞凋亡的影响

目的 探讨应用G CSF动员自体骨髓干细胞对大鼠脑缺血 /再灌注损伤及细胞凋亡的影响。 方法 应用线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞 /再灌注 (MCAO/R)模型 ,应用粒细胞集落刺激因子 (G GSF)刺激自体骨髓干细胞分裂增殖 ,并用 5 溴脱氧尿核苷 (Brdu)标记。观察大鼠神经病学评分 ,HE染色和免疫组化检测脑缺血区病理改变及CD34和Brdu阳性细胞 ,原位末端标记法 (TUNEL法 )观察细胞凋亡。 结果 模型动员组大鼠脑缺血 /再灌注后 2 4h ,大量炎症细胞浸润。再灌注后 4 8h ,缺血区可见CD34和Brdu阳性细胞 ;72h后CD34阳性细胞消失 ,而Brdu阳性细胞持续存在 ;模型未动员组缺血区无CD34和很少Brdu阳性细胞表达。 4 8h缺血区新生毛细血管密度明显高于对照组。再灌注后 2 4h细胞凋亡显著 ,1周时达高峰 ;与模型非动员组比较 ,模型动员组 4 8h后细胞凋亡改善明显。结论 自体骨髓干细胞经G CSF动员后可向大鼠脑缺血区趋化并可分化为神经元前体细胞 ,显著促进脑缺血区血管再生 ,降低脑神经功能评分 ,降低细胞凋亡率。

纳米SiO_2对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡诱导作用及其机制

目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90nm的SiO2颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000mg·L-1 SiO2组,其中0mg·L-1组为对照组。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率;采用AO/EB染色和AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期百分比和细胞中活性氧(ROS)水平。结果:MTT检测,6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。AO/EB染色和Annexin V-FITC/PI法检测,6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。FCM检测,3.125、6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞中ROS水平高于对照组(P<0.05)。25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组G0/G1期细胞百分比低于3.125mg·L-1SiO2组和对照组(P<0.05),50.000 mg·L-1 SiO2组G2/M期细胞百分比高于对照组(P<0.05)。结论:纳米SiO2可降低SH-SY5Y细胞的活力,诱导细胞凋亡,增加细胞中ROS水平,可干扰细胞周期进程,对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用。

肺癌患者化疗前后红细胞免疫功能的动态研究

目的:了解肺癌患者化疗前后的红细胞免疫功能?方法:应用郭峰法检测肺癌患者化疗前后的红细胞C3b受体花环(RBC-C3bR)?红细胞免疫复合物花环(RBC-ICR)?肿瘤红细胞花环(ATER)的动态变化?结果:肺癌组RBC-C3bR ?ATER明显低于健康对照组(P<0.001),RBC-ICR明显高于健康对照组(P<0.001),化疗后第7天,RBC-C3bR?RBC-ICR?ATER较未化疗时均明显降低(P<0.05),化疗后第21天,RBC-C3bR?ATER明显高于未化疗组(P<0.05)?结论:肺癌患者红细胞免疫功能低下,化疗对红细胞免疫功能造成一过性损伤,在化疗后第7天明显?

嗜麦芽窄食单胞菌下呼吸道感染的危险因素和药敏观察

近年来,随着抗生素的临床广泛使用,细菌耐药现象日益增加,尤其嗜麦芽窄单胞菌引起的院内感染更为突出.该菌对临床应用的抗生素具有高度耐药性,多重耐药现象严重,临床抗生素选择困难.因此,有必要对其导致下呼吸道感染的危险因素和耐药情况进行分析.

多部位原发癌1例报告

患者男,71岁,因反复咳嗽、咳痰、憋喘18年,加重1周于2001年12月24日入院。给予抗感染、祛痰、平喘等治疗,症状好转,住院期间发现阴囊皮肤改变,在左腹股沟根部见一约2cm×3cm的皮损,呈湿疹样,双侧腹股沟淋巴结未触及肿大,全身体检未见其他皮损,胸片未见异常,阴囊皮损经活检证实为paget's病(乳房外paget's病)。于2002年3月18日,在局麻下行阴囊皮肤癌切除术,术后病理示(外阴)原位癌-派杰氏病,黑色素瘤(HMB-45)阴性。该患者18年前曾行左肺叶切除术,术后病理示“腺癌”,15年前行乙状结肠囊腺瘤切除术,12年前行左腮腺区肿物切除术,冰冻结果示“低度恶性腺样囊性癌”,另外,患者还伴有高血压病(30余年),糖尿病、冠心病(10余年)及前列腺肥大、脑梗死等病史。辅助检查:近2年来,多次检测铁蛋白(SF)均>700.0ng/ml(正常为22～322ng/ml),CD_342％、CD_426％、CD_817％、CD_4/CD_81.52,NK细胞11％;肝功能、生化、

支气管肺泡灌洗对豚鼠支气管粘膜上皮损伤的研究

为观察支气管肺泡灌洗对豚鼠支气管粘膜上皮的影响，以临床所用方法对１２只豚鼠行支气管肺泡灌注，灌毕切下右下肺叶，扫描电镜下对照观察灌洗与未灌洗豚鼠支气管粘膜上皮的变化。结果显示，灌洗后的豚鼠支气管粘膜上皮纤毛完全脱落，上皮细胞肿胀破裂。提示支气管肺泡灌洗可导致支气管粘膜上皮损伤。