艾叶不同组分发挥镇痛作用的安全范围研究

目的明确艾叶发挥镇痛作用的物质基础和剂量范围，确定相应的安全范围，为临床用药提供依据。方法采用热板法进行艾叶水提组分和挥发油小鼠镇痛作用考察，采用经典的急性毒性方法进行小鼠毒性数据考察，并通过Bliss法计算相关指标。结果艾叶水提组分和挥发油发挥镇痛作用的的半数有效量（ED印）分别为2．0978g·kg-1·d-1、0．302mL·kg-1·d-1（折合生药量为39．7g·kg-1·d-1）ED50 95％可信区间为（1．5555-2．7917）g·kg-1·d-1、（0．213～0．429）mL·kg-1·d-1折合生药量为（28．0～56．4）g·kg-1·d-1。艾叶水提组分小鼠镇痛作用的治疗指数（TI）为38．2、安全系数（SF）为10．9，其ED50和LD5分别相当于药典规定的人日用量的46．40和505．60倍。艾叶挥发油的TI为5．53、SF为1．06，其ED50和LD5分别相当于药典规定的人日用量的1086．70和1151．60倍。结论艾叶水提组分和挥发油均是其镇痛物质基础，发挥镇痛作用的剂量范围分别为（1．5555-2．7917）g·kg-1·d-1、（28．0-56．5）g·kg-1·d-1，明确了水提组分较挥发油对小鼠热刺激的反应更灵敏，治疗效果更佳，挥发油较水提组分安全范围较窄、安全性低。

川芎基于功效物质基础的抗脑缺血药理作用研究进展

目的总结川芎治疗缺血性脑血管病有效成分及其药理作用分子机制的研究现状,为对川芎的进一步深入研究提供理论和文献依据。方法对国内近15年来发表的相关文献进行分析、整理和归纳。结果川芎主要活性成分川芎嗪(Tetram ethylpyrazine,TMP)具有扩张血管、抑制血小板聚集、防止血栓形成、改善脑缺血等多种作用,酚类物质阿魏酸(Fumalicacid,FA)具有抗血小板凝集、血栓、清除氧自由基等作用,挥发油对缺血性脑损伤具有一定的保护作用。结论川芎嗪、阿魏酸均有较好的抗缺血性脑血管病作用,其药理作用的分子机制较明确,挥发油对缺血性脑损伤具有一定的保护作用,目前对川芎治疗该病的研究仅限于川芎嗪和阿魏酸单成分和挥发油,由于中药具有多成分、作用复杂的特点,应结合其功效加强川芎有效成分、有效成分群、有效部位、有效部位群之间的药效学研究及其作用机制研究,为阐明川芎抗缺血性脑血管病的作用机理提供理论依据,以便更好地指导临床合理用药和创新药物研发。

大孔吸附树脂分离纯化柴胡总皂苷工艺研究

目的以柴胡皂苷a含量为指标,考察柴胡总皂苷的最佳分离纯化工艺。方法建立柴胡皂苷a的HPLC测定法,色谱柱为ODS-C18柱(150×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(70:30),流速为1mL.min-1,检测波长为210nm。以柴胡皂苷a为指标,比较不同型号大孔树脂对于柴胡总皂苷的分离纯化能力,对吸附流速、洗脱溶剂及用量、洗脱流速进行考察。结果柴胡皂苷a在50～250μg.mL-1的范围内,浓度与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.9991),平均加样回收率为99.22%,RSD=1.07%(n=6)。确定D101大孔树脂为柴胡总皂苷的纯化材料,其最佳工艺条件是吸附流速为1BV.h-1,洗脱溶剂为70%乙醇,用量为5BV,洗脱流速为2BV.h-1。柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a含量可达到3%左右。结论该含量测定方法操作简便、重复性好,可用于测定柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a的含量。D101大孔树脂分离柴胡总皂苷工艺稳定可行,树脂可重复利用,对于柴胡总皂苷的分离精制具有良好的应用前景。

芳香开窍类中药对血脑屏障结构及功能影响的研究进展

目的综述近年来芳香开窍类中药对血脑屏障(BBB)结构及功能的影响,为从中药"芳香开窍"的传统功效中挖掘、筛选、评价和研发创新药物提供文献依据和研究思路。方法对近10年来芳香开窍类中药对血脑屏障结构及功能影响的国内外相关文献进行整理、归纳、分析。结果药理学研究证实芳香开窍类中药主要通过自由透过血脑屏障发挥药效、降低BBB的通透性以保护脑组织以及促进血脑屏障开放三个方面来改变血脑屏障的通透性,另外其作用机制可能与抑制BBB上P-gp的表达和功能有关。结论从P-gp方面加强对芳香开窍类中药作用机制的研究和探索芳香开窍类中药的功效物质基础将是今后研究的重点。

提取方式对艾叶“质量-毒性”综合评价模式的影响

目的对艾叶不同组分中主要成分含量及小鼠急毒大小进行比较研究,探讨不同提取方式对艾叶质量与毒性之间相关性的影响。方法分别制备挥发油、全组分、水提组分、醇提组分样品,运用药典挥发油测定法、UV法与经典的小鼠急毒试验方法,进行艾叶不同组分中主要成分挥发油及黄酮类的含量测定及急性毒性比较研究。结果艾叶中挥发油含量为0.76%,总黄酮含量大小依次为醇提组分>水提组分>全组分;艾叶不同组分对小鼠急性毒性强度为:挥发油>水提组分>醇提组分>全组分,挥发油与水提组分LD50按含生药量计算分别为1.673 mL·kg-1、80.228 g·kg-1,95%可信区间分别为1.5538～1.7954mL·kg-1、77.407～83.405 g·kg-1;醇提组分最大耐受量MTD为75.6 g·kg-1,相当于临床70 kg的成人每公斤体重日用量的588.0倍;艾叶全组分最大给药量MLD为24.0 g·kg-1,相当于临床70 kg的成人每公斤体重日用剂量的186.7倍。结论艾叶挥发油对小鼠可产生明显的急性毒性反应,是其毒性物质基础之一,不同组分中总黄酮含量存在显著性差异,但通过实验未发现其与小鼠急性毒性具有相关性,总黄酮是否会产生肝毒性尚需要进一步的研究确证。另外,除挥发油外艾叶毒性物质还包括一些水溶性及醇溶性成分,尚需进一步考察。

活血通络搽剂微生物限度检查方法的建立

目的：建立活血通络搽剂微生物限度的检查方法 ,保证该方法准确可靠。方法：采用金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数方法验证;采用金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌进行控制菌检查方法验证。结果：采用常规法、培养基稀释法时金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的回收率均低于0.5,采用薄膜过滤法时回收率均达到0.5-2.0;控制菌检查时采用常规法可检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。结论：活血通络搽剂微生物限度检查时,需采用薄膜过滤法进行需氧菌总数检查,采用常规法进行霉菌和酵母菌总数检查及控制菌检查。

艾叶不同组分对小鼠急性毒性实验比较研究

目的比较艾叶不同组分对小鼠急性毒性的影响。方法制备艾叶水提组分、挥发油、醇提组分和全组分,采用经典的急性毒性实验方法进行艾叶不同组分小鼠急性毒性比较研究。结果艾叶水提组分、挥发油半数致死量(LD5)0与95%可信限分别为80.2g·kg-1·d-1(77.4～83.4g·kg-1·d-1)、1.67mL·kg-1·d-(11.55～1.80mL·kg-1·d-1)。醇提组分最大耐受量(MTD)为75.6g·kg-1·d-1,全组分最大给药量(MLD)为24.0g·kg-1·d-1,分别相当于临床70kg的成人每公斤体重日用量的588.0倍、186.7倍。主要的急性毒性症状谱为怠动、恶心、抽搐、四肢麻痹、俯卧不动。结论艾叶不同组分对小鼠急性毒性强度为:挥发油>水提组分>醇提组分>全组分,但各组分毒性物质基础、体内毒性过程、毒性作用特点、毒性作用机制尚不完全明确,有待于进一步研究。

艾叶不同组分对小鼠镇痛及伴随毒副作用研究

目的明确艾叶发挥镇痛作用的物质基础、有效剂量范围、时间范围及产生伴随毒副作用的剂量和时间点,锁定毒性靶器官,为临床安全用药提供实验数据。方法采用热板法、扭体法,考察艾叶挥发油、水提组分高、中、低剂量组小鼠在1、3、7天的镇痛作用。通过一般症状观察、肝/体比值、肾/体比值分析、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平检测来考察其伴随的毒副作用。结果艾叶挥发油、水提组分不同剂量组在给药后1、3、7天,均可提高小鼠热板痛阈,延长扭体潜伏期,减少扭体次数,其镇痛效果呈现一定的时间和剂量依赖关系,与空白对照组比较呈现不同程度的显著性差异,且水提组分镇痛效果优于挥发油。血生化指标检测显示,艾叶水提组分和挥发油各剂量组对小鼠血ALT、AST、Cr、BUN水平和肝体比值、肾体比值均有不同程度地升高作用,其升高程度呈现一定的时间和剂量依赖关系,与空白对照组比较呈现不同程度的显著性差异,且挥发油毒副作用强于水提组分。结论艾叶挥发油、水提组分在给药1、3、7天中均有较好的镇痛作用,其镇痛有效剂量范围分别为(34.5 g.kg-1-138 g.kg-1)、(1.17 g.kg-1-4.68 g.kg-1),且呈现一定的依赖剂量和时间的量效和时效变化,按折合生药量计算,镇痛作用强度上水提组分强于挥发油;其伴随毒副作用表现主要为肝功、肾功和脏体比值,其中以肝脏的毒副作用为甚,挥发油、水提组分产生肝脏毒副作用的剂量范围分别为(34.5 g.kg-1-138 g.kg-1)、(2.34 g.kg-1-4.68 g.kg-1),且呈现一定的依赖剂量和时间的量毒和时毒变化;肾脏毒副作用的剂量范围分别为(69.0 g.kg-1-138g.kg-1)、(2.34 g.kg-1-4.68 g.kg-1)且呈现一定的依赖剂量和时间的量毒和时毒变化;目前药典推荐人日用量3-9g,按相当于人日用量9g时的动物折算剂量在给药7天就出现了肝脏、肾脏毒副作用,更应引起临床应用的注意。

益肾乌发口服液中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量测定

目的建立益肾乌发口服液中2,3,5,4′四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚含量的测定方法,从指标成分角度来探讨益肾乌发口服液毒性与何首乌的关系,并为益肾乌发口服液的质量控制提供方法。方法采用HPLC法,C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;测定二苯乙烯苷的流动相为乙腈-水（25：75）,检测波长为320nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温：25℃;测定大黄素大黄素甲醚的流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（80：20）,检测波长为254nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温：25℃。结果二苯乙烯苷在0.1μg～10μg、大黄素在0.0168μg～1.68 g、大黄素甲醚在0.0208~1.04μ g范围内呈良好的线性关系,r分别为0.9989（n=8）、0.9984（n=8）、0.9966（n=8）;平均回收率：二苯乙烯苷为99.33%,大黄素为99.998%,大黄素甲醚为99.576%;RSD：二苯乙烯苷为0.68%,大黄素为1.11%,大黄素为1.29%。结论高效液相色谱法测定益肾乌发口服液中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量方法操作简单、灵敏度高、干扰少、重现性好、回收率高,可用于益肾乌发口服液的含量测定。初步证实益肾乌发口服液的毒性可能与君药制何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量有关,应控制其剂量范围,避免不良反应的发生。

基于物质基础和抗脑缺血作用的芎汤加味方提取工艺研究

目的在小鼠全脑缺血再灌注损伤模型的基础上,根据芎汤加味方所含物质基础研究进展,进行其提取工艺研究。方法结合文献进行芎汤加味方6个制备工艺的研究,测定各工艺提取物中有效成分的含量,并观察各个提取物对小鼠全脑缺血再灌注损伤模型的保护作用。通过物质基础的含量测定和抗脑血活性的比较,筛选最有效的提取工艺。结果通过挥发油、核桃油、阿魏酸提取率指标进行综合评价,工艺5提取物的有效成分保留相对全面,对小鼠全脑缺血和缺氧损伤程度的改善作用最强。结论采用"质量-药效"综合评价模式可保障中药复方的有效性。初步确定了工艺5为芎汤加味方的最佳提取工艺,其具体优化参数有待于进一步研究。

香加皮不同组分多次给药对小鼠肝毒性损伤作用研究

目的比较香加皮水提组分和醇提组分多次给药对小鼠肝毒性损伤的作用程度。方法给小鼠灌胃香加皮水提和醇提组分,每天1次,连续灌胃7天,按等生药量算,香加皮水提组分高、中、低剂量组分别为15.0,3.12,0.78 g.kg-1,醇提组分高、中、低剂量组分别为6.0,3.12,0.78 g.kg-1;观察小鼠一般状况,7天后检测肝毒性相关指标,检测血浆清蛋白(ALB)、血清碱性磷酸酶(ALP)、胆红素(TBIL)水平和肝组织病理检查。结果香加皮不同组分可导致血和肝内丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性增高,肝脏重量和肝体比值增大,血清碱性磷酸酶(ALP)、胆红素(TBIL)水平增加,血浆清蛋白(ALB)降低;肝组织病理可见肝细胞可见水肿、脂肪变性、灶性坏死、片状坏死;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,呈现一定的剂量依赖性。肝毒性作用程度醇提组分>水提组分。结论较高剂量多次给予香加皮水提组分或醇提组分均可致小鼠明显的肝毒性损伤,即可致肝功能指标的改变,又可致肝细胞器质性病变。

提取方式对香加皮“质量-毒性”综合评价模式的影响

目的对香加皮不同组分中4-甲氧基水杨醛的含量及小鼠急性毒性大小进行比较研究,探讨不同提取方式对香加皮质量与毒性之间相关性的影响。方法分别制备香加皮全组分、水提组分与全组分样品,运用HPLC法与经典的小鼠急毒实验方法,进行香加皮不同组分中主要成分4-甲氧基水杨醛的含量测定及急性毒性比较研究。结果 4-甲氧基水杨醛的含量大小依次为香加皮全组分>醇提组分>水提组分;香加皮不同组分对小鼠急性毒性强度为:醇提组分>水提组分>全组分,全组分MTD值为16.0 g·kg-1·d-1,水提组分与醇提组分LD50按含生药量计算分别为93.578 g·kg-1·d-1和61.388 g·kg-1·d-1。结论不同组分中4-甲氧基水杨醛含量与小鼠急性毒性大小均存在显著性差异,全组分4-甲氧基水杨醛含量最高,醇提组分急性毒性最大,4-甲氧基水杨醛是否为香加皮的毒性物质基础之一尚需进一步研究确证。

芳香开窍药对血-脑脊液屏障及P-糖蛋白影响的研究概述

对近16年来芳香开窍药对血-脑脊液屏障(BBB)及P-糖蛋白(P-gp)表达和功能影响的国内外相关研究文献进行概述。药理学研究证实芳香开窍药可以改变BBB的通透性,发挥P-gp逆转作用,与P-gp的表达和功能密切相关。参考文献20篇。

黄连解毒汤调节糖脂代谢的药效学研究

目的:观察黄连解毒汤(HLJDT)对2型糖尿病大鼠血糖、血脂代谢的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射造成2型糖尿病大鼠模型,造模成功后分HLJDT高、中、低剂量组及二甲双胍组灌胃治疗。治疗56 d后,观察HLJDT各剂量组对模型大鼠血糖指标空腹血糖(FBG)、胰岛素(Ins),血脂指标总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)代谢的影响。结果:黄连解毒汤不仅可以降低糖尿病模型大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量,而且可以提高血清Ins、HDL-C含量。结论:黄连解毒汤能够有效调节糖尿病大鼠的血糖、血脂水平。

早期ADMET筛选技术在中药创新药物发现中的应用

目的:总结早期ADMET筛选技术及其在中药创新药物发现中的作用,为提高中药创新药物研发的成功率提供文献依据和研究思路。方法:对近15年来国内外发表的相关文献进行分析、整理和归纳。结果:早期ADMET筛选技术主要用于中药候选药物的体外评估,即可显著提高中药新药研发成功率,又可预测其毒性作用。结论:随着计算机和LC/MS及LC/MS/MS等现代分析技术在ADMET筛选技术中的应用,中药的ADMET分析系统的建立必将成为研究热点。

芎汤加味方的提取工艺优选研究及药效学评价

目的优选芎汤加味方的处方工艺,通过药效学试验和急性毒性试验进行药效剂量筛选和初步安全性评价。方法采用正交试验法对挥发油、核桃油提取工艺与非挥发性成分的乙醇回流提取工艺条件进行筛选,单因素试验法对提挥发油后水提液醇沉试验的乙醇浓度考察;采用大鼠局灶脑缺血模型筛选提取方法改良后药物的剂量,并采用小鼠急性毒性试验法对药物安全性进行初步考察。结果芎汤加味方最佳提取工艺为:川芎、当归粉碎过10目筛,加10倍量水浸泡4 h,水蒸气蒸馏提取6 h,滤液浓缩备用,药渣保留;将150℃条件下加热1.5 h灭酶后的核桃仁粉碎至粗粉,加入4倍量石油醚,浸泡提取4次,每次40 min,药渣保留;对川芎、当归提油后药渣合并核桃仁药渣用10倍量70%乙醇提取3次,每次1 h。药物对大鼠局灶性脑缺血的有效剂量为3.78 g·kg-1,折算成临床70 kg的成人每日用量为42 g。小鼠最大给药量(MLD)为120.96 g·kg-1,相当于临床70 kg的成人每公斤体质量日用量的201.6倍。结论该优选提取工艺稳定可行,适用于芎汤加味方的提取。芎汤加味方对局灶脑缺血有保护作用,且安全、低毒。