葛根素通过上调Wnt/β-catenin信号通路改善化疗诱导的雌性生殖干细胞的氧化应激损伤和凋亡

目的:探讨葛根素(PUE)对化疗诱导的雌性生殖干细胞(FGSCs)氧化应激损伤和凋亡的影响及相关机制。方法:分离并鉴定乳鼠卵巢表层上皮的原代FGSCs,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测PUE对FGSCs增殖活力的影响。将FGSCs分为对照组(Control)、白消安(BU)组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组;采用CCK-8法检测各组FGSCs的增殖活性;采用2,7-二氯荧光素法与试剂盒检测各组FGSCs中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶2(SOD2)活性;采用线粒体膜电位检测JC-1染色法检测各组FGSCs中线粒体膜电位水平;采用细胞凋亡检测试剂盒检测各组FGSCs的凋亡率;采用蛋白质印迹法检测各组FGSCs中生殖干性相关蛋白小鼠Vasa同源体(Mvh)、八聚体结合转录因子4(Oct4)及Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白和凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)的表达水平。结果:成功分离了符合条件的FGSCs,且PUE能促进细胞的增殖活力。与Control组相比,BU组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力,线粒体膜电位,细胞中GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与BU组相比,BU+PUE组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力,线粒体膜电位,GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平却明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),BU+PUE+DKK-1组与BU组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PUE可通过Wnt/β-catenin途径减轻BU诱导的氧化应激损伤和细胞凋亡,并恢复FGSCs的增殖活性及干性。

重组α-Klotho蛋白对环磷酰胺诱导的卵巢早衰小鼠卵巢功能的保护作用

目的探究重组α-Klotho蛋白对化疗药物环磷酰胺(CTX)诱导的卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的保护作用。方法将55只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组,n=10)、CTX诱导的卵巢早衰组(POF组,n=15)、重组α-Klotho蛋白治疗组(POF+α-Klotho组,n=15)和雌二醇治疗组(POF+Estradiol组,n=15),其中POF+Estradiol组为阳性对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清中卵巢激素[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和孕酮(P)]浓度;取小鼠新鲜卵巢组织,采用试剂盒检测卵巢组织中氧化应激因子活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)的表达水平;采用Western blot法检测卵巢组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3与氧化应激信号通路Nrf2/HO-1中Keap1、Nrf2和HO-1的蛋白表达水平。结果与Control组相比,POF组、POF+α-Klotho组和POF+Estradiol组卵巢组织中ROS、MDA水平和Bax、caspase-3、Keap1蛋白表达水平升高(P<0.05);SOD、CAT水平和Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05);血清中FSH、LH的表达水平升高(P<0.05),E2、P的表达水平降低(P<0.05)。与POF组相比,POF+α-Klotho组和POF+Estradiol组小鼠卵巢组织中ROS、MDA水平和Bax、caspase-3、Keap1蛋白表达水平降低(P<0.05);SOD、CAT水平和Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05);血清中FSH、LH的表达水平降低(P<0.05),E2、P的表达水平升高(P<0.05)。结论重组α-Klotho蛋白可能通过抑制氧化应激水平和颗粒细胞凋亡来保护CTX诱导的POF小鼠的卵巢功能,这可能与Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。

观察屈螺酮炔雌醇联合宫腔镜治疗子宫内膜息肉的疗效

目的:观察在子宫内膜息肉治疗中采取屈螺酮炔雌醇联合宫腔镜治疗的临床疗效。方法:将我院2015.3-2018.1接纳的门诊病例300例纳入研究,经随机数字法分组,单纯宫腔镜术组与联药治疗组各150例,单纯宫腔镜术组给予宫腔镜手术治疗,联药治疗组在宫腔镜手术后给予屈螺酮炔雌醇治疗,对比临床疗效。结果:联药治疗组临床有效率较单纯宫腔镜术组更高(P<0.05),两组不良反应发生情况无显著差异(P>0.05),复发情况观察中联药治疗组复发率显著更低(P<0.05)。结论:屈螺酮炔雌醇联合宫腔镜治疗方案用于子宫内膜息肉病例治疗中疗效显著,且治疗安全性较高,可大力推行。

胰岛素抵抗对多囊卵巢综合征育龄妇女生育能力的影响探究

目的:观察胰岛素抵抗对多囊卵巢综合征育龄妇女生育能力的影响。方法:随机选取我院2017年8月-2018年8月收治的84例多囊卵巢综合征育龄女性为本次研究对象,按照是否伴有胰岛素抵抗将所有患者分为A组(52例:伴胰岛素抵抗)与B组(32例:不伴有胰岛素抵抗),比较两组患者生育能力。结果:A组患者雌二醇(E2)、睾酮(T)、脱氢表雄酮(DHEA)等激素水平均明显高于B组,P<0.05。A组流产率、重度OHSS发生率均明显高于B组,P<0.O5。结论:胰岛素抵抗可进一步影响多囊卵巢综合征育龄女性相关激素水平,增加女性流产率、重度OHSS发生率。

SREBP1在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及其调控肿瘤细胞恶性行为研究

目的探究甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)在宫颈上皮内瘤变(CIN)与宫颈癌(CC)中的表达变化及其对肿瘤进程的影响。方法收集CIN组织与CC组织各20例,免疫组化染色检测SREBP1阳性表达,实时荧光定量PCR反应(RT-qPCR)测定SREBP1mRNA表达水平;将人宫颈癌HeLa细胞分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-SREBP1组、sh-NC组、sh-SREBP1组,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数目,免疫荧光染色观察各组细胞内上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达,体外小管形成实验检测各组细胞成管情况,Western blot测定各组细胞内E-cadherin、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果随着CIN分级程度的增加,SREBP1表达越高,且CC组织SREBP1表达显著高于CIN组织(P<0.05)。与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-SREBP1组细胞增殖活性升高,克隆形成数目增加,细胞内E-cadherin荧光表达明显减弱,血管管腔形成数目增多,E-cadherin蛋白表达下调,N-cadherin、Vimentin、MMP-9及VEGF蛋白表达均上调(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-SREBP1组细胞增殖活性降低,克隆形成数目减少,细胞内E-cadherin荧光表达则明显增强,同时,血管管腔形成数目减少,E-cadherin蛋白表达上调而N-cadherin、Vimentin、MMP-9、VEGF蛋白表达均下调(P<0.05)。结论SREBP1在CIN与CC组织中表达升高,抑制其表达能够降低CC肿瘤细胞增殖,阻止肿瘤细胞上皮间质转化与血管形成,从而减缓肿瘤进程。