东北菱粗多糖的提取和纯化方法的评价

目的:研究提取东北菱多糖的最佳溶剂,比较4种多糖纯化方法对东北菱粗多糖的纯化效果。方法:将东北菱粗提物分为3份,分别用甲醇、乙醇和丙酮作为溶剂提取粗多糖。分别采用Sevag法、三氯乙酸法、盐酸法和活性炭法对东北菱粗多糖进行脱蛋白处理。用比色法检测东北菱提取物中多糖水平和纯化后样品中多糖水平和蛋白质水平,比较纯化效果。结果:3种提取物中,以丙酮为溶剂的东北菱提取物中多糖水平最高,为33.69%,蛋白质水平为5.51%。经Sevag法、三氯乙酸法、盐酸法和活性炭法处理后的溶液中多糖水平分别为46.53%、43.44%、41.24%和36.66%;蛋白水平分别为5.64%、5.41%、5.41%和5.51%。结论:丙酮为提取东北菱粗多糖的最佳溶剂。4种纯化方法各有优缺点,Sevag法对于多糖水平的提高效果明显,适合东北菱粗多糖的提取。

干细胞标志物P63和CD44v6在新疆维吾尔族女性宫颈病变组织中的表达及意义

目的探讨宫颈癌及癌前病变与肿瘤组织中P63和CD44v6表达调控的关系及其临床意义,为宫颈癌的早期诊断和临床治疗提供依据。方法收集宫颈上皮组织标本74例,其中官颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)患者36例,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ~Ⅲ患者13例及正常对照25例,提取组织总RNA,利用荧光定量RTPCR方法鉴定P63和CD44v6基因的转录表达水平。结果 P63和CD44v6基因在宫颈组织恶性转化过程中,随着宫颈病变程度的加重,两种基因的表达水平逐渐升高,与病变程度呈正相关(P<0.05);各组间两两比较发现,CSCC与NC或CIN比较,上述两种基因的表达差异有统计学意义(P<0.05);而CIN与NC比较,P63和CD44v6表达水平差异无统计学意义(P>0.05);对P63和CD44v6基因表达水平变化的关系进行Pearson相关性分析,发现该两种基因呈中度相关(r=0.320,P=0.018)。单一基因表达水平检测对宫颈癌诊断的特异性和敏感度分析,两种基因的曲线下面积均>0.7,说明上述基因检测的诊断准确度较高,对宫颈癌有一定的预警价值,推测宫颈癌发生与P63和CD44v6基因表达水平升高存在密切关系。结论 P63和CD44v6等干细胞标志物的表达调控可能成为宫颈癌的候选生物学标志物,对于宫颈癌早期预警和临床治疗有重要意义,联合检测可以为宫颈癌判断预后提供重要依据。

维吾尔族妇女宫颈癌发生与ALDH1A1基因表达调控的关系及临床意义

目的本研究利用新疆维吾尔族妇女宫颈癌标本资源,对ALDH1A1基因的mRNA和蛋白质表达水平进行定量分析,探讨宫颈癌发生与该基因表达调控的关系及临床意义。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)、宫颈内上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ~Ⅲ及宫颈炎患者的新鲜组织标本58例和石蜡包埋组织切片75例,利用荧光定量RT-PCR方法、免疫组织化学等方法检测ALDH1A1基因在宫颈病变组织中的表达水平变化。结果ALDH1A1 mRNA在宫颈癌组织中的表达量(1.733±0.968),显著高于正常宫颈组织中的表达量(0.458±0.347,P<0.05)。随着宫颈病变的进程ALDH1A1蛋白的表达升高,ALDH1A1蛋白在官颈癌组织中表达率为77.5%(31/40),显著高于正常宫颈组织中的表达率36.8%(7/19)(P<0.01)。单一基因表达水平检测对宫颈癌诊断的特异性和敏感度分析,该基因的曲线下面积均>0.7,说明上述基因检测的诊断准确度较高,对宫颈癌有一定的预警价值,推测ALDH1A1基因的高表达可能成为宫颈癌早期预警的标志物。结论 ALDH1A1可作为宫颈癌肿瘤干细胞特异标志物,该基因转录表达上调或蛋白质表达水平升高与维族妇女宫颈癌发生有密切关系,可能成为肿瘤诊断和预后的分子标志物。