蚕抗菌肽研究与产业化35年的回顾和展望

1981年国内研究者首次从中国柞蚕(Antheraea pernyi)蛹血淋巴中分离出抗菌肽,测定其序列约37个氨基酸残基。之后又设计合成了柞蚕抗菌肽D、AD及CAD,并且在酿酒酵母、毕赤酵母及芽孢杆菌中得到高效表达,通过优化培养基配方及建立先进的发酵工艺流程后生产的蚕抗菌肽产品质量稳定。目前国内已有广东、河南、山东及湖北等省的多家生产蚕抗菌肽的企业,产品已应用于农业、养殖业、医药、食品、化妆品等领域。例如:蚕抗菌肽代替抗生素作为安全、无药物残留、不污染环境的绿色饲料添加剂用于饲养肉鸡、肉猪及对虾等,能有效预防疾病,提高成活率,增加体质量,降低料肉比;将蚕抗菌肽基因转化作物培育抗病品种,其中转入抗菌肽基因的抗青枯病辣椒品种已在广东、广西2个省(区)推广应用。今后需要进一步通过建立先进、高效的蛋白质重组技术和发酵工程技术,完善蚕抗菌肽产业化开发应用过程的相关标准、法规,努力推进蚕抗菌肽这一绿色生物制品发挥其潜在的巨大经济效益。

微生物发酵饲料在畜禽养殖中的发展现状及应用

随着现代发酵技术的发展,为了提高饲料利用率、改善饲料品质、消除环境污染,微生物发酵饲料在畜牧业中发展迅速,前景十分广阔。综述了微生物发酵饲料发酵菌种、作用机理及微生物发酵饲料的应用,分析了微生物发酵饲料目前存在的问题和发展前景。

菌丝霉素抑菌活性鉴定及其在防治牛乳腺炎中的应用

试验目的是通过毕赤酵母系统高效表达一种新的真菌防御素菌丝霉素,鉴定它的抑菌活性,并考察其对牛乳腺炎疾病的防治功能。将菌丝霉素基因克隆到酵母表达载体p Pic Zα中,转化并重组到毕赤酵母GS115中。经过甲醇诱导表达,分离纯化,进行体外抑菌活性鉴定。结果显示菌丝霉素在1μg/ml浓度下,对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌等起到抑制作用,对耐药性金黄色葡萄球菌的MIC为10~50μg/ml。鉴于上述细菌是引起奶牛乳腺炎的重要致病菌,我们将0.05%菌丝霉素蛋白灌注到奶牛乳腺中,经过7 d的治疗期,发现奶牛乳腺炎得到有效治疗或缓解。上述结果表明菌丝霉素在0.05%剂量下,对奶牛乳腺炎具有防治作用,可望开发为一种新兽药。

菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母中表达及中试发酵研究

构建表达菌丝霉素NZ2114蛋白的真核重组表达质粒p Pic Zα-NZ2114,并转化毕赤酵母菌GS115,Zeocin抗性筛选阳性重组子,通过PCR鉴定、Tricine-SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得菌丝霉素NZ2114组成型表达菌株,并采用p H-溶氧监控策略进行工程菌毕赤酵母菌GS-115/p Pic Zα-NZ2114的50 L中试发酵研究。结果表明,本实验成功实现了菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母GS115中的组成型表达p Pic Zα-NZ2114,Tricine-SDS-PAGE分析显示,在4.4 k Da处有明显的目的条带,工程菌经50 L发酵罐诱导培养96 h后取上清,对金黄色葡萄球菌CMCC26003有明显的抑制作用。菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母中表达的方法在本研究中成功应用,中试研究为以后的规模化生产和应用奠定了基础。

抗菌肽菌丝霉素成膜剂制备及其应用

试验研究抗菌肽菌丝霉素成膜剂性能及其应用,运用单因素影响试验及L_9(3~4)正交试验选出最佳组合,通过透气性试验、黏附力试验及释药性试验对膜性能进行研究并应用于治疗奶牛乳房炎。结果表明:成膜剂的最佳组合(按体积比)为PVA甘油Tween-80CMC-Na=5%7%1.5%2.1%;正交试验分析为CMC-Na的试验影响最大,其次是Tween-80;该膜的透气率在7.45~9.05 g/(h·m^2)之间,黏附力在153.41~230.36 g之间,用药300 min之后该成膜剂释药量达到平衡。试验表明,抗菌肽成膜剂的制备工艺简单,膜性能良好,对奶牛乳房炎具有很好的治疗效果。

抗菌肽生物学性状及在饲料添加剂方面的应用进展

抗菌肽是一类普遍存在于生物体内的阳离子两亲性多肽，是机体天然免疫系统的重要组成部分。抗菌肽不仅能够有效杀灭细菌，还对真菌、某些有包膜的病毒、寄生虫以及肿瘤细胞也有抑制活性。抗菌肽的作用机制与传统抗生素不同，不仅具有广谱抗微生物作用，而且不易诱导机体产生耐药性。本文综述了抗菌肽的来源、生物学性状和抗菌机制及其作为饲料添加剂的作用效果和发展前景。

抗菌肽开发与应用的研究进展

抗菌肽是一类普遍存在于生物体内的阳离子两亲性多肽,是机体天然免疫系统的重要组成部分。抗菌肽不仅能够有效杀灭细菌,还能抑制真菌、某些有包膜的病毒、寄生虫以及肿瘤细胞的活性。抗菌肽作为多功能效应分子,如信号分子、免疫调节剂、促细胞分裂剂、抗肿瘤剂、避孕剂和饲料添加剂,被认为是种有潜力的替代药物并应用于预防和治疗研究。除了这些特性,抗菌肽还能作为载体将药物传送到细胞内。本文重点阐述了抗菌肽多功能生物活性及其作为一种有潜力和前景的替代药物可能被应用于制药行业中。

抗菌肽作用机理及其在畜禽养殖业中的应用

抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽,与传统抗生素相比具有无药残,不易产生耐药性等特点,是抗生素理想的替代品,同时也可作为一种高效优质的绿色饲料添加剂。抗生素在畜禽养殖业的滥用,不但造成动物免疫力下降,其药物残留更威胁到人类健康。本文介绍了抗菌肽的作用机理、功能及在畜禽生产中的进展研究。