甘氨脱氧胆酸对人肝癌细胞增殖抑制与诱导凋亡的实验研究

目的探讨甘氨脱氧胆酸（GDCA）对人肝癌细胞SMMC7721增殖的影响以及细胞凋亡作用。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721，在24、48、96h后加入GDCA，并进行四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验，计算肝癌细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的影响。结果GDCA对肝癌细胞SMMC7721有增殖抑制作用，GDCA作用细胞72h后，200、400、800／μmo／L GDCA抑制率分别为18．18％、29．94％和88．54％；细胞周期分析显示，G1期细胞比例与对照组相比明显升高，GDCA200、400／μmol／L处理组P〈0．05，S期有不同程度的下降，GDCA400／μmol／L处理组P〈0．01。Annexin V-FITC检测结果显示GDCA 200、400μmol／L处理组48和72h后细胞凋亡比例比对照组明显增加，差异具有统计学意义。结论GDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用，并能诱导SMMC7721细胞凋亡。

甘氨脱氧胆酸钠对人肝癌细胞周期及P21mRNA表达的影响

目的:探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxrycholic acid,GDCA)作用人肝癌细胞SMMC7721后对细胞周期及P21mRNA表达的影响。方法:流式细胞仪对细胞周期进行检测;Trizol提取细胞RNA,然后进行RT-PCR。结果:GD-CA100、200、400μmol/L处理组均对SMMC7721的细胞周期具有阻滞作用,主要表现为G1期的延长,S期缩短。P21mRNA的表达明显上调。结论:GDCA对SMMC7721的细胞周期具有明显阻滞作用,并能下调P21mRNA的表达。

甘氨脱氧胆酸钠对人肝癌细胞端粒酶活性及其hTERTmRNA表达的影响

目的探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxycholic acid,GDCA)对肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性以及hTERTmRNA表达影响。方法采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性;应用RT-PCR检测hTERTmRNA的表达。结果GDCA作用肝癌SMMC7721细胞后,端粒酶活性与hTERTmRNA表达均降低,GDCA200、400μmol/L处理组与对照组端粒酶活性(A450nmOD值)分别为(0.140±0.04)、(0.077±0.01)、(0.248±0.05),差异有统计学意义(P<0.05),抑制率为43.5%和69.0%。hTERTmRNA表达明显降低,相对表达率分别为1.33、0.59、1.89。结论甘氨脱氧胆酸钠抑制肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性,且下调hTERTmRNA的表达。

甘氨脱氧胆酸诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡中对P53表达的影响

目的探讨甘氨脱氧胆酸(GDCA)在诱导SMMC-7721细胞凋亡中对P53表达的影响。方法用膜联蛋白V(annexinV)检测细胞凋亡,RT-PCR分析p53 mRNA变化,免疫组化技术分析P53蛋白表达。结果GDCA可明显诱导SMMC-7721细胞凋亡,具有明显的时间和剂量依赖。200μmol/L GDCA处理组在48 h和72 h的细胞凋亡率分别为(7.67±2.35)%、(12.93±1.48)%;400μmol/L GDCA处理组则分别为(13.14±2.56)%、(14.22±2.11)%。GDCA可明显提高p53 mRNA水平,且较强地抑制突变的P53蛋白的表达。结论GDCA具有诱导SMMC-7721细胞凋亡作用。