CD317促进巨噬细胞TLR4信号转导的作用机制研究

Toll样受体4(TLR4)是一个重要的模式识别受体,在抗感染天然免疫过程中发挥重要作用。CD317是一个结构独特的Ⅱ型跨膜糖蛋白,兼具病毒束缚和信号调节功能,但目前尚不清楚其对TLR4介导的信号转导是否有调控作用。该研究利用基因敲除鼠来源的原代腹腔巨噬细胞和THP-1诱导的人巨噬细胞为模型,探讨了CD317对TLR4信号转导的作用。结果显示,CD317能够被TLR4激动剂脂多糖诱导表达,并反馈性增强脂多糖介导的NF-κB活化及TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎细胞因子的产生。CD317敲除或敲减均能够显著抑制TLR4介导信号活化及细胞因子的产生。进一步利用免疫共沉淀证实CD317能够与TLR4下游的关键蛋白MyD88、TRAF6相结合,提示CD317可能是通过MyD88-TRAF6信号转导,增强TLR4介导的NF-κB活化。该研究不仅加深了对CD317在抗感染天然免疫调控中作用的认识,也为相关疾病的治疗策略开发提供了新的靶点和理论指导。

慢性束缚应激腹泻型肠易激综合征大鼠模型的改良与评价

【目的】对慢性束缚应激腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的大鼠模型进行改良,并建立客观的评价方法。【方法】将30只SD大鼠采用随机分层抽样方法分为对照组、模型1 h组、模型2 h组,每组10只,雌雄各半。模型1 h组、模型2 h组分别每日束缚1 h和2 h,持续造模14 d。造模开始后第7、14、21、28天,观察各组大鼠4 h粪便粒数、粪便面积、体质量变化;于第28天时,进行腹壁回缩反射(AWR)评分以评价内脏敏感性,采用苏木素—伊红(HE)染色法观察各组大鼠胃窦部、十二指肠、中段回肠、结肠组织病理改变,采用实时定量聚合酶链反应(q PCR)法检测结肠组织5-羟色胺受体3A(5-HT3AR)表达水平。【结果】与对照组比较,模型1 h组大鼠第7、14、21、28天的粪便粒数无明显变化(P>0.05),仅在第14天粪便面积显著升高,体质量下降(P<0.05或P<0.01),而模型2 h组大鼠的粪便粒数、粪便面积在第21、28天均显著升高,体质量在第7、14、21、28天均显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型1 h、2 h组AWR评分均显著高于对照组(P<0.05);2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。光学显微镜观察结果显示,模型1 h、2 h组大鼠的胃、十二指肠、回肠、结肠组织样本与对照组比较,均无明显的病理改变。q PCR结果显示,模型2 h组结肠5-HT3AR表达水平显著高于对照组(P<0.05),而模型1 h组结肠5-HT3AR表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】慢性束缚应激2 h,持续14 d可完成腹泻型肠易激综合征模型制备;粪便面积和AWR评分可作为其客观评价的指标。