炎症激活间充质干细胞源微泡对糖尿病慢性创面愈合的促进作用观察

目的探讨炎症激活条件下间充质干细胞分泌的微泡(LPS-exosomes)对糖尿病慢性创面的治疗作用。方法用终浓度为100ng/ml的脂多糖预处理间充质干细胞2d,收集上清液,利用超速梯度离心法分离提取微泡,并对其进行鉴定。建立糖尿病大鼠皮肤缺损模型,将实验大鼠随机分为3组:未治疗组、间充质干细胞源微泡治疗组、炎症激活间充质干细胞源微泡治疗组,分次多点注射微泡60μg于伤口周边,1次/d,连续10d。于治疗后第3、7、14天进行创面大体观察,q RT-PCR法检测创面炎症相关因子表达水平及巨噬细胞亚型表面标记物的表达改变。结果与未治疗组相比,炎症激活间充质干细胞源微泡治疗组创面愈合速度明显加快,治疗后第7、14天促炎因子IL-1、IL-12及M1型巨噬细胞表面标记物i NOS表达水平明显降低,同时抗炎因子IL-10、TGF-β及M2型巨噬细胞表面标记物CD163表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论炎症激活间充质干细胞源微泡可能通过调节巨噬细胞表型改变,抑制创面局部慢性炎症反应,进而加速糖尿病皮肤创面的愈合。

肝癌患者血清瘦素表达及其临床意义

目的探讨肝癌患者血清瘦素(Leptin)的变化及其意义。方法研究分肝癌组(104例)﹑肝癌术后组(86例)及正常对照组(100例),采用全自动生化分析仪检测各组血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、碱性磷酸酶(ALP)及总胆红素(STB)等生化指标并用放射免疫法检测Leptin及甲胎蛋白(AFP)。结果与正常对照组相比,肝癌组血清TG、TC、ALP、STB、Leptin、AFP及肝癌术后组TG、Leptin、AFP含量均显著升高(P<0.05),同时与肝癌组相比,肝癌术后组Leptin、AFP含量明显降低(P<0.05),TC、TG、ALP、STB含量无明显改变。Leptin与TC、TG呈正相关,而与AFP、ALP、STB无相关性。结论Leptin参与肝癌的发生发展,其作用机制可能与促进肝癌组织新生血管形成有关。

丙酮酸乙酯对脓毒症小鼠相关脏器的保护作用

目的:探讨丙酮酸乙酯(EP)对脓毒症小鼠肾脏、肝脏、肺脏组织的保护作用。方法:采用盲肠结扎穿孔术制备小鼠脓毒症模型。100只雄性昆明小鼠随机分为假手术组、脓毒症组、EP预保护组、EP保护组,后三组又设立1h、3h、6h组,每组10只。用分光光度法检测血清碱性磷酸酶(ALP)活性,肝脏、肺脏组织匀浆液中总抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA)含量。结果:EP预保护组6h、EP保护组6h血清ALP较损伤组6h显著降低。EP预保护组3h、6h及EP保护组3h、6h肝脏、肺脏组织总抗氧化能力较损伤组相应时间点明显升高。EP干预后,受损肝脏、肺脏组织丙二醛无明显变化。结论:EP可能对脓毒症后。肾脏、肝脏、肺脏等受损脏器起一定的保护作用,其机制与影响氧自由基有关。

丙酮酸乙脂保护脓毒症后肺损伤及其机制的研究

目的:观察脓毒症对小鼠肺相关酶活性的影响,探讨丙酮酸乙脂(Ethyl Pyruvate,EP)在脓毒症中对受损肺脏的作用。方法:采用盲肠结扎穿孔术制备小鼠脓毒症模型,用分光光度法检测肺组织匀浆液中丙二醛(Malonaldehyde,MDA)、丙酮酸(Pyruvate Acid)、乳酸(Lactic Acid)及总抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,TAOC)等4种与自由基合成、代谢相关的酶活性,同时采用放射免疫分析测定血清瘦素(leptin)水平。结果:腹腔内注射EP后,肺组织丙二醛、丙酮酸、乳酸及总抗氧化能力等酶活性有不同程度的改变,但结果并非完全抑制或促进。血清leptin水平在EP保护后6h和12h较损伤组各相应时间点显著升高。结论:EP可能通过leptin发挥对脓毒症后受损肺脏的保护作用。

人线粒体DNA与衰老和退行性疾病的研究进展

人线粒体基因组包括1 500多个基因,分属于线粒体DNA(m tDNA)和核基因组DNA(nDNA)两个部分。除m tDNA自身编码的37个基因外,其余与线粒体结构和功能相关的基因均由nDNA编码。线粒体产生的大量活性氧类(ROS)可致m tDNA突变,继而诱发衰老及许多与衰老相关的疾病,包括神经退行性疾病、心肌病、糖尿病和恶性肿瘤等。

低氧预处理的人脐带间充质干细胞对巨噬细胞极化的调节作用观察

目的探讨低氧培养的人脐带间充质干细胞对巨噬细胞极化的影响。方法采用组织块贴壁法获取人脐带来源的间充质干细胞(h UC-MSCs),分别将细胞置入常氧(氧浓度21%)和低氧(氧浓度5%)条件下培养,通过细胞成脂、成骨分化诱导观察其多向分化能力,Live/death染色检测细胞活性,ELISA法检测其细胞因子蛋白含量。利用Transwell将常氧和低氧培养的h UC-MSCs与脂多糖(IPS)刺激后的巨噬细胞(THP-1)共培养,免疫荧光检测THP-1的极化情况,ELISA检测THP-1分泌炎症因子以及抗炎因子的情况。结果低氧条件下培养的h UC-MSCs具有成脂、成骨的多向分化潜能;Live/death染色结果显示常氧和低氧培养下的h UC-MSCs均具有较高的细胞活性;低氧条件下培养的h UCMSCs中前列腺素E2(PGE2)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达水平明显高于常氧培养的h UC-MSCs;低氧条件下培养的h UC-MSCs可促进THP-1向M2型巨噬细胞转化,同时炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达明显降低,而抗炎因子IL-10的表达明显增强。结论低氧培养的h UC-MSCs可促使THP-1向M2巨噬细胞转化,提高其抗炎能力。

肺、结肠和直肠癌患者血清瘦素的表达及意义

目的研究肺癌、结肠癌和直肠癌患者血清瘦素(Leptin)的表达变化,探讨其与患者预后的关系。方法采集肺癌、结肠癌、直肠癌患者及正常对照者的血清样品,采用相应试剂盒检测血清Leptin、癌胚抗原的水平,采用全自动生化分析仪检测反映脏器功能、代谢功能的相关生化指标变化。结果与正常对照者相比,三种肿瘤患者血清Leptin显著升高,癌胚抗原、脏器功能指标和代谢指标均有不同程度变化。结论Leptin可能作为评价恶性肿瘤患者状况的新指标。

丙酮酸乙酯对脓毒症小鼠血清Leptin及乳酸/丙酮酸比值、ALT和UA的影响

探讨丙酮酸乙酯(Ethyl Pyruvate,EP)对脓毒症小鼠血清Leptin、乳酸/丙酮酸比值、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和尿酸(UA)水平的影响。建立小鼠脓毒症模型,90只昆明小鼠随机分为:假手术组(Sham组)、林格氏液组(RLS组)、EP处理组(REPS组),后两组又设立15 min、1 h、3 h、6 h组,每组10只,用全自动生化分析仪检测血清乳酸/丙酮酸比值、ALT、UA;RIA测定血清Leptin水平。结果表明:1、血清Leptin水平:REPS组后期显著高于RLS组(P<0.05)2、乳酸/丙酮酸:与Sham组比较,RLS组与REPS组均显著升高(P<0.05或P<0.01);REPS组与RLS组比较各相同时间点之间无显著性差异。3、血清ALT:与Sham组比较,REPS组与RLS组均显著增高(P<0.01或P<0.05);REPS组在后期显著高于RLS组(P<0.05)。4、血清UA:与Sham组比较,RLS组先显著升高(P<0.05)后降低,REPS组先降低后升高,后期显著高于Sham组(P<0.05);REPS组与RLS组比较显著降低(P<0.05)。EP对脓毒症损伤小鼠肾功能具有一定的保护作用,并加重脓毒症早期肝脏损伤,同时能促进Leptin的释放。

人肥胖抑制素放免法的建立及初步应用

为建立人肥胖抑制素(Obestatin)放免法,探讨Obestatin在代谢紊乱疾病时的表达变化和意义,利用合成的人Obestatin制备抗血清,采用氯胺-T法碘标记Obestatin,从而建立Obestatin放免法。用本法检测50名健康献血员组、50例冠心病组患者、50例糖尿病组患者的血清Obestatin水平。结果表明:与健康献血员组相比,冠心病组、糖尿病组血清Obestatin水平均显著升高(P<0.001),冠心病组的水平还显著高于糖尿病组(P<0.001)。结果提示Obestatin放免法的标准曲线形态和测量结果均良好,方法灵敏度高、简便、可靠,适于人血清样品的检测,Obestatin可作为一种应激因子参与代谢紊乱疾病的调控。

鼠肥胖抑制素RIA的建立及初步应用

目的:研究鼠肥胖抑制素(Obestatin)RIA的建立方法,并探讨Obestatin在创伤应激反应中的作用。方法:利用人工合成的鼠Obestatin免疫新西兰白兔制备抗血清,采用氯胺-T法碘标记Obestatin抗原,从而制备Obestatin RIA。建立小鼠盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,设立假手术和损伤后3h、6h、9h组,每组9只,并采用自制Obestatin RIA检测损伤后各组血清Obestatin的水平。结果:所用Obestatin RIA的标准曲线形态和测量结果均良好。与假手术组血清Obestatin水平相比,损伤后6 h组显著升高,而损伤后3h、9h组与之无显著差异。同时,损伤后6h组还有显著高于损伤后3h、9h组的趋势。结论:所建立的鼠Obestatin RIA灵敏度高、简便、可靠,能够用于大鼠、小鼠相关样品的检测。Obestatin可能作为一种创伤应激因子参与脓毒症后内环境紊乱的调控。

冠心病患者血清瘦素水平分析

目的研究冠心病患者血清瘦素(Leptin)水平的变化,探讨其与冠心病发生发展过程的关系。方法收集我院确诊的300例冠心病患者及30名正常对照者血清。检测血清中Leptin、C反应蛋白(CRP)及20项代表不同脏器及代谢功能的生化指标水平,分析Leptin与冠心病的关系。结果与正常对照组比较,冠心病患者血清Leptin、CRP水平显著升高,但两者无显著相关性;患者代谢功能生化指标有不同程度的显著改变;Leptin与其中一些指标存在一定的相关性。结论Leptin及CRP在冠心病发病过程中具有较强的独立应答,并且Leptin与患者其他生化功能指标存在一定的相关性,其可能促进了冠心病的发生发展。