一测多评法同时测定连翘归尾颗粒中3种成分

目的建立一测多评法同时测定连翘归尾颗粒(连翘、归尾、甘草等)中3种成分的含量。方法该药物20%乙醇提取液的分析采用Thermo Scientific BDS HYPERSIL C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长278 nm。以连翘酯苷A为内标,计算其他2种成分的相对校正因子,测定其含量。结果绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷分别在0.44~4.44μg/mL(r=0.9999)、1.08~10.76μg/mL(r=0.9999)、0.13~1.32μg/mL(r=1.0000)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.70%、103.30%、95.77%,RSD分别为0.24%、1.55%、0.32%。一测多评法与外标法所得结果接近。结论该方法简便、快速、准确,可用于连翘归尾颗粒的质量控制。

连翘归尾煎对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、凋亡和周期的影响

目的探讨连翘归尾煎(LQGWJ)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、凋亡和周期的影响。方法以20%的乙醇为提取溶媒制备连翘归尾煎(LQGWJ)提取物。实验分为空白组、阴性对照组、盐酸阿霉素组(0.01 mg/ml)、连翘归尾煎(LQGWJ)低(0.1 mg/ml)、中(0.3 mg/ml)、高(0.5 mg/ml)剂量组,采用CCK-8法检测细胞抑制率,细胞划痕法检测细胞迁移率。然后实验分为阴性对照组、盐酸阿霉素组(0.01 mg/ml)、连翘归尾煎(LQGWJ)低(0.3 mg/ml)、中(0.5 mg/ml)、高(0.7 mg/ml)剂量组,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果与阴性对照组比较,LQGWJ低、中、高剂量组MCF-7细胞抑制率显著升高(P<0.01),细胞迁移率显著降低(P<0.01),且具有明显的量-效关系。与阴性对照组比较,LQGWJ低、中、高剂量组MCF-7细胞凋亡率显著升高(P<0.01),且具有量-效和时-效关系。与阴性对照组比较,LQGWJ低、中、高剂量组G0/G1期细胞所占比例明显升高(P<0.05),当作用48 h和72 h,LQGWJ低、中、高剂量组G2/M期细胞所占比例明显降低(P<0.05)。结论连翘归尾煎20%乙醇提取物可以抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,降低细胞的迁移率,并且可以通过调控细胞周期变化,加快细胞的凋亡。

防己与甘草在防己黄芪汤中配伍后3种成分的变化

目的 考察防己与甘草在防己黄芪汤中配伍后甘草酸、粉防己碱、防己诺林碱的变化。方法 采用RP-HPLC法,对防己、甘草单味药提取液,防己与甘草对药提取液及全方提取液中粉防己碱、防己诺林碱、甘草酸提取量进行测定。结果 水煎后过滤、水煎后离心时,防己生物碱提取量逐渐减低,而乙醇回流时其提取量有所变化但不明显;水煎后过滤及水煎后离心、乙醇回流时,甘草酸提取量均逐渐降低;人工胃液、人工肠液中均可检测到防己生物碱、甘草酸。结论 碱性药防己与酸性药甘草配伍时,在水煎煮过程中会形成复合物沉淀。防己黄芪汤全方中形成的沉淀多于防己-甘草对药中。防己-甘草水煎沉淀物在人工胃液、肠液中均可被解离,在后者中更明显。

银柴退热口服液的制备工艺及中试生产研究

目的:优选银柴退热口服液的最佳制备工艺并进行中试生产研究。方法:比较冷藏静置法、高速离心法、水提醇沉法、澄清剂沉淀法4种澄清工艺对银柴退热口服液中绿原酸、黄芩苷相对含量的影响,同时考察固化物的含量和精制澄清72 h后的提取液沉淀情况,以权重分别为0.4、0.4和0.2进行综合评分确定澄清方法;对不同配比的矫味剂、不同pH值及不同的灭菌方法进行考察,结合中试生产试验结果,建立银柴退热口服液的制备工艺,确定主要技术参数及辅料的种类和用量。结果:银柴退热口服液主要工艺参数为:澄清工艺为一次醇沉,乙醇浓度为70%;矫味剂为0.4%的阿斯巴甜和0.4%的草莓香精;防腐剂为0.15%的山梨酸钾;pH值确定为7.0~8.0;灭菌方法为流通蒸汽灭菌法。结论:该试验确定的银柴退热口服液制备工艺稳定可行,药材、半成品、成品质量可控,成品的工艺条件和质量稳定,可操作性强,适合于批量生产。

不同处方配比及提取工艺对银柴退热汤解热镇痛抗菌抗炎作用的影响

目的:考察不同处方配比(金银花:柴胡分别为1∶1、2∶1、1∶2)及不同提取工艺(水煎煮法、双提法)对银柴退热汤解热、镇痛、抗菌、抗炎作用的影响。方法:考察银柴退热汤供试品1-6对金黄色葡萄球菌活性、干酵母致大鼠发热模型、鸡蛋清致大鼠足肿胀模型及醋酸致小鼠扭体反应的影响。结果:各实验中供试品1~6组与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。不同处方配比、不同提取工艺的银柴退热汤流浸膏均有一定的抗菌、解热、抗炎、镇痛作用,金银花:柴胡配比为1∶1、提取工艺为双提法时,其抗菌、解热、抗炎、镇痛作用更明显。结论:不同提取工艺对药理作用影响更大,为后期的工艺研究提供理论依据。

多指标-响应曲面法优选连翘中抗痤疮有效部位的提取工艺研究

目的:对连翘中抗痤疮有效部位的提取工艺进行优选。方法:通过HPLC检测,对连翘中连翘酯苷B、连翘酯苷A、芦丁含量进行测定并以此为评价指标,通过单因素试验对响应曲面工艺参数进行考察,再通过响应曲面法考察乙醇的体积分数、提取时间、提取次数、料液比对连翘抗痤疮有效部位提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺为:提取溶媒为60%乙醇、提取时间为2.5 h、煎煮次数为3次、溶剂加入量为14倍。结论:该方法简单,易于操作,可信度高,可用于连翘中抗痤疮有效部位的提取。

贾氏银柴退热汤提取工艺的优化

目的优化贾氏银柴退热汤提取工艺。方法以煎煮时间、煎煮次数、加水量为影响因素,绿原酸、黄芩苷转移率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为煎煮时间60 min,煎煮次数2次,加水量12倍,绿原酸、黄芩苷转移率分别为42.70%、78.97%。结论该方法简便准确,专属性强,可用于提取贾氏银柴退热汤。

多指标-响应曲面法优选连翘叶中苷类有效部位的提取工艺

目的采用多指标-响应曲面法优化连翘叶中苷类有效部位的提取工艺。方法采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测连翘叶中有效成分含量,以连翘叶中的连翘酯苷A、芦丁、连翘苷的含量为评价指标,通过单因素及响应曲面法考察提取时间、乙醇体积分数、提取次数、料液比对连翘叶中苷类有效部位提取工艺的影响。结果最佳提取工艺:提取溶媒为40%乙醇,提取时间1.5 h,提取次数3次,料液比1∶14;此时综合评分值Y为98.06%。结论运用多指标-响应曲面法对连翘叶中苷类有效部位的提取工艺进行优化,该方法简便准确,易于操作,专属性强,可用于连翘叶中苷类有效部位的提取。

银柴退热颗粒的质量标准研究

目的建立银柴退热颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对银柴退热颗粒中的柴胡、黄芩、金银花、连翘、紫花地丁、大青叶进行定性鉴别;采用高效液相(HPLC)法对银柴退热颗粒中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷进行含量测定,色谱柱为Hypersil BDS C18150mm×4.6mm,5μm,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量为0.7mL/min,柱温为30℃,进样量为10μl,检测波长为330nm。结果6种药材的TLC供试品色谱与对照品或对照药材在相应位置上呈现相同颜色斑点或荧光斑点。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷的线性范围分别为:2.67~267μg/mL、3.57~357μg/mL、8.04~804μg/mL,精密度、稳定性、重复性的RSD均<3.0%,平均回收率分别为:102.88%、102.13%、104.02%,平均含量分别为:0.79mg/g、1.48 mg/g、5.01 mg/g。结论建立的银柴退热颗粒质量标准稳定可靠,重复性好,可用于制剂的质量控制和评价。

连翘归尾颗粒的制备工艺研究

目的确定连翘归尾煎的提取工艺和颗粒剂的成型工艺。方法以对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用为指导,以有效成分的转移率为指标,确定最佳的提取溶媒;采用正交试验,以出膏率和绿原酸、连翘酯苷A和连翘苷的转移率为指标,考察溶媒量、煎煮时间、煎煮次数、浸泡时间四因素对连翘归尾煎提取效果的影响,优化提取工艺;以成型率、溶化性、休止角为指标,考察辅料种类、配比以及润湿剂浓度对连翘归尾颗粒成型工艺的影响,优选最佳成型工艺。结果最佳的乙醇提取浓度为20%;最佳提取工艺:12倍20%乙醇,浸泡45min,提取3次,每次1h;最佳成型工艺:辅料糖粉∶糊精=3∶1主药:辅料=1.4∶1,70%乙醇为润湿剂。结论实验确定的连翘归尾颗粒的提取工艺和成型工艺稳定可靠,重现性良好。