用RACE技术扩增并克隆牛BMP4基因3′端序列

RACE技术是一项扩增基因末端序列的新技术。该研究从牛BMP4基因出发,以牛软骨的RNA为模板,按照不同物种BMP4基因的相似性设计特异引物,运用PCR和RACE技术扩增并获得了特异片段,该片段经PCR、酶切和测序验证,证实所克隆序列为牛BMP4的3′端序列,包含有1170bp组成的开放读码框(ORF),编码389个氨基酸,3′非编码区121bp个核苷酸和poly(A)15。同源性分析结果表明,牛BMP4 cDNA最大开放读码框所推测的氨基酸序列与已知人、小鼠、大鼠、狗、羊和鸡等真核生物BMP4氨基酸序列进行比较,分别有94.5%、93.1%、91.9%、87.4%、94.2%、79%的同源性。这为克隆其他物种的BMP4基因提供了依据,同时牛骨形态发生蛋白的测序为我们更好的理解牛的生骨机理提供帮助。

老年股骨粗隆间骨折患者不同内固定方法的疗效

股骨粗隆间骨折（ITF）是老年高龄患者常见的骨折之一,占髋关节骨折的60%～70%;对于高龄老年患者来说,粗隆间骨折在1年内的死亡率约为15%～20%〔1〕。股骨粗隆间由于血供丰富,骨折愈合较快,目前主张早期手术治疗。

蒙古羊BMP15基因外显子1位点多态性与产羔性能关系分析

采用PCR-SSCP技术对蒙古羊BMP15基因外显子1位点的单核苷酸多态性(SNP)进行了检测,并对其与产羔性能关系进行了分析。结果表明,在所检测的116个蒙古羊个体中,BMP15基因在该位点均呈现多态性,具有++、A+和AA 3种基因型。测序分析表明,该段DNA序列中存在3个碱基的缺失,即编码区第28,29,30位碱基缺失,这个突变使野生型(++)氨基酸序列上相应的10号氨基酸残基亮氨酸(L)缺失,变成了突变基因型(AA),形成B1突变体;群体遗传学分析表明,B1突变在双羔系中的发生频率高于单羔系中发生的频率,χ2适合性检验结果表明,两品系在该位点具有中度多态性并处于Hardy-Weinberg平衡状态(p>0.05);与产羔性能关系分析表明B1突变对蒙古羊产羔数无显著影响(p>0.05)。

老年同侧股骨颈骨折合并股骨干骨折的治疗

同侧股骨颈合并股骨干骨折（IFNSF）常由机动车交通事故、高处坠落伤等高能量创伤所致，且多伴有多系统严重损伤。以往此类型骨折并不常见，但近年来随着交通运输业的迅速发展，其发病率有不断增加的趋势。虽然这类骨折治疗上有不同的内固定方法可供选择，但尚无一种治疗方法得到普遍认可。本文对2009年1月至2011年6月收治的6例老年患者的临床资料进行回顾性分析。

蒙古羊卵巢组织差异表达基因ADAMTS1的电子克隆及RT-PCR验证

在单、双羔蒙古羊卵巢组织抑制性消减杂交的基础上,以其差异表达片段ADAMTS1基因序列为种子序列,采用GenBank的BLAST检索系统首先对蒙古羊的ADAMTS1基因序列片段进行了电子延伸,其次在获得蒙古羊AD-AMTS1基因的cDNA全序列后设计引物,采用RT-PCR方法进一步克隆了蒙古羊ADAMTS1基因。结果显示,试验所得序列与电子延伸序列的同源性为99.4%,序列长为2 420 bp包括836 bp 3'UTR区域和1 578 bp的完整开放读码框,共编码525个氨基酸。Blastn比对发现蒙古羊ADAMTS1基因序列与牛、猪和人的同源性分别为94%,87%,82%;对氨基酸序列进行blastp比对发现与牛、猪和人的同源性分别为91%,90%,87%。采用SMART程序预测其结构功能域发现蒙古羊ADAMTS1蛋白质有4个结构功能域:1个富半胱氨酸结构域和3个血小板反应蛋白。

蒙古羊羊水源干细胞分离培养及其成骨分化研究

试验旨在建立羊水源干细胞系并对其诱导形成成骨细胞的潜能进行研究。在胎牛血清浓度为15%的条件下对羊水源干细胞进行建系,并检测其类胚体形成能力;检测不同代数细胞的干细胞标志基因Oct-4、SH2、SSEA-1、Nanog、HLA-ABC、CD117的表达情况;利用地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸等因子进行诱导。结果表明,羊水源干细胞在体外可以持续增殖,悬浮培养形成的类胚体表达三胚层相关标记基因,经诱导可形成成骨细胞。试验成功分离了蒙古羊的羊水源干细胞并建系,且其具有向成骨细胞分化的潜能。

牛BMP-15基因cDNA的克隆和序列分析

BMP-15基因主要在哺乳动物卵巢中表达,对卵泡的发育和分化起重要作用,克隆了牛BMP-15成熟肽编码区的cDNA序列并进行序列分析,旨在为BMP-15在牛繁殖性能方面的进一步研究奠定理论基础。根据其他物种BMP-15基因的保守序列设计特异性引物,扩增牛的cDNA序列。从牛卵巢中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出牛BMP-15cDNA序列。将此片段克隆到PMD18-T载体中,经菌落PCR鉴定和DNA序列测定分析验证,证实所克隆序列BMP-15为骨形态发生蛋白,符合骨形态发生蛋白基因的特征。序列分析表明,该cDNA包含有1 185 bp组成的开放读码框(ORF),该ORF编码394个氨基酸,与绵羊、猪、人、小鼠等动物氨基酸序列比对发现同源性分别为98.5%,87.6%,74.0%,69.4%。

蒙古牛BMPRIB基因mRNA在卵巢组织中的表达研究

为阐明BMPRIB基因在牛的卵泡发育和分化中的作用及其分子机理,首先根据其他物种BMPRIB基因的保守序列设计特异性引物,从蒙古牛卵巢中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出蒙古牛BMPRIBcDNA序列;将此片段克隆到pGM-T载体中,提取重组质粒,经PCR鉴定和DNA序列测定分析验证;符合BMP家族基因结构特征,然后根据此序列构建cRNA探针,利用原位杂交技术检测牛卵巢BMPRIB基因mRNA的表达情况。原位杂交结果显示,牛BMPRIB基因,在初级卵泡和次级卵泡早期表达,在颗粒细胞中表达,在次级卵泡晚期也有表达。

胶体金免疫层析技术研究进展

胶体金免疫层析检测技术是在荧光素、酶联免疫吸附试验、放射性同位素标记技术之后,于20世纪80年代发展起来的一种快速的免疫学检测技术。由于其具有稳定性好、安全、简便,且不需任何仪器设备等优点,被广泛应用于医学检测、农产品农药兽药残留检测、进出口产品病原微生物检测等领域。主要就其发展历程、技术原理和应用进行了综述,以期为相关研究提供参考。

肠膜明串珠菌胞外多糖的研究进展及其在饲料业中的应用前景

综述了肠膜明串珠菌胞外多糖的存在形式、组成成分、酶促合成过程、生成影响因素及提高产量的技术,介绍了肠膜明串珠菌胞外多糖的功能及用途,探讨了专供发酵饲料使用的肠膜明串珠菌的菌株选育问题、饲用肠膜明串珠菌微生态制剂的生产问题及低聚糖益生元饲料添加剂开发问题。

胫骨陈旧性骨折骨不连不同手术方法对比分析

目的探讨不同手术方法对胫骨陈旧性骨折骨不连的临床疗效。方法 54例胫骨陈旧性骨折骨不连患者,随机分为交锁髓内针固定治疗组和锁定接骨板固定治疗组,各27例。对比观察两组的临床疗效。结果交锁髓内针固定治疗组平均愈合时间为(3.2±1.1)个月,短于锁定接骨板固定治疗组的(4.9±1.4)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。交锁髓内钉固定治疗组近期临床疗效优良率为96.3%,高于锁定接骨板固定治疗组的81.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与锁定接骨板固定相比,应用交锁髓内针固定治疗胫骨陈旧性骨折骨不连骨折愈合时间较短,临床近期疗效优良率高,值得临床推广。

内蒙古牛羊肉类产业化发展探讨

牛羊肉类产业是内蒙古具有资源优势、市场优势和比较优势的产业。近20年来,内蒙古肉类产业发展迅速,特别是牛羊肉类已成为内蒙古农村牧区经济发展的支柱产业。充分发挥资源优势和区域优势,不断增强市场竞争力,变优势资源为优势产业,是新阶段推进农牧业和农村牧区经济结构战略性调整的重要举措,是促进农牧业专业化生产、集约化经营,发展现代农牧业,提升农牧业质量、效益和综合竞争能力的战略选择,是解决“三农三牧”问题、提高农牧民组织化程度、增加农牧民收入、加快农村牧区小康建设的突破口和有效途径。

澳大利亚奶牛业

澳大利亚是奶牛业非常发达的国家,乳制品出口量居世界第一。澳大利亚奶牛业独特的生产体系、优良的奶牛品种和先进的遗传评价系统是其奶业迅速发展的关键。笔者从澳大利亚奶牛业历史与现状、奶业生产、遗传评价系统和奶牛品种等几方面对澳大利亚奶牛业进行了系统的介绍。

膨化加工改善柠条饲用营养价值的研究

柠条(Caragana korshinskii)在复壮平茬时收获的枝条,经粉碎加工制成的柠条粉,可作为食草动物的粗饲料。柠条粉饲料含有丰富的营养成分,但质地坚硬、含有单宁等抗营养因子,导致动物采食量少、消化率和利用率低。试验研究了膨化加工处理对不同采收期柠条中单宁、粗蛋白、粗脂肪、无氮浸出物、粗纤维、粗灰分含量的影响。结果表明,试验组柠条中的单宁含量由2.01%～2.96%降低至0.18%～0.27%、粗纤维含量由33.96%～39.12%降低至28.23%～33.95%、无氮浸出物含量由39.42%～42.91%增加至45.33%～48.42%,与对照组相比均达到显著水平。结论:膨化加工可明显改善柠条的营养价值。

日粮中混合发酵酒糟、添加小苏打对西杂牛饲养效益的影响

为了增强育肥效果,在西杂牛日粮中混合发酵酒糟,并添加不同比例的小苏打,以分析其对育肥牛日增重及经济效益的影响。结果表明,4个试验组中,第2组与第4组和第1组比较,日增重分别提高了32.73%和29.09%,差异显著(P<0.05);4个试验组经济效益的大小顺序为第2组>第3组>第1组>第4组。

蒙古羊BMP15和GDF9基因多态性与其产羔性能相关研究

以控制Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因和生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因为候选基因,采用PCR-SSCP技术检测BMP15和GDF9基因在蒙古羊中的单核苷酸多态性,同时研究这2个基因对蒙古羊繁殖力的影响。结果表明在蒙古羊品种中都没有检测到GDF9基因的G8突变(C→T),也没有检测到BMP15基因的B4突变(G→T),在所检测的116个蒙古羊个体中,BMP15基因在B1位点均呈现多态性,具有++、+A和AA 3种基因型。测序分析表明:该段DNA序列中存在3个碱基的缺失,即编码区第28,29,30位碱基缺失,使其10号氨基酸残基亮氨酸(L)缺失,变成了突变基因型(AA),形成B1突变体;群体遗传学分析表明,B1突变在双羔系中的发生频率高于单羔系中发生的频率,χ2适合性检验结果表明两品系在该位点具有中度多态性并处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);与产羔性能关系分析表明B1突变对蒙古羊产羔数无显著影响(P>0.05)。

畜牧业领域中转基因动物技术的应用

转基因技术以及转基因动物的出现是生物以及生命科学领域里程碑式的事件。转基因动物技术是研究基因功能、生物治疗医学以及探索生命本质关键事件的有效技术手段。虽然转基因技术的研究和应用在畜牧业领域起步较晚,但却拥有广阔的发展前景。综述了转基因动物关键技术及其在转基因家畜生产过程中所面临的主要问题,以期为后续研究提供参考。

棘球蚴病的防控

棘球蚴病是带科棘球属绦虫的幼虫寄生于牛、羊、猪及人等多种哺乳动物的肝、肺及其他内脏器官内所引起的一类寄生虫病。对棘球蚴病的病原、流行病学、临诊症状、病理变化、诊治及预防措施作一介绍,以期为有效防控该病提供参考。

应用锁定接骨板微创治疗老年股骨近端骨折

随着人口老龄化,老年股骨粗隆间骨折已经非常普遍,为减少因此带来的并发症,提高病人的生活生存质量,良好的手术治疗已经成为创伤骨科医生高度认知的问题。从2009年9月~2010年10月内我们应用锁定加压接骨板微创治疗老年股骨近端骨折31例取得了良好疗效,先介绍其方法与同行探讨。