YKL-40在脑膜瘤患者外周血中的表达及对术后脑水肿加重的影响

目的探讨甲壳质酶蛋白40(YKL-40)在脑膜瘤患者外周血中的表达及对术后脑水肿加重的影响。方法选取2020年1月—2023年1月海南西部中心医院诊治的120例脑膜瘤患者作为观察组,其中术前术后均未出现水肿作为观察Ⅰ组,术前无水肿术后出现水肿作为观察Ⅱ组,术前有水肿术后无加重作为观察Ⅲ组,术前有水肿术后加重作为观察Ⅳ组,同期健康体检者120例作为对照组。对比两组血清YKL-40水平。结果观察组术前、术后3 d、术后7 d、术后14 d血清YKL-40水平显著高于对照组(P<0.05);观察组术后3 d血清YKL-40水平高于术前,术后7 d、术后14 d显著降低(P<0.05);在不同时间点,观察Ⅰ组至观察Ⅳ组血清YKL-40水平均呈升高趋势(P<0.05);120例脑膜瘤患者术后出现脑水肿加重32例,发生率为26.67%(32/120);Logistic回归模型分析,肿瘤部位在窦镰旁、术前YKL-40水平升高是脑膜瘤患者术后脑水肿加重的危险因素,术前瘤周水肿是脑膜瘤患者术后脑水肿加重的保护因素(P<0.05);YKL-40及联合预测模型评估脑膜瘤患者术后脑水肿加重的AUC值分别为0.765、0.854,联合预测模型评估的AUC值高于YKL-40单独评估的AUC值(Z=2.318,P=0.021);YKL-40连续变化与脑膜瘤患者术后脑水肿加重发生率存在非线性剂量-反应关系(χ^(2)=12.000,P=0.003)。结论脑膜瘤患者外周血YKL-40水平升高,且异常升高的YKL-40与患者术后脑水肿加重有关,提示对于YKL-40>20 ng/L的患者应警惕术后脑水肿加重的风险。

白藜芦醇阻断TGF-β1/Smad信号通路抑制脑胶质瘤细胞迁移侵袭及上皮间质转化

目的探究白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞黏附、迁移、侵袭、上皮间质转化(EMT)及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的调控作用。方法体外培养人脑胶质瘤T98G细胞,分为对照组(不做干预)、实验组(12.5μmol·L^(-1)白藜芦醇组、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组、50μmol·L^(-1)白藜芦醇组)、5-氟尿嘧啶组(50 mg·L^(-1)的5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(50μmol·L^(-1)白藜芦醇+10μmol·L^(-1) TGF-β1/Smad通路抑制剂LY2109761)和激活剂组(50μmol·L^(-1)白藜芦醇+10μmol·L^(-1)TGF-β1/Smad通路激活剂SRI-011381),干预24 h。用细胞计数试剂盒比色(CCK-8)、倒置显微镜、黏附实验、划痕实验、Transwell小室及蛋白印迹(Wb)法对细胞活力、形态、黏附、迁移、侵袭能力及EMT和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平进行分析。结果与对照组比较,12.5、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组对细胞活力没有显著变化(P>0.05),50μmol·L^(-1)白藜芦醇组和5-氟尿嘧啶组的细胞活力显著降低(P<0.05),12.5、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组较5-氟尿嘧啶组细胞活力显著升高(P<0.05)。其中50μmol·L^(-1)白藜芦醇组细胞活力接近50%且与5-氟尿嘧啶组差异无统计学意义(P>0.05),因此,选择在该浓度基础上分别加入TGF-β1/Smad通路抑制剂LY2109761和激活剂SRI-011381进行TGF-β1/Smad通路验证,且实验组中不再选取12.5和25μmol·L^(-1)白藜芦醇组进行后续实验,其他组别不变。与对照组相比,50μmol·L^(-1)白藜芦醇组和5-氟尿嘧啶组T98G细胞生长受到抑制、细胞黏附、迁移、侵袭能力及N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著降低,而E-钙粘蛋白(E-cadherin)、Smad7蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与50μmol·L^(-1)白藜芦醇组相比,抑制剂组T98G细胞生长进一步受到抑制、细胞黏附、迁移、侵袭能力、N-cadherin、Vimentin、FN、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而E-cadherin、Smad7蛋白表达水平显著增加(P<0.05);激活剂组较50μmol·L^(-1)白藜芦醇组T98G细胞生长状态较好,细胞黏附、迁移、侵袭能力、N-cadherin、Vimentin、FN及TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而E-cadherin、Smad7蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论白藜芦醇可显著抑制人脑胶质瘤T98G细胞的生长、黏附、迁移及侵袭,其作用机制可能与通过抑制TGF-β1/Smad通路的信号转导抑制EMT进程相关。

白藜芦醇调控TGF-β1/Smad信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的探究白藜芦醇调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法将人脑胶质瘤T98G细胞分为对照组、25μmol/L白藜芦醇组、50μmol/L白藜芦醇组、100μmol/L白藜芦醇组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、LY2109761(LY)组和SRI-011381(SRI)组,干预24 h。用活细胞计数、5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷、Hoechst 33258染色、黏附实验、Transwell小室及蛋白免疫印迹法分析细胞活力、增殖、凋亡、黏附、侵袭能力及细胞周期蛋白D1、半胱氨酸蛋白酶-3和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平。结果50、100μmol/L白藜芦醇组和5-FU组较对照组的细胞活力降低(P<0.05)。50μmol/L白藜芦醇组和5-FU组较对照组细胞增殖率、黏附、侵袭能力及细胞周期蛋白D1、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平降低,而细胞凋亡、半胱氨酸蛋白酶-3和Smad7蛋白表达水平增强(P<0.05);LY组上述指标的变化进一步增强(P<0.05),而SRI组上述指标则与LY组的趋势相反(P<0.05)。结论白藜芦醇可抑制人脑胶质瘤T98G细胞的增殖、黏附、侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。