荧光定量PCR法从母体血浆检测胎儿RhCcE血型

目的建立荧光定量PCR(FQ-PCR)法从母体血浆中检测胎儿RhCcE血型,用于胎儿和新生儿溶血病的产前诊断。方法采集孕期8～20周的妇女血浆,采用QIAampDNA Mini方法从母体外周血中提取游离胎儿DNA,用FQ-PCR法检测胎儿DNA的RhCcE基因型,预测胎儿血型。与胎儿脐带血标本检测的结果进行比较,评价采用FQ-PCR法从母体检测胎儿RhCcE血型的准确性。结果 46例RhE阴性母体血浆中检测出18例RhE血型阳性,与胎儿脐带血检测结果完全一致,准确率100%;36例Rhc阴性母体血浆中检测出24例Rhc血型阳性,与胎儿脐带血检测结果完全一致,准确率100%;从35例RhC阴性母体血浆中检测出10例RhC血型阳性,与胎儿脐带血检测结果相比漏检2例,准确率94%。结论 FQ-PCR法能够在孕早期检测出胎儿Rh-CcE血型,可以用于胎儿和新生儿溶血病的产前诊断。

荧光定量PCR法在不同孕期通过母体血浆检测胎儿RhCcE血型

目的比较荧光定量PCR法(FQ-PCR)在不同孕期通过母体血浆检测胎儿RhCcE血型的准确性。方法随机采集孕期8～38周的孕妇外周血334份,分离血浆,提取游离胎儿DNA,用FQ-PCR方法检测胎儿RhCcE血型,利用胎儿脐带血标本检测的结果做验证。结果在妊娠8～≤12、13～≤20及21～38周的孕妇中,RhCcE血型各基因型的FQ-PCR检测结果与脐带血血清学检测结果比较:C基因型正确率分别为94.1%(16/17)、91.6%(22/24)、100%(18/18),漏检率为5.9%(1/17)、8.3%(2/24)、0%(0/18);c基因型正确率分别为97.6%(41/42)、100%(55/55)、100%(30/30),漏检率为2.4%(1/42)、0%(0/55)、0%(0/30);E基因型正确率分别为97.8%(46/47)、98.4%(60/61)、100%(35/35),漏检率为2.1%(1/47)、1.6%(1/61)、0%(0/35)。结论随着孕期的增加,FQ-PCR法检测胎儿RhCcE血型的准确性相应增加,孕晚期时达100%。