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来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
1
作者
鲁毅
徐萍
+6 位作者
李任峰
李超英
李学斌
王三虎
陈明艳
刘卫
邓佳霖
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期750-754,共5页
目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然...
目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
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关键词
来航鸡
FOXL2
单克隆抗体
表位
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职称材料
题名
来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
1
作者
鲁毅
徐萍
李任峰
李超英
李学斌
王三虎
陈明艳
刘卫
邓佳霖
机构
河南科技学院动物科学院
河南科技学院新科学院.新乡
新乡医学院实验动物中心
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期750-754,共5页
文摘
目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
关键词
来航鸡
FOXL2
单克隆抗体
表位
Keywords
Leghorn chicken
FOXL2
Monoclonal antibody
Epitope
分类号
Q38 [生物学—遗传学]
S831 [农业科学—畜牧学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
鲁毅
徐萍
李任峰
李超英
李学斌
王三虎
陈明艳
刘卫
邓佳霖
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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