低频率电刺激通过调控Rho/ROCK/NF-κB途径对癫痫大鼠作用的研究

目的探究低频率电刺激(LFS)对癫痫的作用及其可能的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、癫痫模型组、假刺激组和LFS治疗组,每组15只。记录大鼠Racine评分和脑电图,Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色和尼氏染色检测大鼠海马CA1区病理学变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;ELISA检测大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平;Western blotting检测大鼠海马RhoA、ROCK1、ROCK2、p65、p-p65和凋亡相关基因蛋白表达;RT-PCR检测大鼠海马RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA表达。结果癫痫模型组大鼠出现了连续性棘波。癫痫模型组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。癫痫模型组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量、Bcl-2蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LFS治疗组大鼠波峰下降。LFS治疗组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较假刺激组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LFS治疗组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量和Bcl-2蛋白表达较假刺激组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LFS可能通过抑制Rho/ROCK/NF-κB途径来抑制炎症产生,从而发挥抗癫痫作用。

低频率电刺激通过Ras同源基因/Rho相关蛋白激酶途径调节自噬对癫痫大鼠的作用研究

目的探究低频率电刺激(LFS)对癫痫的作用及其可能的作用机制。方法将60只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、癫痫模型组、假刺激组和LFS治疗组,每组各15只。氯化锂-匹鲁卡品法建立癫痫大鼠模型。记录大鼠Racine评分和脑电图,Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色检测大鼠海马CA1区病理学变化;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠海马神经细胞凋亡;Western blot检测大鼠海马Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)、ROCK2、自噬和凋亡相关蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠海马RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA表达。结果与对照组比较,癫痫模型组大鼠出现连续性棘波,Racine评分[(4.23±0.29)分]、逃跑潜伏期[(49.36±4.69)s]、神经细胞凋亡率[(27.52±2.95)%]和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X[Bax,(0.82±0.07)]、裂解-caspase3[c-caspase3,(1.70±0.15)]、微管相关蛋白1A/1B轻链3BⅡ/微管相关蛋白1A/1B轻链3BⅠ[LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,(5.20±0.42)]和Beclin1(0.73±0.05)蛋白表达水平明显升高(均P<0.05),RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05),游泳距离[(240.68±22.91)cm]、平台停留时间[(39.89±2.20)s]、神经细胞数量(17.13±3.14)、尼氏体数量(6.75±1.09)以及Bcl-2(0.24±0.02)和p62(0.20±0.02)蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与假刺激组比较,LFS治疗组大鼠波峰明显下降,Racine评分[(2.82±0.23)]分、逃跑潜伏期[(34.83±3.85)s]、神经细胞凋亡率[(9.25±0.91)%]及Bax(0.43±0.05)、c-caspase3(0.53±0.02)、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(1.17±0.11)和Beclin1(0.36±0.02)蛋白表达水平明显降低(均P<0.05),RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05),游泳距离[(284.21±22.36)cm]、平台停留时间[(46.85±2.93)s]、神经细胞数量(47.00±5.07)、尼氏体数量(33.75±2.90)和Bcl-2(0.87±0.07)、p62(0.96±0.05)蛋白表达水平明显升高(均P<0.05)。结论LFS可能通过抑制Rho/ROCK途径调节自噬发挥抗癫痫作用。