旨在研究秦川牛脂肪酸转位酶基因(Cluster of differentiation 36,CD36)的多态性及其对秦川牛肉用性状的影响,以探索改善秦川牛肉用性状的分子育种方法。本研究选取288头同等饲养条件下的24月龄健康秦川牛母牛,采用DNA测序技术检测了CD3...旨在研究秦川牛脂肪酸转位酶基因(Cluster of differentiation 36,CD36)的多态性及其对秦川牛肉用性状的影响,以探索改善秦川牛肉用性状的分子育种方法。本研究选取288头同等饲养条件下的24月龄健康秦川牛母牛,采用DNA测序技术检测了CD36基因的多态性,并结合PCR-RFLP技术对所发现的多态位点进行基因型分型,然后将不同基因型与秦川牛肉用性状(背膘厚、眼肌面积、眼肌深度和肌内脂肪含量)进行关联性分析。结果表明,在CD36基因上发现4个多态位点,分别命名为SV1、SV2、SV3和SV4。连锁不平衡和单倍型分析表明,SV1-SV2为连锁位点,与SV3为强连锁,SV4与其他3个位点均为弱连锁,单倍型ITA属于优势单倍型(频率为60.4%)。关联分析结果表明,除SV4在眼肌深度指标中存在显著性差异外,单个多态位点的基因型之间和不同多态位点的组合基因型之间均在肌内脂肪含量指标中存在显著性或极显著性差异。其中,IITTAG型个体在肌内脂肪含量指标中显著低于IWTCAA型个体(P<0.05),极显著低于WWCCAA型个体(P<0.01)。结果提示,CD36基因对秦川牛肉用性状有显著的影响,可通过人工选择降低群体中IITTAG型个体的比例以改善肉用性状。展开更多
目的分析MAGE A6在胃癌中的表达及其意义和对胃癌细胞生物学作用的影响。方法收集2009年12月-2010年6月医院样本库中经手术切除的90例胃癌组织芯片样本,利用免疫组化检测胃癌组织芯片中MAGEA6的表达情况,分析MAGEA6表达与胃癌临床病理...目的分析MAGE A6在胃癌中的表达及其意义和对胃癌细胞生物学作用的影响。方法收集2009年12月-2010年6月医院样本库中经手术切除的90例胃癌组织芯片样本,利用免疫组化检测胃癌组织芯片中MAGEA6的表达情况,分析MAGEA6表达与胃癌临床病理特征的关系,Kaplan-Meier在线分析MAGEA6表达与胃癌预后的关系。体外培养BGC-823胃癌细胞系,设置si-MAGEA6组(转染si-MAGEA6)与si-Ctrl组(转染空载体对照)。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测MAGEA6、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62蛋白(p62)、自噬相关基因5(Atg-5)蛋白、酵母ATG6同源物(Beclin 1)]、Akt/m TOR信号通路相关蛋白[蛋白激酶B (A k t)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)]的表达,扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察自噬小体形成情况和自噬流的变化。结果 MAGEA6在胃癌组织中的免疫组化评分高于癌旁组织[(3.77±1.50)分vs.(2.58±1.11)分,P<0.05]。MAGEA6高表达与年龄、TNM分期有关(P<0.05)。si-MAGEA6组胃癌细胞活力低于si-Ctrl组(P<0.05),细胞凋亡率高于si-Ctrl组(14.97%±0.86%vs.4.63%±0.55%,P<0.05)。si-M AGE A6组M AGE A6、Bcl-2、p62、p-Akt和p-m TOR表达水平低于si-Ctrl组,Bax、Atg-5、Beclin 1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于si-Ctrl组(P<0.05)。si-MAGE A6组胃癌细胞胞质内自噬小体明显增多,且自噬小体与溶酶体形成自噬溶酶体。结论 MAGEA6在胃癌组织中呈高表达,沉默MAGEA6的表达可抑制胃癌细胞增殖。MAGEA6可能是胃癌有效的生物标志物及潜在的治疗靶点。展开更多
文摘旨在研究秦川牛脂肪酸转位酶基因(Cluster of differentiation 36,CD36)的多态性及其对秦川牛肉用性状的影响,以探索改善秦川牛肉用性状的分子育种方法。本研究选取288头同等饲养条件下的24月龄健康秦川牛母牛,采用DNA测序技术检测了CD36基因的多态性,并结合PCR-RFLP技术对所发现的多态位点进行基因型分型,然后将不同基因型与秦川牛肉用性状(背膘厚、眼肌面积、眼肌深度和肌内脂肪含量)进行关联性分析。结果表明,在CD36基因上发现4个多态位点,分别命名为SV1、SV2、SV3和SV4。连锁不平衡和单倍型分析表明,SV1-SV2为连锁位点,与SV3为强连锁,SV4与其他3个位点均为弱连锁,单倍型ITA属于优势单倍型(频率为60.4%)。关联分析结果表明,除SV4在眼肌深度指标中存在显著性差异外,单个多态位点的基因型之间和不同多态位点的组合基因型之间均在肌内脂肪含量指标中存在显著性或极显著性差异。其中,IITTAG型个体在肌内脂肪含量指标中显著低于IWTCAA型个体(P<0.05),极显著低于WWCCAA型个体(P<0.01)。结果提示,CD36基因对秦川牛肉用性状有显著的影响,可通过人工选择降低群体中IITTAG型个体的比例以改善肉用性状。
文摘目的分析MAGE A6在胃癌中的表达及其意义和对胃癌细胞生物学作用的影响。方法收集2009年12月-2010年6月医院样本库中经手术切除的90例胃癌组织芯片样本,利用免疫组化检测胃癌组织芯片中MAGEA6的表达情况,分析MAGEA6表达与胃癌临床病理特征的关系,Kaplan-Meier在线分析MAGEA6表达与胃癌预后的关系。体外培养BGC-823胃癌细胞系,设置si-MAGEA6组(转染si-MAGEA6)与si-Ctrl组(转染空载体对照)。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测MAGEA6、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62蛋白(p62)、自噬相关基因5(Atg-5)蛋白、酵母ATG6同源物(Beclin 1)]、Akt/m TOR信号通路相关蛋白[蛋白激酶B (A k t)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)]的表达,扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察自噬小体形成情况和自噬流的变化。结果 MAGEA6在胃癌组织中的免疫组化评分高于癌旁组织[(3.77±1.50)分vs.(2.58±1.11)分,P<0.05]。MAGEA6高表达与年龄、TNM分期有关(P<0.05)。si-MAGEA6组胃癌细胞活力低于si-Ctrl组(P<0.05),细胞凋亡率高于si-Ctrl组(14.97%±0.86%vs.4.63%±0.55%,P<0.05)。si-M AGE A6组M AGE A6、Bcl-2、p62、p-Akt和p-m TOR表达水平低于si-Ctrl组,Bax、Atg-5、Beclin 1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于si-Ctrl组(P<0.05)。si-MAGE A6组胃癌细胞胞质内自噬小体明显增多,且自噬小体与溶酶体形成自噬溶酶体。结论 MAGEA6在胃癌组织中呈高表达,沉默MAGEA6的表达可抑制胃癌细胞增殖。MAGEA6可能是胃癌有效的生物标志物及潜在的治疗靶点。