褪黑素的生物合成及对繁殖性能的影响

褪黑素是一种广泛存在于动物体内的激素,不仅能够调节动物昼夜节律,还能够从多方面影响动物的繁殖性能,对于季节性繁殖动物,褪黑素根据日照时长的变化表现出抑制或促进繁殖性能的作用。对于幼年动物,褪黑素表现出抑制发情的作用,体成熟后则表现促进发情的作用。褪黑素主要通过下丘脑-垂体-性腺轴调控动物繁殖活动,除此之外,褪黑素还能够直接作用于生殖系统甚至早期胚胎,通过提高组织及细胞抗炎及抗氧化功能来改善动物繁殖性能。目前,褪黑素能够用于治疗精神疾病及炎症、促进畜禽繁殖和调节昼夜节律,是相关研究领域的热门话题。本文详细描述了褪黑素的生物合成以及分泌调控,并结合褪黑素的生理功能,阐述了对动物繁殖性能以及辅助生殖的影响。

基于聚类分析和判别分析的蛋壳颜色分级方法研究

为制定客观、准确的蛋壳颜色分级体系,研究在用Lab体系量化蛋壳颜色的基础上提出了一种蛋壳颜色分级标准的建立方法,先确定合适的聚类簇个数k,通过K-均值聚类分析处理训练样本,再通过贝叶斯判别分析检验聚类效果并获得各等级判别式,最后据此对测试样本进行分类,计算色差以检验分类效果。结果显示:训练样本的分类准确率达95.0%,测试样本各类别间颜色差异大,类别内颜色一致性较高,表明其分类效果良好。依据该方法可以针对特定群体构建专用分级标准,实现蛋壳颜色的合理分级与精准判定,进而为蛋壳颜色整齐度的提高提供指导。

川南肿瘤防治中心肿瘤日间诊疗模式探索及成效分析

目的:开设以肿瘤患者为核心的肿瘤日间诊疗模式,并分析该模式的运行效果。方法:在川南肿瘤防治中心设置肿瘤日间病房,收治中心日间治疗患者,构建日间诊疗管理制度,总结管理结果,分析成效。结果:川南肿瘤防治中心2018—2021年收治肿瘤患者共39810人次,其中日间病房收治患者16097人次,占中心收入的37%,日间病房平均预约等待时间为0.4d(中心的住院部为7.2d),日间病房的建立使中心的平均住院日由11.2d降至10.8d,次均费用由14354元降至13248元。结论:日间诊疗模式的建立,缩短了患者的预约时间,减轻了患者的经济压力,缓解了医患双方矛盾,提高了诊疗效率,提高了肿瘤防治中心的运行效率。

基于F-2群体的鸡重要生长性状遗传分析

采用Ｆ－２设计，以丝羽乌骨鸡（Ｃ系）为一亲本，分别与农大褐蛋鸡（Ｂ系），及法国明星肉 鸡（Ａ系）进行正反交，产生了包含Ａ × Ｃ，Ｃ × Ａ；Ｂ × Ｃ，Ｃ × Ｂ ４个杂交组合的Ｆ２代群体，建 立了可用于定位产肉及产蛋等性状ＱＴＬ的资源群体。基于这一Ｆ－２群体，对体重及日增重等 性状表型值进行分析，结果显示，亲本间均值差异显著，分离群体变异大，这组性状间有中等 或较高的相关，各性状潜在的ＱＴＬ座位数不超过１０，所建资源家系能够满足ＱＴＬ定位所需的 样本数量，达到了预期的效果。

隐性白羽肉鸡(农大系)与黑羽地方鸡种杂交效果分析

隐性白羽肉鸡 (农大系 )是中国农业大学利用从法国引进的快大型肉鸡选育而成的隐性白纯系 ,具有隐性白基因纯合 ,生长速度快 ,饲料转化率高等特点。本实验将这一隐性白品系与某地方优质兼用型鸡种———该鸡种具有肉质风味好 ,黑羽、黑胫等特征 ,做正反交杂交试验 ,并使用两种饲料营养水平作对比 ,对隐性白与地方鸡种杂交生产优质商品肉鸡的效果进行了分析。结果表明 ,以地方鸡为父本 ,隐性白羽肉鸡为母本杂交效果好 ,杂种鸡肉质明显优于快大型肉鸡 ,生长速度在 9周龄达到 1 .5kg ,符合半优鸡上市要求 ,并且 ,杂种鸡保持了地方鸡种的黑羽、青脚等外貌特征 ,该杂交组合还可通过胫色自别雌雄。

Ex-FABP作为鸡腹脂性状主要候选基因的研究

细胞外脂肪酸结合蛋白(extracellular fatty acid-binding protein,Ex-FABP)基因是脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein,FABP)家族的另一成员,参与鸡的脂肪酸、肌纤维、骨骼等调控过程.利用PCR-SSCP(single strand conformation polymorphism)和DNA测序的方法,对不同品种的杂交鸡进行了Ex-FABP基因5'调控区部分序列的多态性分析,发现了3个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点.其中,此片段中的碱基C(-1000)的插入和碱基T→C(-1011)的突变,导致此处比野生型基因少了1个cap,多了1个Nkx-2、1个AhR/Ar和2个CF1等转录因子结合位点的产生.利用SAS软件对Ex-FABP基因5'调控区的SNPs与屠体性状的最小二乘分析,发现基因型BB(突变型)与腹脂重存在极显著相关(P<0.01).研究结果表明,细胞外脂肪酸结合蛋白(Ex-FABP)基因是影响脂肪沉积、控制腹脂性状的主要候选基因.

MC1R是控制鸡黑色素形成的候选主效基因

黑素皮质素受体 1(melanocortin 1 receptor ,MC1R)基因是控制动物黑色素合成的重要基因 .采用多聚酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)以及DNA测序的方法 ,在由丝羽乌骨鸡与明星肉鸡为亲本建立的中国农业大学资源家系群体鸡MC1R基因的编码区检测到 3个单核苷酸多态位点 ,并对该单核苷酸多态性进行了分析 .结果显示 ,鸡MC1R基因编码区引物 3扩增片段多态性是由G→A (86 7位 )点突变引起的 ,引物 5扩增片段的多态性是由C→T (12 92位 )与C→G (1377位 )两个点突变引起的 ,最后对单核苷酸多态性与肤色、肉色、胫色与内脏膜色等黑色素性状进行了卡方独立性分析 ,结果显示 ,MC1R基因编码区 86 7处突变与鸡的肤色性状显著相关 (P <0 0 5 ) ,12 92处突变与鸡的活体胫色性状显著相关 (P <0 0 5 ) ,1377处突变与鸡的肉色性状显著相关 (P <0 0 5 ) .研究表明 。

鸡类胰岛素生长因子-Ⅱ基因单核苷酸多态与生长、屠体性状相关性的研究

以鸡类胰岛素生长因子 -Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因作为控制鸡生长、屠体性状主基因的候选基因 ,以明星肉鸡和丝毛乌骨鸡杂交产生的F2 代鸡群为实验材料。通过PCR -RFLP方法对IGF -Ⅱ基因进行多态性检测。在该基因外显子 2中发现一处碱基突变 ,可由内切酶Aci-Ⅰ酶切证实 ,但未导致氨基酸改变。对F2 鸡群个体进行了基因型鉴定 ,结果经方差分析显示 :该基因对一些生长、屠体性状有显著性影响 (如胸角宽、腺胃重、半净膛重等 )。表明该基因可能调控鸡生长、屠体性状的表达 ,或与控制生长、屠体性状的主基因连锁。

影响动物肉质性状主要候选基因的研究进展

随着分子生物学在动物遗传育种中的应用,对数量性状主效基因的研究成为必然。本文对影响肉质的脂肪酸结合蛋白基因、肥胖基因、leptin基因、黑素皮质受体基因、脂蛋白脂酶基因、激素敏感脂酶基因的国内外研究状况加以综述。

乌鸡黑色素对果蝇的紫外辐射保护作用

对黄体果蝇进行紫外辐射处理后,在含0.02或0.2mg/mL乌鸡黑色素的培养基中培养,通过测定果蝇寿命、繁殖力和SOD比活性来分析黑色素的紫外辐射保护作用。结果显示:果蝇在5min紫外辐射+0.2mg/mL黑色素组的下四分位(14.5±1.3)d、上四分位寿命(23.5±2.1)d以及平均寿命(15.7±7.1)d显著(P<0.05)高于5 min紫外辐射组(8.0±1.4)、(16.0±3.3)和(13.5±6.4)d。每对亲本果蝇在2min紫外辐射+0.2mg/mL黑色素组繁殖子代(50.0±11.4)只比2min紫外辐射组提高了156.4%(P<0.05)。另外,黑色素可能对辐射处理果蝇体内SOD比活性有保护作用,果蝇在5min紫外辐射+0.02mg/mL黑色素组和5min紫外辐射+0.2mg/mL黑色素组的SOD比活性((209.1±13.1)和(213.25±7.7)μmol/(mg.min))高于5min紫外辐射组((204.2±11.5)μmol/(mg.min)),但差异均不显著。本试验发现乌鸡黑色素能够延长辐射处理果蝇的寿命,提高繁殖力,对其SOD活性可能也具有保护作用。上述作用或许与黑色素清除自由基的特性有关,同时,2min紫外辐射+0.2mg/mL黑色素组高繁殖力的原因可能还与黑色素对果蝇生殖细胞的保护有关。

SLCO1C1基因与鸡绿壳蛋形成的关系

【目的】分析位置候选基因SLCO1C1与绿壳蛋形成的关系,为绿壳蛋鸡提纯提供参考。【方法】以江西东乡绿壳蛋鸡为研究对象,以同群体的褐壳蛋鸡为对照,检测SLCO1C1基因上游6.5kb区域内的序列变异情况;采用Real-time PCR法检测SLCO1C1在蛋鸡脑、肝、脾、蛋壳腺中的表达情况,用3′RACE法克隆SLCO1C1 3′UTR,用PCR-RFLP法检测Ala528Glu错义突变基因型。【结果】在SLCO1C1基因上游6.5kb区域内共发现了33个单核苷酸变异(SNP),这些SNP与绿壳性状显著关联(P<0.05)。表达结果显示,SLCO1C1基因只在蛋鸡脑中表达,且在绿壳蛋鸡(n=5)与褐壳蛋鸡(n=5)间的表达无显著差异(P>0.05)。序列比对结果显示,绿壳蛋鸡与褐壳蛋鸡的SLCO1C1 3′UTR同源性为100%。在SLCO1C1基因11号外显子上发现了一个错义突变Ala528Glu,Glu突变与绿壳性状显著关联(P<0.05),且Glu突变在其他产绿壳蛋的鸟类中也存在。【结论】SLCO1C1可能通过间接途径影响胆绿素的转运,从而影响绿壳蛋的形成。SLCO1C1基因内存在大量的与绿壳性状显著关联的SNP,表明控制绿壳性状的O基因很可能就在SLCO1C1附近。

鸡apoA5基因单核苷酸多态性及其与屠体性状的关联研究

以丝羽乌骨鸡和隐性白洛克正反交产生的F2代为实验群体,采用PCR-SSCP和DNA测序的方法检测鸡载脂蛋白A5(apoA5)基因的单核苷酸多态性(SNPs),并将所发现的SNPs与体重、胸肌重、腿肌重、心脏重、肝脏重和腹脂重等屠体性状进行关联分析。结果发现,鸡apoA5基因5′-调控区C-169T,外显子2C600T、T635C,外显子3C841G、C914T、C1142G、C1394T共7个突变位点。其中外显子2突变位点C600T、T635C对12周龄腹脂重、腹脂率、肝脏重和心脏重有显著影响(P<0.05),根据PCR-SSCP的结果将其分为6种基因型(AA,AB,AC,BB,BC,CC):其中CC型个体的腹脂重和腹脂率显著高于AA型、AB型、AC型、BB型、BC型(P<0.05);AC型个体的肝脏重显著低于AA型、AB型、BB型、BC型和CC型的肝脏重(P<0.05);BC型个体的心脏重显著低于BB型的心脏重(P<0.05)。

应用创造酶切位点法检测单碱基突变

应用引物错配技术结合单碱基突变位点而配合成一个酶切位点,使之成为可用PCR-RFLP方法分析的突变位点,是对单碱基突变位点进行基因型鉴定的有效而简捷的手段。本文以鸡胞外脂肪酸结合蛋白(Extracelluarfattyacidbindingprotein,EX-FABP)基因单碱基突变的基因型检测为例,探讨了应用创造酶切位点PCR(CreatedRe strictionSitePCR,CRS-PCR)检测单碱基突变基因型的思路、方法和策略。

鸡细胞外脂肪酸结合蛋白基因编码区的单核苷酸多态与腹脂性状的相关研究

以明星肉鸡和丝毛乌骨鸡杂交产生的F2鸡群为实验材料,以鸡细胞外脂肪酸结合蛋白基因为影响鸡脂肪性状的候选基因,对该基因编码区和部分内含子用PCR—SSCP(单链构象多态)法进行单核苷酸多态性检测.其中在检测的内含子中有3处碱基突变;在第5外显子中有一处沉默突变.对鸡腹脂性状进行最小二乘分析,结果表明第9对引物扩增的具有HH型基因片段的鸡与GG,II型相比有较低的腹脂重和腹脂率(P<0.001),表明该基因对于鸡腹脂蓄积具有很大的影响或与控制腹脂性状的主基因连锁.

白色基因座(I)在中国地方猪种毛色遗传中的作用研究

通过利用PCR RFLP和PCR SSCP技术对中国地方猪种KIT基因内含子17、18的序列进行多态性分 析。结果表明:内含子17上的替换突变(G→A)发生于毛色为白色的个体———白色五指山猪、大白猪、长白猪上, 其基因型(AB型)频率分别为1、1和0.8;其他中国地方猪种的此基因型频率均为0。内含子18上的缺失突变 (AGTT)也同样发生在上述3个猪种的白色个体中,其基因型(AA型)频率分别为1、1和0.93;而且同样在其他 的地方品种中其基因型频率均为0。这充分证明KIT基因对于猪的白毛色有重要的调控作用,而且I基因座对于 其他的经典遗传基因座有上位作用。另一方面,中国地方猪种荣昌猪虽然在表型上与引入猪种大白猪、长白猪相 似(白毛色),但是在KIT基因上发生的突变完全不同,推测它们分别属于不同的毛色遗传体系。

对中国农业大学鸡资源群进行基因组扫描的初步分析

利用PCR结合荧光半自动检测技术对中国农业大学鸡资源家系的 1个包括 4 4 0个个体的 3代群体进行了大规模基因组扫描 ,分析了 5 5个微卫星标记位点。经家系分析表明 ,这些位点都符合孟德尔共显性遗传规律 ,其杂合度在 0～ 0 86之间 ,其中 72 %的位点的杂合度 >0 6 0 ;多态信息含量在 0～ 0 88之间 ,73%的位点的PIC >0 5 0。A系和C系群体在 5 5个位点中的绝大多数位点上存在非共有等位基因 ,两个品系在大多数位点的等位基因和等位基因频率差异显著 (P <0 0 5 ) ,许多位点差异达到极显著水平 (P <0 0 1) ;C系显示出更高的群体整齐度。利用 5 5个微卫星位点的等位基因频率 ,计算出A系和C系的奈氏群体间相似系数I和标准遗传距离D分别为0 10 0 2和 0 892 8。

鸡lmbr1基因内含子多态与趾型的关联

【目的】多趾是丝羽乌骨鸡的品种特征之一,但其多趾发生的分子机制尚未知。Lmbr1基因是人和鼠轴前多趾的关键候选基因,其同源基因是否是鸡多趾表型的关键候选基因值得研究。【方法】本研究以多趾的丝羽乌骨鸡和四趾的白洛克肉鸡杂交建立的资源家系为研究素材,采用直接测序和PCR-SSCP相结合的方法进行了鸡lmbr1基因内含子13的克隆、多态分析及其在不同物种的序列保守性比较、单体型分析及单核苷酸多态与趾型的关联分析。【结果】从内含子13检测到4个SNPs,发现这些单核苷酸多态构成的单体型在丝羽乌骨鸡和白洛克肉鸡间的分布呈现明显的差异,PCR-SSCP基因型在资源家系亲代和F2代均呈现与趾型的显著关联。【结论】鸡lmbr1基因内含子13变异与调控鸡多趾表型的特异性位点紧密连锁,鸡lmbr1基因应是鸡多趾表型的重要候选基因,今后应进一步加大鸡lmbr1基因全基因组水平和其临近区域基因的检测。

鸡多趾性状和候选基因

鸡的常见趾型为四趾 ,多趾是丝羽乌骨鸡和一些地方鸡种的品种特征 ,鸡多趾性状为不完全显性。鸡 2p染色体与人 7q36及小鼠 5号染色体为同源区间。性状定位和比较基因组分析表明 ,鸡 2p染色体是鸡多趾性状的关键候选区间。

鸡脂肪酸结合蛋白基因的克隆和测序分析

根据哺乳动物脂肪酸结合蛋白基因序列设计一对引物对鸡基因组进行PCR扩增 ,将 16 3bp扩增片段进行克隆和测序 ,并与猪的脂肪酸结合蛋白 (fattyacidbindingprotein ,FABP)基因序列进行同源性比较 ,该基因片段与猪的心脏脂肪酸结合蛋白 (heartfattyacidbindingprotein ,H FABP)基因有 6 8%的同源性 ,与猪的脂肪型脂肪酸结合蛋白(adipocytefattyacidbindingprotein ,A FABP)基因有 75 %的同源性 ,演绎成氨基酸之后与猪的脂肪型脂肪酸结合蛋白相应的氨基酸有 75 %的同源性。

猪肌肉生长抑制素基因侧翼区新微卫星标记的鉴定及分析

提取包含猪肌肉生长抑制素基因的BAC克隆 ,以EcoRⅠ进行酶切并回收其中大于 4kb的酶切产物 ,连接到pGEM 3zf(+)载体后得到了亚克隆。测序分析表明 ,插入片段不属于猪肌肉生长抑制素基因的一部分 ,但其中包含 13拷贝的 (TG)n重复。以该重复序列的侧翼设计引物对猪的基因组进行分析 ,得到了PCR扩增产物。对一个“双肌臀”大白猪家系进行PCR扩增及非变性聚丙烯酰胺凝胶分析的结果表明 ,该位点以并显性方式遗传 ,是一个新的微卫星标记。对莱芜猪、长白猪、大白猪、杜洛克、皮特兰、民猪和二花脸 7个品种的 381个无关个体的检测均显示该基因座只有两个等位基因 ,重复数分别为 13和 19,是一种多态性较低的微卫星标记。与包含该基因的序列(AY2 0 812 1)比对分析表明 ,该微卫星属于肌肉生长抑制素基因 (MSTN)侧翼区的一个分子标记 ,在猪肉用性状QTL的精细定位和MSTN功能分析中将发挥重要作用。