鹿肠毒血症的病原学诊断

本研究采用对送检脏器触片观察、细菌分离培养、形态学观察和药敏试验等方法,对赤峰市某鹿场病死鹿的小肠、肝脏、肺脏等组织进行了细菌分离鉴定。结果表明所分离细菌为魏氏梭菌,该菌对氧氟沙星、左氟沙星、菌必治、舒普深、阿莫西林高度敏感,对氯霉素、妥布霉素、卡那霉素、链霉素、氟苯尼考、强力霉素中度敏感,对阿米卡星、新霉素、庆大霉素有耐药性[1]。

锡盟地区混合干草的营养物质含量和牛羊最低的营养需要差异性的研究

健康牛羊在体重不增不减、不进行任何生产活动(生长、繁殖、产奶、育肥、产毛等)以及处于休闲或逍遥运动时,体内各种养分处于收支平衡状态的营养需要,也即维持其基本生命活动所需要的最低营养物质,从打贮草中获得。选用“锡盟贮草站敖库思混合干草”作为混合干草营养成分样本,测定干草主要元素的安全标准,并做了牛羊最低的营养需要和干草主要元素的安全标准比较,结果显示需要人为添加包含牛羊缺乏的营养物质的饲料才能达到其维持生长的需求,为锡林郭勒盟地区牛羊异食癖证的防治提供了科学依据。

PRRSV 2b蛋白与LGALS1相互作用的验证研究

旨在研究猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用。本研究利用酵母回返试验、GST-pull down试验、免疫共沉淀试验3种方法对LGALS1与PRRSV 2b蛋白间是否相互作用进行验证。结果表明:在酵母回返试验中,含有LGALS1与2b基因的杂交酵母菌株在SD/-Trp-Leu-His-Ade/AbA/X-α-gal的平板上生长出蓝色菌落;在GST-pull down试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经Western blot可检测到融合蛋白带;在免疫共沉淀试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经HA单抗沉淀后,经Western blot可检测到相应蛋白带。该研究证明了LGALS1与PRRSV 2b蛋白间发生相互作用,为研究PRRSV感染途径和增殖过程提供了理论基础。

猪肺泡巨噬细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)与猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)蛋白质间相互的作用,本研究使用SMART技术成功构建了猪肺泡巨噬细胞酵母双杂交cDNA文库。首先提取PAM总RNA,使用SMART RACE法经LD PCR合成双链cDNA,运用SMART技术,通过同源重组的方法将双链cDNA与pGADT7-Rec质粒共转化进酵母Y187感受态,再利用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选阳性克隆,最终构建的文库滴度达到了6.96×10~7 CFU/mL,重组率初步计算达到95%,插入片段范围在200~2 000bp。本研究为PRRSV致病蛋白的筛选以及相关疾病的研究奠定了基础。

禽坦布苏病毒的研究进展

近年来,我国许多鸡、鸭主要养殖区相继出现以产蛋率急剧下降,卵巢出血为主要病变,以死淘率高、发病急、传播迅速为特点的禽类疾病。目前认为该病由一种新型的未分类黄病毒——坦布苏病毒引起,给中国的禽类养殖业造成了巨额损失。本文就禽坦布苏病毒病的生物学特性、临床症状及病理变化、基因组及编码蛋白、检测方法的建立等研究进展作一综述,以期为该病的深入研究提供参考。

PRRSV 2b蛋白互作宿主细胞蛋白的筛选

目的通过酵母双杂交筛选技术从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)c DNA文库中筛选与猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白互作的宿主细胞蛋白。方法将PRRSV 2b基因扩增产物克隆至p GBKT7质粒上,构建重组钓饵载体p GBKT7-2b,转化至Y2H Gold酵母感受态中制备钓饵菌株后,进行自激活和毒性检测;将PAM c DNA文库菌株与钓饵菌株进行杂交融合,经DDO/X/A平板筛选后,对筛选的菌株进行PCR鉴定及测序分析。结果构建的钓饵菌株无毒性和自激活现象;共获得LGALS1、RPL12、LGALS3和RPS20 4种蛋白。结论成功构建了可用于双杂交筛选的钓饵菌株,筛选出4种与PRRSV 2b蛋白互作的PAM蛋白,其中LGALS1出现概率最高。