大剂量甘露醇反复静脉输注的肾毒性作用

文献报道甘露醇可引起急性肾功能衰竭。近几年来,甘露醇对肾脏毒性和可导致的内环境紊乱等并发症越来越受到重视。为了探讨甘露醇的毒性作用,本文对大剂量反复经静脉用药的85例患者进行了临床总结,现报告如下。1 资料与方法 1.1 病例:选自1983年1月至1991年7月我院住院病人75例和武汉市黄陂县医院10例,共85例。其中:蛛网膜下腔出血49例,结核性脑膜炎28例,脑溢血5例,脑栓塞2例,脊髓瘤1例。男41例,女44例;年龄20～74岁,平均39岁。

复方氨基酸在IPD中的超滤价值

对6例腹透病人观察了用含1.5%与4.25%葡萄糖的乳酸盐腹透液1000ml加9.12%复方氨基酸125ml作IPD治疗的超滤价值。结果表明:常用腹透液中加一定量的复方氨基酸的超滤量较不加复方氨基酸显著增多(P<0.01).含4.25%葡萄糖乳酸盐腹透液1000ml加9.12%复方氨基酸125ml留腹1小时的平均超滤量最大,用等量1.5%葡萄糖乳酸盐腹透液加复方氨基酸留腹半小时可取得含该浓度葡萄糖腹透液的最大平均超滤量。

高糖通过SGK_1通路促进人肾小球系膜细胞合成结缔组织生长因子

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生结缔组织生长因子(CTGF)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制。方法HMC分为低糖组(5·5mmol·L-1D-葡萄糖)、高糖组(25mmol·L-1D-葡萄糖)和甘露醇对照组(19·5mmol·L-1甘露醇和5·5mmol·L-1D-葡萄糖),刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和West-ernblot方法检测CTGFmRNA及蛋白的表达;将带有SGK1显性激活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-S422DhSGK1,SD)和带有SGK1显性失活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-K127NhSGK1,KN)分别瞬时转染HMC;同时,设空质粒(PIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照。分别用低糖(LG,5·5mmol·L-1D-葡萄糖)和高糖(HG,25mmol·L-1D-葡萄糖)刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CT-GF的mRNA及蛋白的表达。结果与低糖组和甘露醇组相比较,在高糖刺激下,HMC中CTGF mRNA及蛋白的表达明显上调;低糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGFmRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达差异无显著性;高糖环境下转染SD的HMC与转染KN、转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显减少。结论在DN中,高糖能促进HMC的CTGF mRNA及蛋白的表达,并且可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成CTGF,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能通过促进CTGF的合成来参与糖尿病肾病肾小球纤维化的发生。

苦参碱对腺嘌呤致大鼠肾小管-间质纤维化的影响

目的采用腺嘌呤诱导大鼠肾间质纤维化的模型,进一步了解苦参碱在肾小管-间质纤维化中的防治作用及其机制方法60只雄性大鼠随机分为3组:①正常对照组8只;②病理组28只;③治疗组24只按250 mg·kg-1·d-1给大鼠灌服腺嘌呤,连续21 d灌暇腺嘌呤1周后,治疗组每天还按20 mg·kg-1·d-1的剂量用苦参碱腹腔注射,分别观察治疗2,3,4周,3个不同时间点,正常对照、病理组和治疗组的血清肌酐、尿素氯、血清IL-6和肾小管间质的TGF-β1表达和肾组织病理改变等指标的变化,用放射免疫法检测血清IL-6的水平,免疫组化SABC法检测肾小管间质中的TGF-β1蛋白的表达和分布,采用HPIAS- 1000型全自动彩色图像分析系统,对免疫组化染色阳性信号进行扫描,半定量分析各组阳性表达面积百分比,肾组织HE染色丰定量分析各组肾小管-间质损伤指数结果苦参碱治疗组大鼠的血清肌酐、尿素氮与同期病理组比较,有明显的改善(P <0.05);血清IL-6水卓、肾小管间质的TGF-β1蛋白表达显著低于同期病理组(P<0.05),但均高于正常对照组(P<0.01) 苦参碱治疗的各组肾小管间质损伤指数低于病理组(P<0 05)。结论在腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化过程中,苦参碱能降低其血清BUN,Scr,IL-6水平和TGF-β1蛋白在肾小管间质中的表达,阻抑肾间质纤维化的进展,并有相应的时效关系。说明苦参碱对腺嘌呤导致肾间质纤维化大鼠模型的肾功能有一定保护作用,并可减轻肾间质纤维化的改变。

结缔组织生长因子在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏中的表达及其意义

目的:观察结缔组织生长因子(CTGF)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中的动态表达,探讨CTGF在肾小管间质纤维化中的作用机制。方法:将48只Wistar大鼠随机分为UUO组和假手术(SO)组,采用左输尿管结扎术复制UUO模型,于术后1、3、7、14d分别处死2组大鼠取左肾。采用Masson染色评定肾小管间质损伤程度;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、CTGF、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)mRNA表达;免疫组织化学方法测定TGF-β1、CTGF、ColⅠ、PAI-1表达;Westernblotting方法检测CTGF蛋白表达量的变化。结果:UUO术后1d,梗阻肾TGF-β1mRNA表达开始升高,第3-14d时升高更显著(P<0.01),CTGF、ColⅠ、PAI-1mRNA水平随之逐渐升高。免疫组织化学染色发现,UUO大鼠肾小管和间质区域CTGF表达随病程进展逐渐增强;相关分析显示,UUO术后第7d,CTGF表达量与肾小管间质损伤指数、肾小管间质TGF-β1、ColⅠ、PAI-1表达强度均呈正相关,相关系数(r)分别为0.62、0.85、0.78和0.76(均P<0.01)。Westernblotting结果显示,CTGF蛋白水平在术后第3d开始上升,随病程进展更显著。结论:CTGF可通过促进细胞外基质产生和抑制细胞外基质降解双重途径诱导肾小管间质纤维化的发生和进展。

CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用

本文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)在足细胞分化过程中的作用。用RPMI1640培养基在33oC许可条件下培养永生化小鼠足细胞系(未分化组),转染针对CD2AP的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后置于37oC非许可条件下培养(转染组),并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT法检测足细胞的生长速度;用RT-PCR方法检测CD2AP、WT1、synaptopodin和nephrin mRNA表达;用Westernblot检测CD2AP、WT1和nephrin蛋白表达;用免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、F-actin和tubulin在分化及未分化足细胞中的分布及其共定位情况。结果显示,CD2AP、WT1和nephrin在分化及未分化足细胞中均可稳定表达,而synaptopodin仅表达于已分化足细胞,在未分化足细胞无表达。在足细胞分化过程中,CD2AP和nephrin的表达上调(P<0.05);CD2AP、tubulin和F-actin在细胞内的分布发生改变,CD2AP与nephrin及F-actin在未分化足细胞中存在共定位关系。转染特异性siRNA下调CD2AP表达,细胞生长速度明显减慢,synaptopodin mRNA表达下调(P<0.05),细胞分化迟滞。结果表明,足细胞分化过程中伴随细胞骨架的重新分布和细胞形态的改变;CD2AP可能作为足细胞裂孔隔膜分子与细胞骨架的连接蛋白,在足细胞分化过程中发挥重要作用。

罗格列酮抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的 探讨过氧化物酶体增生物激活受体 γ激动剂———罗格列酮对单侧输尿管梗阻 (UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法 将 30只Wistar大鼠随机分成罗格列酮治疗组、模型组和假手术组。对治疗组 ,模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第 2 1天取 3组术侧肾组织做HE和Masson三色病理染色及用免疫组化方法检测α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)、转化生长因子 β1(TGF β1)和Ⅰ型胶原 (ColⅠ )在肾组织的表达水平。结果 罗格列酮可显著下调α SMA、TGF β1的表达 ,减轻Ⅰ型胶原在肾间质中的沉积 ,改善了肾脏病理改变。

肾组织肥大细胞的形态学特点及染色方法

目的 探索检测肾组织肥大细胞的理想方法 ,研究肾组织中肥大细胞的分布和形态特点。方法 用免疫组织化学方法和 4种不同pH值的甲苯胺蓝染液对 4 6例肾小球肾炎患者肾活检标本进行染色 ,观察肥大细胞在不同时间点的染出数及分布、形态特点 ,比较几种方法肥大细胞的显示数 ,并与免疫组织化学结果对照 ,计算每种染液的染出率。同时用透射电镜进一步观察肥大细胞的形态及超微结构。结果 肥大细胞数量比较 :pH 0 5与 1 0组无差别 ,其余的两两比较差异都有显著性 ,几种染液显示的肥大细胞相对于免疫组化结果的染出率分别是 78 8% (pH 0 5 ) ,79 4 % (pH 1 0 ) ,5 6 9% (pH 3 0 ) ,10 2 % (pH 5 0 )。电镜观察到幼稚、成熟和脱颗粒的形态不一的肥大细胞。 结论 ①免疫组织化学染色效果最好 ,其次是 pH值 0 5和 1 0的甲苯胺蓝染液 ,pH 5 0染液的效果最差。②肾组织肥大细胞形态多样 。

大鼠残肾细胞凋亡及凋亡相关基因的动态表达及意义

目的:研究在5/6肾切除大鼠不同时段残肾组织中肾实质细胞凋亡及相关基因Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9 mRNA、蛋白质的动态表达变化及其意义。方法:SD大鼠5/6肾切除后,分别在1周、2周、4周、8周、12周、16周、26周、40周采集标本,普通光镜、电镜观察残肾病理改变、TUNEL法检测肾脏细胞凋亡、RT-PCR和Western blotting检测残肾组织凋亡相关基因mRNA和蛋白质的变化、免疫组织化学进行蛋白质定位,分析凋亡、增殖与肾小球硬化和间质纤维化的相关关系。结果:5/6肾切除后大鼠残肾出现进行性肾小球硬化及间质纤维化病变。肾增殖与凋亡水平高于对照组,肾实质凋亡细胞以肾小管上皮细胞和肾间质细胞为主。肾小球凋亡指数与肾间质炎细胞浸润和24h尿蛋白呈显著正相关(r=0.788、r=0.822,P<0.01);肾小管凋亡指数与血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白、炎细胞浸润指数呈显著正相关(r=0.824、0.794、0.883、0.948,P<0.01)。促凋亡相关基因Bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9 mRNA及相应蛋白质明显增加且表达一致,在病变过程中呈波浪式上调,高峰分别在4周和40周,这些变化与肾间质炎细胞浸润指数的变化呈显著正相关(P<0.01);抑制凋亡因子Bcl-2表达与对照组比较无明显差异。结论:细胞凋亡参与肾小球硬化、肾小管萎缩及间质纤维化的过程,肾间质炎细胞的浸润更促进残肾凋亡的发生。

大鼠足细胞损害后肾小球血管生成素的异常表达及其意义

目的:探讨大鼠足细胞损害后,内源性血管生成素的异常变化及其在进行性肾小球硬化中的病理作用。方法:选择柔红霉素诱导足细胞损害的大鼠模型作为研究对象,80只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术(sham)组25只、单侧肾切除(UNx)组25只和UNx+柔红霉素(DRB)组30只。DRB组大鼠,摘除左肾后的第7、14d,从尾静脉注射柔红霉素5mg.kg-1各1次。然后,分别于造模后的第1、2、4、6、8周,随机取各组大鼠5只,收集24h尿量,采血取肾,检测24h尿蛋白定量(24hUPQ)、血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN),用PAS染色、免疫组化、原位杂交和透射电镜技术进行病理形态学分析。结果:DRB组的24hUPQ、BUN、Scr显著高于相同时点的sham组和UNx组;肾小球硬化指数(GSI)随病变的进展逐步升高。免疫组化和原位杂交显示,DRB组的肾小球表达Ang1mRNA和Ang1蛋白下调,表达Ang2mRNA和Ang2蛋白上调。电镜显示,DRB组逐步出现严重的足细胞损害。Sham组和UNx组的肾小球没有病理改变。DRB组的Ang1mRNA表达与Ang2mRNA表达呈负相关;Ang1蛋白表达与Ang1mRNA表达呈正相关,与Ang2蛋白表达、四型胶原(CoIV)蛋白表达、GSI、24hUPQ、Bun、Scr呈负相关;Ang2蛋白表达与Ang2mRNA表达、CoIV蛋白表达、GSI、24hUPQ、BUN、Scr之间呈正相关。结论:足细胞损伤可能是导致肾小球内Ang1和Ang2表达失衡的主要原因,Ang1表达下调,失去对Ang2的抑制,使Ang2表达上调,并介导肾小球滤过膜通透性增高和肾小球硬化的形成。

肾病综合征的病生特点与治疗原则

肾病综合征（肾综）,是由不同肾脏疾病引起的临床综合征,其主要特点是大量蛋白尿（尿蛋白】3.5g/24小时）;低蛋白血症（血浆白蛋白【3.0g/d1）;不同程度水肿;高脂血症（胆固醇高于300mg/d1）·肾综有一系列代谢紊乱和与之相关的临床特征,在肾病临床中占有十分重要的地位,其中很多问题正在深入研究中.

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9)。治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只。治疗组大鼠于造模前24h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃。12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达。结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻。结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关。

CD2相关蛋白在肾脏细胞中的分布及其在足细胞中的作用

目的观察CD2相关蛋白(CD2AP)在肾脏不同细胞系中的表达分布,及其与足细胞裂孔隔膜分子nephrin和细胞骨架蛋白F-actin之间的联系。方法以DMEM培养基培养人肾小球系膜细胞(HMC)和人肾小管上皮细胞系(HK-2),RPMI 1640培养基培养条件永生化小鼠足细胞系。以RT-PCR及Western blotting方法检测足细胞内CD2AP和nephrin的表达。间接免疫荧光结合激光共焦方法观察CD2AP在HMC、HK-2、未分化及已分化足细胞中的表达情况,及CD2AP与nephrin在足细胞中的共存。直接免疫荧光结合激光共焦方法观察F-actin在足细胞的表达及其与CD2AP的共存。结果CD2AP均匀分布于HK-2及未分化足细胞的核周及胞浆,而不表达于HMC细胞。在足细胞分化过程中,CD2AP的分布发生了变化,出现向周边聚集的现象。CD2AP与足细胞裂孔隔膜分子nephrin及细胞骨架蛋白F-actin在足细胞中存在共定位关系。结论CD2AP表达于上皮来源的肾脏固有细胞。CD2AP在足细胞中的分布特点,提示CD2AP可能参与足细胞的分化过程,并与裂孔隔膜分子功能及细胞骨架调节有关。

肝细胞生长因子在大鼠肾间质纤维化中作用机制的研究

目的 :通过观察大鼠单侧输尿管梗阻 (UUO)后 ,肝细胞生长因子 (HGF)的表达及其与转化生长因子 β1(TGF β1)之间的动态变化关系 ,以探讨HGF在肾间质纤维化中的作用机制。 方法 :将 36只雄性SD大鼠中的 18只行左侧输尿管结扎术 ,另外 18只行假手术。于术后第 3、7、14天分别处死各组中的 6只大鼠 ,用免疫组化方法测定HGF、TGF β1、α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)及纤维粘连蛋白 (FN)的表达 ,并行苏木精 伊红 (H E)和Masson染色 ,动态观察肾的病理学改变。 结果 :在肾间质纤维化早期 ,肾HGF表达明显增加而TGF β1表达却明显下降 ;在肾间质纤维化晚期 ,肾HGF表达明显下降而TGF β1表达却明显上升 ,同时α SMA和FN的表达明显增强 ,肾的病理改变明显 ,而且HGF表达与TGF β1、α SMA及FN表达呈明显负相关。 结论 :HGF可能是肾间质纤维化进程中重要的调节因子 ,它与TGF β1相互作用 ,共同调节肾间质纤维化的发生和发展。

脂多糖诱导下急性肾功能衰竭小鼠肾脏中TOLL样受体4的表达

目的:探讨TOLL样受体4(TLR4)在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肾功能衰竭(ARF)肾脏中表达及意义。方法:建立LPS诱导的小鼠ARF模型。应用免疫组织化学SABC法、Western blot及RT-PCR法检测肾组织TLR4蛋白及mRNA的表达变化。TUNEL法检测肾脏的凋亡情况。结果:TLR4在正常组(NG)肾脏中主要分布于肾小管、管周、肾间质区,肾小球系膜区也有表达,而ARF组TLR4在上述区域的表达显著增加,以近端小管、肾间质、远端小管、肾血管等部位较明显,两组光密度值比较有明显差异(P<0.05);TLR4的表达与肾功能的改变呈正相关(r=0.91);与NG组相比,ARF组的TLR4蛋白及mRNA水平的表达显著上调,以造模24 h后最明显;TUNEL法显示凋亡小体主要出现在ARF组肾脏的近端小管及管周围,肾小球无明显变化。结论:TLR4在脂多糖诱导的小鼠ARF肾脏中有较高表达,同时在其肾近端小管及小管周围组织发现较明显的凋亡小体。二者在ARF发病中可能起重要作用。

益肾胶囊治疗早期糖尿病肾病的临床研究

目的:探讨益肾胶囊治疗早期糖尿病肾病的临床疗效。方法:选择63例糖尿病肾病患者,随机分为治疗组和对照组,共治疗6个月,检测尿α-MG、血ET-1、血TNF-α等指标,并进行相关统计学分析。结果:益肾胶囊治疗糖尿病肾病总有效率为96.7%,各组指标均优于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论:益肾胶囊是治疗糖尿病肾病的有效方剂。

百令胶囊对糖尿病肾病大鼠生化指标及肾组织病理学改变的影响

目的:观察百令胶囊对糖尿病肾病大鼠血压、血糖、24h尿蛋白定量、肾功能及大鼠肾组织病理变化的作用。方法:24只大鼠随机分为对照组、模型组、治疗组,每组各8只。复制糖尿病肾病大鼠模型成功2d后,治疗组每日灌胃百令胶囊(2.5 g/kg),模型组及对照组每日给予等量的饮用水,测定血糖及24 h尿蛋白定量;通过全自动生化分析仪检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),并计算内生肌酐清除率(Ccr);通过光镜观察肾脏病理变化。结果:给药12周后,模型组大鼠血糖、平均动脉压、24h尿蛋白定量、Scr、BUN及左肾/体重均明显高于对照组大鼠,而Ccr低于对照组大鼠,均P<0.05,且肾组织出现了较明显的病理损伤;经百令胶囊治疗后,大鼠平均动脉压、24 h尿蛋白定量、Scr、BUN及左肾/体重均明显减低,均P<0.05,血糖减低,Ccr显著增高,P<0.05,肾组织病理损伤明显减轻。结论:百令胶囊对糖尿病肾病大鼠具有肾保护作用。

苦参碱对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾小管-间质纤维化的作用(英文)

目的为探讨苦参碱对腺嘌呤诱导大鼠肾小管-间质纤维化的防治作用及其机制。方法60只雄性Wistar大鼠被随机分为3组①正常对照组(NCG)8只;②腺嘌呤处理组(ATG)28只;③苦参碱治疗组(MTG)24只。按250mg·kg-·1d-1体重给ATG和MTG的大鼠灌服腺嘌呤,连续21天,而灌服腺嘌呤1周后,MTG的大鼠每天还按20mg·kg-·1d-1的剂量用苦参碱腹腔注射,分别观察苦参碱治疗的大鼠在14天、21天和28天的血清尿素氮、肌酐、IL-6和肾组织病理改变等指标的变化,用放射免疫法检测血清IL-6的水平,免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达,并对免疫组化染色阳性信号进行半定量分析,用HE染色对各组肾小管-间质损伤进行半定量分析。结果在相同时间点上,MTG大鼠的血清肌酐、尿素氮与ATG大鼠比较,有明显的改善(P<0.05);MTG大鼠的血清IL-6水平、肾小管间质的TGF-β1蛋白表达显著低于ATG大鼠(P<0.05),但均高于NCG大鼠(P<0.01),MTG的大鼠肾小管间质损伤指数低于ATG大鼠(P<0.05)。结论在腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化过程中,苦参碱能降低其血清BUN、Scr、IL-6水平和TGF-β1蛋白在肾小管间质中的表达,阻抑肾间质纤维化的进展。

高糖诱导人肾小球系膜细胞SGK的表达

目的 研究高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, HMC) 中血清和糖皮质激素诱导的激酶(serum and glucocorticoid inducible kinase, SGK) 3种亚型SGK1、SGK2和SGK3的表达及意义。方法 将培养的HMC分为正常组(5 5 mmol/L D 葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L D -葡萄糖) 和甘露醇对照组(19. 5 mmol/L甘露醇和5. 5 mmol/L D 葡萄糖)。采用RT PCR 方法检测SGK1、SGK2 和SGK3 mRNA 的表达, Western blot 方法检测SGK1蛋白的表达。结果 在高糖及甘露醇刺激下, HMC中SGK1、SGK2和SGK3 mRNA及SGK1 蛋白的表达明显上调(P<0. 05); 其中高糖上调SGK的表达明显高于甘露醇(P<0 .05)。结论 高糖能促进HMC的SGK1、SGK2 和SGK3mRNA及SGK1蛋白的表达, SGK1可能是高糖作用于HMC的细胞内信号通路中靶分子之一, 由它介导的高糖信号转导途径在糖尿病肾病的发生中可能起了重要作用。