棉花纤维RNA提取方法的比较及酵母双杂交文库的构建

为了从棉花纤维中提取高质量的RNA用于构建酵母双杂交文库,采用4种不同的方法提取9天和19天棉花纤维的RNA。琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测结果表明:热硼酸法适用于初生幼嫩纤维和次生加厚纤维的RNA提取,CTAB-PVP法仅适用于初生幼嫩纤维的RNA提取,异硫氰酸胍法和高盐高pH值法提取的RNA由于杂质含量较多而影响反转录效果。采用热硼酸法大量提取总RNA,纯化后的mRNA反转录为cDNA,通过重组将扩增的cDNA片段定向插入到pGADT7-RecAD克隆载体中,得到棉纤维9天和19天的酵母双杂交cDNA文库。2个文库的滴度分别是1.01×107cfu/mL和8×106cfu/mL,cDNA插入片段长度集中分布在250～2500bp之间。由此可以看出,构建的2个棉纤维文库质量较高,可用于棉花纤维素合成和调控途径的研究。

在城市化、市场化进程中寻求农民的新位置——金牛区农民增收问题的探讨

近郊农民受制于三个主要因素,一是市场化程度加深和城市化进程加剧带来的挑战;二是农民自身观念、素质与现代商业文化精神的不适应;三是过度分散经营的体制与优化资源、配置的矛盾。进一步解决农民增收问题,应从三个方面入手,一是指导思想和立足点要与时俱进;二是以体制创新为农民增收的突破口;三是抓住提高农民素质的根本。

新形势下金牛区农民增收问题的探讨

近郊农民受制于三个主要因素 ,一是市场化程度加深和城市化进程加剧带来的挑战 ,二是农民自身观念、素质与现代商业文化精神的不适应 ,三是过度分散经营的体制与优化资源配置的矛盾。文章认为进一步解决农民增收问题 ,应从三个方面入手 ,一是指导思想和立足点要与时俱进 ,二是以体制创新为农民增收的突破口 。

云南山茶TaqMan探针实时荧光PCR快速鉴定方法的建立

为建立云南山茶(Camellia reticulata Lindl.)TaqMan探针实时荧光PCR鉴定方法,根据GenBank数据库中及本实验室所测的15条云南山茶ITS可变序列片段设计特异引物和相应的TaqMan探针.试验结果证明,该引物探针组合可对云南山茶"大理茶""蒲门茶""凤山茶""麻叶银红""泽河"5个品系分别进行特异性检测鉴定,而对山茶属华东山茶(Camellia japonica L.)、金花茶(Camellia petelotii(Merrill)Sealy)、普洱茶(Camellia sinensis var.assamica(J.W.Masters)Kitamura)以及非山茶属的番茄均未检出荧光信号.本研究建立的云南山茶TaqMan探针实时荧光PCR快速鉴定方法特异性强、敏感性高、重复性好,非常适合基层和口岸在物种资源查验工作中推广应用,解决对云南山茶实施口岸查验的关键技术问题,提高查验效率.

四种短体线虫的形态和分子生物学鉴定

采用形态学和分子生物学方法对来自荷兰的藏橐吾和铃兰、泰国的高山榕、缅甸的香蕉等种苗(球)分别鉴定出玻利维亚短体线虫Pratylenchus bolivianus、铃兰短体线虫P.convallariae、咖啡短体线虫P.coffeae和斯佩奇短体线虫P.speijeri。对这4种线虫的形态特征进行较为详细的描述后,认为头环、口针、侧区、生殖系统和尾形等形态特征是种类鉴定的重要依据;进一步利用引物28S-D2A/28S-D3Br扩增测序得到上述4种线虫的28S rRNA基因D2/D3区序列,序列分析发现玻利维亚短体线虫从欧洲到美洲的不同种群之间的遗传距离变异较小,仅为0~0.007;铃兰短体线虫同一种群不同个体之间的遗传变异较大,为0.006~0.029;咖啡短体线虫不同种群之间的平均遗传距离为0.013;斯佩奇短体线虫不同种群之间的平均遗传距离为0.010;咖啡短体线虫P.coffeae和斯佩奇短体线虫P.speijeri亲缘关系很近,二者种间平均遗传距离仅为0.026。本研究再次证明线虫28S rRNA基因D2/D3区基因序列可作为短体线虫种间鉴定的依据。

缅甸罂粟主要替代种植作物上的植物寄生线虫调查

本文对缅甸佤邦和第四特区罂粟12种主要替代作物上的线虫发生情况进行了调查。调查发现植物寄生线虫共有27种/属,包括5种根结属(Meloidogyne)线虫、5种短体属(Pratylenchus)线虫。调查发现玉米、花生、甘蔗、水稻、茶树、小红米、旱稻谷和香蕉等8种作物被寄生线虫复合侵染,其中具有经济重要性的根结属线虫和短体属线虫发生较多;在具有检疫意义的线虫中,南方根结线虫在所调查的地域和寄主上分布最为广泛和普遍,玉米短体线虫次之。调查发现在缅甸的地理分布新纪录植物寄生线虫共有8种。