固定化β-半乳糖苷酶的催化特性研究

β-半乳糖苷酶经固定化后,其催化性能得到一定程度的改善。在各种反应条件相同的条件下,固定化酶的最适反应条件与游离酶相比得到一定程度的拓宽:受反应温度变化的影响变小,pH从5.8～6.2扩宽至5.7～6.5;对乳糖的转化效率有了不少的提高,酶的稳定性也得到了加强。实验中固定化β-半乳糖苷酶重复使用28次,底物转化率均在45%以上,具备了一定实际应用能力。

高效离子交换色谱法测定半乳糖、葡萄糖、乳糖及低聚半乳糖含量

建立离子色谱法定量测定以乳糖为原料、使用伊半乳糖苷酶生产的低聚半乳糖产品的方法。样品前处理过程中用体积稀释法代替质量稀释法，采用高效CarboPac PA20阴离子交换色谱柱和积分安培法检测，并对淋洗液组成进行优化。优化后的方法加标回收率90．58％-99．45％，相对标准偏差为3．54％。半乳糖、葡萄糖、乳糖的方法检出限分别为0．24、0．59、0．75μg／g。半乳糖和葡萄糖在0．2～7μg／mL、乳糖在0．6～10μg／mL的范围内，其质量浓度与峰面积线性关系良好，相关系数在0．9992～0．9999之间。用此方法测定6种原料低聚半乳糖，目标组分总含量为95．84％～101．19％。