中药三联疗法联合乳腺中频仪治疗乳腺增生临床研究

目的：观察中药三联疗法联合乳腺中频仪治疗乳腺增生的临床效果。方法：选择136例乳腺增生患者为研究对象,采用数字表法随机分为观察组与对照组各68例。观察组给予自拟疏肝消瘀汤及桂枝茯苓胶囊口服、中药外敷三联疗法,同时联合乳腺中频仪治疗,对照组给予中药三联疗法治疗,两组疗程均为8周。比较两组患者临床疗效、临床症状及激素水平。结果：观察组有效率（95.59%）明显高于对照组（85.29%）（χ2=4.167,P〈0.05）;肿块数量、肿块直径、VAS评分均明显小于对照组（t=2.0472~2.628,P〈0.05）;FSH、LH、E2、T等激素水平均明显低于对照组（t=2.709~6.324,P〈0.05）。结论：中药三联疗法联合乳腺中频仪有助于缓解乳腺增生患者临床症状,调节激素水平,提高临床疗效。

不同术式早期乳腺癌腋窝淋巴结清扫术疗效对比研究

目的探讨使用不同术式的腋窝淋巴结清扫术对早期乳腺癌进行治疗的应用效果。方法整群选取2014年1月—2015年2月,共计100例乳腺癌患者来该院就诊,将其随机列入观察组与对照组,每组50例。对照组实施传统切开清扫手术,观察组则实施腔镜下引导下的腋窝淋巴结清扫术。对比分析两组患者的疗效。结果观察组的手术所需时间为(78.4±15.4)min,出血量为(48.4±10.3)m L,满意度为94%,淋巴结清扫数量为(17.7±4.6)枚,复发转移率为4%;对照组的手术所需时间为(115.7±20.4)min,出血量为(87.7±20.6)m L,满意度为80%,淋巴结清扫数量为(18.6±4.7)枚,复发转移率为6%,观察组的手术所需时间、出血量和满意度均要显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组患者的淋巴结清扫数量和复发转移率相比,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。结论在早期乳腺癌的治疗中,腔镜引导下的腋窝淋巴结清扫术能够减轻手术创伤,促进患者早日康复,效果满意。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

2006年6月份以来,我国多个省份暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,给我国养猪业造成了巨大经济损失。为全面了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在我国的流行情况以及遗传变异规律,本研究采用RT-PCR的方法,对从2006年8月至2007年10月期间,来自于19省(市)共474份样品进行高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸的检测,结果检出阳性样品294份。在各省不同时期样品中均有阳性样品检出。通过对阳性样品进行Nsp2基因和ORF5基因扩增,序列分析发现所有检测的猪繁殖与呼吸综合征病毒株高度同源,为同一毒株遗传变异而来,所有猪繁殖与呼吸综合征毒株与HB-1株遗传关系最近;且Nsp2均缺失30个氨基酸。

犬细小病毒CPV-YH毒株的分离鉴定及其基因组变异分析

为分析当前犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)基因组遗传变异情况,本研究从细小病毒阳性患犬粪便中分离到一株病毒,经过病毒的形态学观察、血凝试验、动物回归试验以及分子生物学鉴定,分离的病毒确实为犬细小病毒,并命名为CPV-YH。病毒分离结果显示,病料接种A-72细胞能产生典型的细胞病变,病毒能凝集猪红细胞,在电子显微镜下呈圆形或六边形,无囊膜,直径约为20nm。动物回归试验复制出了犬细小病毒病典型症状:出血性肠炎、肝水肿、肺淤血。全基因组序列测定与分析显示,其基因组全长为4 921nt,与2011年兰州分离的CPV-LZ2分离株基因组相似性最高,为99%;VP2氨基酸进化树显示,CPV-YH分离株与2013-BJ-P27(中国)分离株和UY306(乌拉圭)分离株在同一个小的分支上。与GenBank上收录的CPV代表株的VP2基因比对,核苷酸和氨基酸相似性分别是98%~99.4%和97.1%~99.5%。以上试验结果表明,成功分离一株CPV变异株,这些数据将为CPV的流行情况和防控提供基础。

猪瘟病毒E2基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白,用于E2蛋白功能、开发CSF新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法采用RT-PCR扩增CSFV E2基因,将PCR产物克隆到pGEM-T-Easy载体,将该基因插入到pFast-BacHT A载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western-blot及免疫组化鉴定。结果成功克隆CSFVE2基因,其核苷酸序列为1119 bp。SDS-PAGE电泳结果显示表达E2蛋白相对分子质量约为43×103,Western-blot和免疫组化结果证实表达蛋白能够被CSFV标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒系统中的成功表达了CSFV E2蛋白,与CSFV标准阳性血清具有较好的反应性。

犬副流感病毒的分离鉴定及部分基因序列分析

目的分离并鉴定犬副流感病毒（canine parainfluenza virus,CPIV）,并对该病毒N、HN和F基因进行序列分析,研究其遗传变异情况;为CPIV诊断、治疗以及预防奠定分子生物学基础。方法用Vero细胞接种感染CPIV阳性犬肺组织,盲传3代,观察病变情况,收集72 h培养液进行PCR鉴定、血凝特性以及形态学观察。同时,用3对特异性引物,扩增N、HN和F全基因,进行序列测定和分析,并制作系统进化树。结果从犬肺中成功分离出一株犬副流感病毒,并命名为QF20100726。该病毒能凝集豚鼠、猪、鸡和人O型血,电镜观察病毒呈圆形、长丝状等形态多样、大小不等的颗粒状;序列分析表明,与人源、犬源等10株有代表性的副流感病毒基因相比,N基因核苷酸同源性为95.7%~99.8%,氨基酸同源性为97.4%~99.6%,其中有两处氨基酸发生新的变异,分别是第257位由V变成了A,第301位由A变成了T;HN基因核苷酸同源性为95.5~99.8%,氨基酸同源性为96.3~99.6%,F基因核苷酸同源性为94.7%~99.6%,氨基酸同源性为95.6%~99.3%。有两处发生特异变异,分别是56位由T变成了S,89位由T变成了M。结论成功分离犬副流感病毒QF20100726分离株,其血凝特性及超微形态特征均符合CPIV特性,N、HN和F全基因生物进化树显示,该分离株与犬副流感病毒分离株08-1990（登录号：KC237063）亲缘关系最近;N基因氨基酸在第257位（由V变成了A）和第301位（由A变成了T）,F基因氨基酸在第56位（由T变成了S）和89位（由T变成了M）发生了特异性变异。这些数据将为CPIV的防控奠定基础。

胆漏发生率与T管留置时间的关系研究

目的:探讨胆漏发生率与T管留置时间的关系。方法:对行胆总管探查并留置T管的226例患者的临床资料进行回顾性分析。结果:留置14 d^16 d后拔除T管的101例患者中发生胆漏者11例,留置20 d^25 d后拔除的125例患者中发生胆漏者5例。结论:胆总管探查术后留置T管,适当延长留置时间可以降低胆漏发生率。

牛副流感病毒3型毒株的分离鉴定及基因组遗传变异分析

从新疆地区某牛场出现发热、咳嗽等症状的多例病牛的肺组织中分离得到3株牛副流感病毒3型,分别命名为XJ03、XJ022、XJ023,对其中两株病毒XJ03和XJ023的基因组进行序列测定,测序结果显示,XJ03和XJ023毒株基因组全长分别为15474 bp(Gen Bank登录号为KU198929)和15475 bp,其核苷酸同源性为99.89%。同代表性的牛副流感病毒基因组比对发现,与我国的山东毒株SD0835同源性最高为99.3%,均属C型BPIV。在C型毒株中,与南韩12Q061分离株(C型)同源性最低为97.5%。F、N、HN、L、P、M蛋白基因氨基酸序列分析显示,与SD0835毒株相应序列对比,同源性分别为99.63%、92.15%、99.48%、99.28%、98.50%和100%,部分氨基酸发生了新的变异。试验结果将为今后更好地开展BPIV3防控奠定基础。

抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型（CAV-1）免疫的BALB／c小鼠脾细胞与SP2／0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫酶试验（1EA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞，命名为1B、2H3，经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a，2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8，IEA效价可达1：2560—1：5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。

猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为3C3、3D2,经鉴定亚类均为IgG2a、kappa链。2株单克隆抗体腹水ELISA效价达105～107,IPMA效价达1:2560～1:10240,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒等无交叉反应。结论获得特异性针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体,为研究该病的快速诊断技术奠定基础。

从“一气周流”思想探析妊娠病脉证并治

"一气周流"思想源于清代名医黄元御《四圣心源》,"一气"即中焦土气,所谓脾胃之气。故运用"一气周流"思想对妊娠病脉证并治及养胎之法作一简要论述,认为妊妇结胎之初易见"阴搏阳别"之病理状态,故妊娠之初脉象见"尺微而寸洪",待母体中土之气健、木火生长之气旺,则妊妇尺中脉见阴中生阳之搏击动数之象。而"胎妊之结,生长资乎木火,收成藉乎金水,土者四象之母",故养胎之要在于强健中土,中土健而后"凉润于东南,以治木火,则血调矣;温燥于西北,以治金水,则气调矣"。

急性胰腺炎腺泡细胞钙离子浓度变化研究

目的:探讨胰腺腺泡细胞钙离子浓度与急性胰腺炎的关系。方法:将20只大鼠随机分为胰腺炎组与对照组,每组10只,取胰腺组织标本用fluo 3染色流式细胞仪检测荧光强度。结果:胰腺炎组腺泡细胞钙离子浓度高于对照组,P<0.05。结论:腺泡细胞钙离子与急性胰腺炎发生有关。

虎源猫杯状病毒的分离及其基因组遗传变异分析

从贵州省某动物园因发热、呼吸道等症状死亡的东北虎脾脏组织中分离得到1株猫杯状病毒(FCV),命名为FCVYH/16。采用RT-PCR的方法扩增了该病毒的全基因组,序列测定显示,FCV全基因组长7687 nt(GenBank序列登录号为KX815169),该基因组包含3个开放阅读框。基因组核苷酸序列分析显示,该毒株与12Q087-1、GD、SH和FB-NJ-13在一个大的分支上,而与疫苗株F4、F9和F65等不在一个分支上;其中与12Q087-1基因组同源性最高为80.5%,与疫苗株F9同源性最低为76.3%;衣壳蛋白氨基酸进化分析显示,与21株国内外代表株相比,该毒株的VP1氨基酸序列发生了9处新的单个氨基酸变异,5个区域的3个连续的氨基酸发生了变异,这些变异是否影响病毒毒力还需进一步研究。

猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体的研制

为制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株单克隆抗体,用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株免疫BALB/c小鼠,最后一次免疫后第3天取其脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光试验(IFA)筛选,以有限稀释法克隆3次,制备单克隆抗体,并对制备的单克隆抗体进行鉴定。结果表明获得了2株分泌PRRSV膜基质蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞,命名为1D12、5H5,经鉴定其抗体亚型分别为IgG2b、IgM,2株均为κ链,腹水ELISA效价分别为1∶107和1∶105。该单克隆抗体与PRV、PPV、PCV、CSFV、JEV无交叉反应。作者成功制备了抗猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体,为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。

猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间。细胞上清效价均达1∶1×104,腹水效价均达1∶1×107,其亚型分别为IgG1、IgM,均为kappa链。2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应。IPMA和IFA检测结果显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应。结论成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。

影响甲状腺微小癌颈淋巴结转移的危险因素分析

目的研究影响甲状腺微小癌(TMC)发生颈淋巴结转移(LNM)的危险因素及LNM对患者预后的影响。方法选取147例TMC患者临床资料进行回顾性分析,根据病理结果将患者分为转移组和对照组,采集2组临床信息并进行比较,采用多因素Logistics回归分析研究影响LNM发生的危险因素,同时随访患者术后5年复发和生存情况。结果手术病理结果显示,147例TMC患者中发生LNM者56例(38.10%),其中颈中央区淋巴结转移53例(36.05%);实施侧颈淋巴结清扫的42例患者中发生转移者34例(80.95%),其中31例(73.81%)同时伴有中央区淋巴结转移,另有3例(7.14%)为跳跃式转移。多因素Logistic回归分析显示,TMC肿瘤最大径>0.5 cm、多病灶、被膜受累及腺外侵犯是LNM发生的独立危险因素(P<0.05)。随访结果显示,2组术后5年复发率分别为26.8%和16.5%(P>0.05),生存率分别为80.4%和87.9%(P>0.05)。结论TMC发生LNM风险较高,其主要危险因素包括肿瘤最大径>0.5 cm、多病灶、被膜受累及腺外侵犯。此外,LNM可能对患者预后造成不利影响。

犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查

为了解钩端螺旋体病在犬、猫体内的感染情况,2011年,在北京地区建立了20个宠物疫病监测点,随机收集了犬、猫血清及尿液样本396份,进行犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查。调查结果为显微镜凝集试验检测犬、猫血清共计200份,抗体阳性的样品共有106份,阳性率为53%,其中猫血清为阳性的样品有20份,阳性率为27.8%;犬血清为阳性的样品有86份,阳性率为67.2%。RT-PCR检测犬、猫尿液共计196份,阳性的样品共有54份,阳性率为27.6%,其中猫尿样21份,阳性样品4份,阳性率为19%;犬尿样175份,阳性样品50份,阳性率为28.6%。

肝脏缺血再灌注立早基因表达的研究进展

肝脏缺血再灌注损伤是临床肝胆外科手术常见重要的并发症。其缺血及再灌注过程均可引起立早基因早期反应蛋白-1、c-Jun、c-Fos表达上调,急性期调控肝组织细胞炎症反应,导致严重的肝功能异常和器官功能障碍;恢复期调控肝组织再生重建;还作用于肝脏能量代谢,对患者的生存预后产生重要影响。立早基因是一类受到刺激后可以被快速而短暂地诱导的基因,且其激活不需要任何新蛋白的合成,目前为止,已在细胞中发现100多种立早基因。深入了解肝脏缺血再灌注立早基因表达及其调控过程可为改善肝缺血再灌注损伤及损伤后肝恢复提供新方向。本文对肝脏缺血再灌注立早基因表达的研究进展进行综述。

探究九年级道德与法治的复习方法与策略

道德与法治是学生学习中一门重要的课程,为了帮助学生在中考中发挥出自己的水平,初中道德与法治老师在课堂教学中就需要结合合理有效的方法,搞好初中道德与法治复习。教师在总复习中要充分信任学生,拓展思维空间;重视方法指导,避免灌输知识;强化问题意识,重视答案多样性,提高教学效率。

川剧《柳荫记》的英译研究——以杨宪益、戴乃迭夫妇英译的Love Under the Willows为例

以苏珊·巴斯内特的"可表演性"原则为立足点,从英语国家观众的角度出发,研究杨宪益夫妇英译《柳荫记》的翻译方法。杨宪益、戴乃迭夫妇英译的川剧《柳荫记》(Love Under the Willows)既忠实原文,又不剥离语言的文化内核,将戏剧原文中的文化内涵用符合目的语习惯的方式表达出来。该文通过研究前人的英译作品,希望能为日后川剧英译提供借鉴,助力巴蜀文化的对外传播。