抗体催化水的氧化对大鼠血管平滑肌细胞过氧化损伤作用

目的通过观察抗体催化水的氧化作用对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的过氧化损伤,探讨其在动脉粥样硬化致病过程中的作用和机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,随机分为4组:空白组、中性粒细胞(Neu)+IgG组、Neu+PMA组、Neu+PMA+IgG组。以佛波酯(PMA)激活大鼠中性粒细胞产生单线态氧(^(1)O_(2)),促进抗体发挥催化水的氧化作用;采用台盼蓝法检测VSMCs的死亡率,CCK-8法检测VSMCs的增殖能力,实时荧光定量PCR及免疫组化法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平,丙二醛(MDA)法检测细胞内脂质过氧化产物。结果VSMCs在培养过程中,当与中性粒细胞和PMA共同孵育时,细胞的死亡率、增殖能力、细胞内PCNA的表达水平及胞内脂质过氧化产物均显著增高,但增加大鼠IgG共同孵育后,其增高水平得到更进一步增强。结论抗体催化水的氧化可能参与了血管平滑肌细胞的过氧化损伤作用。

成都市某高校全科医学生营养身心健康状况分析

目的:调查成都市某高校全科医学生营养知信行及心理健康现状并探讨相关影响因素。方法:以成都市某高校全科医学生为研究对象,采用整群抽样方法,在2022年6月采用自制营养知识-态度-行为(KAP)问卷、9条目患者健康问卷和7项广泛性焦虑障碍量表,以电子问卷方式进行调查。结果:423例全科医学生营养知识得分为(7.48±2.51)分,营养态度得分为(15.94±3.06)分,营养行为得分为(25.22±4.56)分,KAP总体平均得分仅为(48.64±7.90)分,其中女性得分高于男性得分,差异均具有统计学意义(P<0.05);抑郁人数为229人,占比54.14%。男生中抑郁的人数,显著高于女生(P<0.01),失眠、吸烟和饮酒的人群抑郁比例均高于无以上不良生活习惯的人群(P<0.01);男生中焦虑的比例显著高于女生(P<0.01),失眠、吸烟和饮酒的人群焦虑比例均高于无以上不良生活习惯的人群(P<0.01)。多因素Logistics回归分析显示,年级高低、父母婚姻状况、是否失眠、KAP得分是全科医学生抑郁的相关影响因素。年级高低、父母婚姻状况、是否失眠和营养行为是全科医学生焦虑的相关影响因素。结论:成都市某医学院全科医学生营养知信行整体成绩较差,心理健康状况不容乐观。应开展针对的心理健康教育、营养教育,提高整体全科医学生的心理健康水平和营养健康素养。

小檗碱通过抑制肝星状细胞自噬改善小鼠肝纤维化

目的 研究小檗碱(BBR)对肝星状细胞(HSC)自噬与活化的调控及其抗肝纤维化作用。方法分别采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10、20、50μmol/L)干预血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB,20μg/L)处理的LX-2细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力;采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10μmol/L)干预PDGF-BB(20μg/L)处理的LX-2细胞24 h或48 h,使用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)方法检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率。实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫印迹法检测小檗碱(5μmol/L)对LX-2细胞α-SMA,COL1A1 mRNA及蛋白表达的影响;检测Atg5、 Becn1、 Atg7、 LC3、p62的表达。动物实验共18只小鼠,随机分为3组,对照组[橄榄油(Oil)+磷酸盐缓冲液(PBS)]、模型组[四氯化碳(CCl4)+PBS]和药物干预组(CCl4+BBR),每组6只小鼠,造模5周,2次/周。第3周开始给与BBR干预,2次/周,连续给药3周。造模5周后处死小鼠,检测各组小鼠肝脏组织中的羟脯胺酸水平,苏木素-伊红(HE)和天狼星红染色观察肝脏组织炎性细胞浸润及胶原沉积情况。结果 BBR作用LX-2细胞24 h的半数抑制浓度(IC50)为(31.51±2.66)μmol/L;BBR可呈剂量依赖性地抑制LX-2细胞的增殖及迁移(P<0.05)。BBR(5μmol/L)下调LX-2细胞的α-SMA、COL1A1 mRNA和蛋白表达水平,抑制细胞活化(P<0.05)。BBR(5μmol/L)下调LX-2细胞的Atg5 mRNA和蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平及减少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,抑制细胞自噬(P<0.05)。CCl4+BBR与CCl4+PBS组小鼠肝脏比较,BBR干预后,肝细胞脂肪变性坏死和炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维沉积减少,羟脯胺酸含量减少(P<0.05)。结论 BBR在小鼠体内具有抗肝纤维化的作用,在体外可抑制LX-2细胞的增殖、迁移及活化,这可能与BBR抑制HSC自噬水平有关。

连翘酯苷A对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究连翘酯苷A(FA)对肝星状细胞增殖活化及凋亡的影响。方法 以人肝星状细胞(LX-2)作为实验对象,采用血小板衍生生长因子(PDGF)-BB模拟肝纤维化微环境,实验分为对照组、PDGF-BB组、FA组、PDGF-BB+FA组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LX-2细胞活力;采用油红O检测细胞内脂滴的情况;采用免疫荧光染色检测细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测纤维化相关标志蛋白[α-SMA、α1-I型胶原蛋白(COL1A1)]和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(BCL-2)、剪切的-腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、剪切的-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-CASPASE-3)]的表达;采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 FA处理后LX-2细胞活力明显下降,且呈剂量依赖性;油红O实验结果显示,与PDGF-BB组比较,FA组细胞内脂滴数量较多;免疫荧光染色结果显示,与PDGF-BB组相比,FA组细胞内α-SMA荧光斑点的数量减少;WesternBlot实验结果显示,FA组α-SMA、COL1A1、BCL-2蛋白表达减少,cleaved-PARP、BAX、cleaved-CASPASE-3蛋白表达增加。结论 FA可抑制肝星状细胞的增殖、活化,促进凋亡,改善PDGF-BB诱导的体外肝纤维化。

生物体系中过氧化物(LPO)测定方法现状及其研究进展

简述了生物体系中脂质过氧化物 ( lipid peroxide,L PO)的形成机制和测定方法现状 ,重点介绍了常用的测定 L PO的方法及其利弊。

生物样本中过氧化脂质定量测定的三种方法比较

目的 探讨在生物样本体系中测定过氧化脂质 (L PO)的较理想方法。方法 用目前最常用的 FOX法 ,改进碘量法 ,TBARS法同时测定不同生物样本体系中的 L PO浓度 ,并以线型性 ,准确度 ,精确度 ,稳定性和检测效率等指标评估、比较此三种方法的优劣。样本体系包括萃取的低密度脂蛋白 (L DL) ,细胞培养上清液 ,人血浆。结果 在萃取的 L DL样本体系中 ,FOX法显示出对 L PO最敏感的检测效率 ,并具有良好的准确性和精确度。但在细胞培养上清液和人血浆中 ,改进碘量法和 TBARS法的质量评估指标则优于 FOX法。在准确度评估实验中 ,FOX法对人血浆中的加样回收率明显偏低 (6 1.92 %± 2 .92 % ,碘量法 99.0 0 %± 2 .6 5 % ,TBARS法 10 1.6 3%±12 .0 0 % ) ,重复性也差 (评估精确度的变异系数 CV:FOX法为 19.15 % ,碘量法 4 .36 % ,TBARS法 3.14 % )。在线型性评估和稳定性评估实验中 ,三种方法皆显示出良好的性能。在人血浆中 L PO浓度的测值 ,改进碘量法为(14 .189± 4 .889)μm ol/ L ,TBARS法为 (0 .936± 0 .4 6 2 )μmol/ L ,上述测值与其它作者的报道相近。结论 在相对纯净的样本体系中 ,FOX法显示出对 L PO最敏感的检测效能。但在复杂样本体系中 ,改进碘量法和 TBARS法测定 L PO的各项质量指标则优于 FOX?

汉、维吾尔、哈萨克三民族血脂与脂肪肝的关系分析

为探讨汉、维吾尔、哈萨克三个民族患脂肪肝发病情况及是否存在差异。采用超声诊断仪对脂肪肝进行检测,并测定血脂四项。结果显示受调查1152人中,患有脂肪肝379人,其中大多数血脂异常。由此可知脂肪肝在不同民族之间分布不同,脂肪肝患者中血脂异常是其危险因素。

新疆汉族和哈萨克族体质指数与高血压及血脂的相关性研究

目的探讨汉、哈萨克族体质指数与高血压及血脂之间的相互关系。方法应用体质指数、高血压、血脂4项的判断标准,对体质指数划分下检出的高血压、血脂4项进行分析。结果受调查578人中,汉族307人,哈萨克族271人;其体质指数分布与汉族、哈萨克族高血压、高胆固醇及低密度脂蛋白较高患者有显著性差异(P<0.001)。结论汉、哈萨克族的体质指数是高血压,高血脂患者的危险因素。

一种新的测定生物体系中过氧化脂质(LPO)的改进碘量法的建立

目的 :为方便而准确测定生物体系中的过氧化程度。方法 :用改进碘量法对LDL、培养细胞的上清液、人血浆的脂质氧化水平测定 ,并经四种质量控制指标测定。结果 :改进碘量法具有快速、简便、灵敏、准确等特点 ,易在一般实验室推广。结论

医学机能实验教学改革实践与探讨

医学机能实验教学改革是医学教学改革的核心内容。本文阐述了医学机能实验教学改革的目的、措施及存在的问题 。

病理生理学教学中“素质教育”改革和实践的探讨

随着现代医学发展和医学模式的改变,素质教育已成为医学本科教学的目标。本文结合病理生理学教学实践中围绕"素质教育"进行改革和实践的一些措施,探讨医学教育中"素质教育"的改革和实践的可能途径。

利用虚拟仿真实验促进本科教学

伴随信息技术的日新月异，教育信息化逐渐成为高等教育提升教学质量的重要砝码。虚拟仿真技术作为信息化时代的产物，越来越多地被运用于教学。医学实验教学受医学伦理要求、实验条件、实验成本及尸体来源等限制，导致很多实验项目无法开展，而虚拟仿真实验技术的运用为医学实验教学开辟了新路径。成都医学院较早认识到虚拟仿真实验在医学实验教学中有着补充、拓展、完善的作用．并积极探索虚拟仿真技术在医学教育中的运用。

黑枸杞无机元素分析

新疆为我国中药枸杞的主产区之一,全区境内栽培和野生的枸杞共计有六个品种.其中黑枸杞是野生茄科枸杞属植物黑果枸杞( Lycium ruthenicumMurr. )的干燥果实,维吾尔文称阿勒卡特.

小凹蛋白-1在脐静脉内皮细胞CaR介导NO生成中的作用和机制

目的:探讨小凹蛋白-1(Cav-1)在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(CaR)介导NO生成中的作用和机制。方法:利用转染技术将构建的Cav-1干扰质粒(Cav-1 shRNA)转染入HUVECs,随机分为:(1)对照组;(2)CaR激动剂(精胺)组;(3)精胺+Ca2+组;(4)CaR负性变构调节剂(Calhex231)+精胺组;(5)Calhex231+精胺+Ca2+组;(6)非律平(filipin)+精胺组;(7)filipin+精胺+Ca2+组;(8)空质粒(vehicle)+精胺+Ca2+组;(9)Cav-1 shRNA+精胺组;(10)Cav-1 shRNA+精胺+Ca2+组。Western blotting检测Cav-1 shRNA转染后HUVECs中CaR和Cav-1蛋白表达,通过NO荧光探针DAF-FM DA负载HUVECs检测细胞内NO的生成;并在提供充足底物的条件下检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。结果:Cav-1干扰后,Cav-1蛋白表达降低,同时CaR的膜蛋白表达降低(P<0.05),CaR的浆蛋白表达无变化(P>0.05)。无论细胞外为零钙液或含钙液时,精胺(2 mmol/L)刺激CaR时均引起eNOS活性和NO含量增加(P<0.05),其中细胞外液为含钙液时,eNOS活性和NO含量增加较细胞外为零钙液时更明显(P<0.05),Calhex231(1μmol/L)可阻断(细胞外为零钙液)或降低(细胞外液为含钙液)精胺介导的上述作用(均P<0.05);此作用亦可被filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默减弱(细胞外液为含钙液)(均P<0.05)。结论:HUVECs中Cav-1对CaR介导的NO生成有促进作用,其机制可能与Cav-1影响CaR膜定位及对激动剂反应性有关。

ERK和Smad通路在TGF-β_1抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的:探讨ERK通路是否参与TGF-β/Smad通路诱导的血管平滑肌细胞增殖及可能的分子机制。方法:原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,细胞分4组:(1)对照组;(2)TGF-β1组;(3)ERK阻断剂(PD98059)组;(4)TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。MTT法测细胞的增殖活性,Western blotting法检测VSMCs中细胞内核增殖抗原(PCNA)、Smad2/3、ERK1/2、Smad7蛋白表达及相关磷酸化蛋白含量,RT-PCR方法测VSMCs中Smad2、3、7mRNA的表达。结果:(1)各组PCNA蛋白表达和MTT法测得A值均低于对照组(P<0.05),TGF-β1+ERK阻断剂组与TGF-β1组相比无显著差异。(2)与对照组相比,TGF-β1组p-Smad2/3、p-ERK1/2蛋白含量和Smad7蛋白表达增高(P<0.05),ERK阻断剂组则明显降低(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+ERK阻断剂组降低(P<0.05)。各组间Smad2/3、ERK1/2蛋白表达无显著差异。(3)与对照组相比,TGF-β1组Smad7 mRNA表达增高(P<0.05),ERK阻断剂组和TGF-β1+ERK阻断剂组降低(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+ERK阻断剂组表达降低(P<0.05)。各组内VSMCs的Smad2、Smad3 mRNA表达无显著差异。结论:(1)TGF-β1诱导的Smad2/3蛋白磷酸化依赖ERK通路激活,但对TGF-β1的抑制平滑肌细胞增殖的作用无影响,可能有其它信号通路参与此过程。(2)ERK通路可通过蛋白和mRNA水平促进Smad7表达,反过来其又可促进ERK通路激活。(3)ERK通路对Smad2/3蛋白和mRNA水平无影响。

大叶性肺炎及其诊疗虚拟仿真实验项目建设

为提升呼吸系统实践教学效果,提出大叶性肺炎及其诊疗虚拟仿真实验教学项目建设方案。基于成都医学院在虚拟动物及虚拟标准化病人方面的技术与软件系统积累,开展呼吸系统虚拟动物及虚拟标准化病人实验。该项目建设包括资源建设、流程建设、内容建设、平台建设和共享服务建设,充分发挥虚拟仿真实验在基础医学教学中的作用,促进基础与临床有效衔接,开辟了临床思维训练虚拟仿真教学资源新途径。

新疆汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因T786C和G894T多态性与原发性高血压的相关分析

目的探讨新疆汉族和哈萨克族内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C多态性与原发性高血压的相关性。方法选取新疆塔城地区哈萨克族高血压患者363人和正常血压者370人,选取汉族高血压患者346人,正常血压者385人,运用多重单碱基延伸分型技术进行内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C多态性分析,阐明两民族基因型、等位基因频率分布、连锁不平衡模式及构建的单体型与原发性高血压的相关性。结果超重、肥胖、甘油三酯异常及年龄51岁以上是两民族患高血压的共同相关危险因素。总人群、原发性高血压组及正常血压组中两民族内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C位点等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05),两位点间不存在强连锁不平衡。汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因两位点共构成4种单体型:GT(75.3%和79.6%)、GC(10.8%和10.5%)、TT(5.7%和9.8%)及TC(8.2%和0.1%)。两民族单体型频率分布最高为GT,汉族和哈萨克族人群单体型频率分布最低分别是TC、TT,且两民族间单体型GT、TT、TC频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论新疆汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C位点多态可能与原发性高血压不相关。

大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞的作用

目的探讨大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)的作用及其机制。方法分别以终浓度为0,20,40,80μmol·L-1的大黄素处理HSFs,以MTS法检测细胞活力,以Annexin V、碘化丙啶双染法行流式细胞仪检测,以Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)的表达。结果大黄素对HSFs的增殖活力有抑制作用,且呈剂量依赖性;HSFs在终浓度为40,80μmol·L-1大黄素作用48 h后死亡率分别为28.6%,68.0%(P<0.01),以泛caspase抑制药Z-VAD-FMK预处理能够部分降低大黄素所致细胞死亡率(P<0.05);大黄素能够抑制ERK磷酸化、Mcl-1和RIP1的表达。结论大黄素能够抑制HSFs的增殖活力、诱导细胞死亡,其机制可能与其抑制ERK1/2磷酸化及Mcl-1、RIP1蛋白表达有关。

牛磺酸对失血性休克复苏家兔肺组织NOS活性及NO含量的影响

探讨失血性休克复苏时肺组织中一氧化氮合酶 (NOS)活性、一氧化氮 (NO)含量的变化及牛磺酸对其的影响。新西兰种兔 2 4只随机分为三组 (n =8) :对照组、休克复苏组、牛磺酸治疗组。采用失血性休克复苏动物模型。结果发现 :休克复苏 3h肺湿重 肺干重、肺水含量、肺通透指数 (LPI)、肺泡灌洗液 (PALF)中蛋白含量、肺组织中NOS活性、NO含量均升高 (均P <0 0 1)。同时 ,血浆中NOS、LDH活性及NO含量均有显著升高 (均P <0 0 1)。预先给予牛磺酸 (静脉注射 ,4 0mg kg体重 )可显著缓解上述变化 (均P <0 0 1)。提示失血性休克复苏时NOS的激活和NO的大量释放 ,对休克复苏所致肺损伤的发生发展起重要作用 。