Orionin对急性肝衰竭小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响

目的探讨冬凌草甲素(Oridonin)对脂多糖/D-氨基半乳糖氨(LPS/D-Gal)联合诱导的急性肝衰竭(ALF)小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响。方法取150只小鼠,随机分成5组,每组30只。采用LPS/D-Gal腹腔注射建立小鼠ALF模型,设生理盐水对照组、Oridonin对照组、LPS/D-Gal诱导模型组和LPS/D-Gal处理及不同剂量Oridonin干预组。采用Real-time PCR法检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1α、IL-1β和IL-6 m RNA水平。结果模型组小鼠48 h存活率为0.0%(0/30),而两个Oridonin干预组小鼠48 h存活率分别提高至64.5%(19/30)和80.6%(24/30,P<0.01);组织病理学检查显示模型组小鼠肝细胞呈大块或/和亚大块坏死,肝小叶结构消失,残存肝细胞肿胀、空泡变性,肝窦肿胀充血,炎细胞浸润。Oridonin干预组小鼠肝细胞坏死、空泡变性和炎细胞浸润等较模型组有明显的改善;模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为(345.3±54.1)U/L和(500.2±53.5)U/L,明显高于对照组的[(42.3±0.6)U/L和(117.1±9.8)U/L,P<0.01],两个Oridonin干预组分别为(303.9±39.5)U/L和(340.6±2.8)U/L及[(130.2±38.3)U/L和(209.8±36.2)U/L,P<0.05];模型组小鼠肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 m RNA水平显著高于正常对照组(P<0.01),而两个Oridonin干预组肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 m RNA水平显著低于模型组(P<0.01)。结论 Oridonin对LPS/D-Gal诱导的ALF小鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与降低肝组织细胞因子水平有关。

Oridonin对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素(oridonin)对脂多糖/D-氨基半乳糖氨(LPS/D-Gal)联合诱导的急性肝衰竭(ALF)小鼠肝细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法取25只小鼠,随机分成5组,每组5只。采用LPS/D-Gal腹腔注射建立小鼠ALF模型,设生理盐水对照组、LPS/D-Gal诱导模型组、LPS/D-Gal诱导和不同剂量oridonin干预组及oridonin处理组。采用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡,采用real-time PCR法检测肝组织TNF-αm RNA水平,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白的变化。结果模型组小鼠肝细胞凋亡率为(36.4±1.8)%,显著高于两个oridonin干预组的[(19.4±3.3)%和(11.4±0.3)%,P<0.01];模型组小鼠肝组织TNF-αm RNA水平显著高于正常对照组(P<0.01),而两个oridonin干预组肝组织TNF-αm RNA水平显著低于模型组(P<0.01);模型组小鼠线粒体凋亡通路相关的促凋亡蛋白c-Jun氨基末端激酶(JNK)、bax、细胞色素C、cleaved caspase9/3活化水平显著高于两个oridonin干预组(P<0.01),模型组小鼠抗凋亡蛋白bcl-xl水平显著低于两个oridonin干预组(P<0.01),模型组小鼠死亡受体凋亡通路相关的促凋亡蛋白caspase8活化水平与两个oridonin干预组并无明显差异(P>0.01)。结论 Oridonin可抑制LPS/D-Gal诱导的ALF小鼠肝细胞凋亡,其机制可能与下调促凋亡细胞因子TNF-α水平和抑制JNK介导的线粒体凋亡信号通路有关。

新型异喹啉类化合物12-4-Y对活化肝星状细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨新型异喹啉类化合物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑并（5,1-a）异喹啉]对大鼠肝星状细胞（HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 以不同浓度（5、10、20、40和80μg/ml）12-4-Y处理HSC-T6细胞,分别于孵育后12h、24h、36h和48h收集细胞,以MTT法检测细胞增殖,以Hoechst染色对凋亡定性,以流式细胞分析对凋亡定量,应用Western blot检测凋亡关键蛋白Caspase3表达变化。结果 12-4-Y处理12h可浓度依赖性（在5～80μg/ml范围内）抑制HSC-T6细胞增殖,细胞增殖率分别为（1.086±0.013）、（1.055±0.019）、（0.957±0.012）、（0.793±0.021）和（0.553±0.031）,均显著高于对照组水平（1.215±0.014,P〈0.05）;12-4-Y（20μg/ml）处理可时间依赖性抑制HSC-T6细胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,细胞增殖率分别为（0.957±0.012）、（0.852±0.024）、（0.641±0.032）和（0.492±0.017）,与对照组（1.318±0.007,P〈0.01）差异具有显著性;12-4-Y（20μg/ml）处理24h时,Hoechst染色显示HSC-T6可见明显凋亡小体,流式细胞分析显示凋亡率为（29.23±1.20）%,显著高于对照组[（5.47±1.39）%,P〈0.001];蛋白质印迹显示凋亡关键蛋白Caspase3的裂解产物表达亦显著增加。结论 新型异喹啉类化合物12-4-Y可显著诱导活化HSC凋亡,其机制与激活凋亡关键蛋白Caspase3有关。

氧化苯砷体外对大鼠原代肝星状细胞活化的阻抑作用研究

目的探讨氧化苯砷（PAO）对肝星状细胞（HSC）活化的影响。方法采用密度梯度离心法提取SD大鼠原代HSC，在倒置显微镜下观察HSC形态的改变；以25、50、100、150和200nmol/L浓度PAO处理活化的HSC—T6细胞，以四甲基偶氮唑盐（MTT）法评估PAO的细胞毒性；分别以25、50、100nmol／L浓度的PAO处理离体培养4d的HSC 72h，并设对照组，采用Western blot和Real-time PCR法检测各组细胞OL—SMA和I型胶原mRNA和蛋白表达。结果原代HSC离体培养过程中仪一SMA表达量逐渐升高，与培养1d时（0．762±0．062）比，培养4d时其d—SMA蛋白表达【（1．51-t-O．045），P〈0．05】显著升高；PAO在25-100nmo／L浓度范围内对活化的HSC无明显的细胞毒性，但能浓度依赖性抑制活化的HSC α-SMA和I型胶原mRNA水平和蛋白表达。结论离体培养4d时，HSC呈初始活化状态。PAO在25-100nmol／L范围可浓度依赖性地阻抑离体培养的HSC的自发激活，提示PAO有潜力成为一类新型的抗肝纤维化药物。

HDAC抑制剂调控乳腺癌细胞HER-2表达的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,约15%~20%的患者呈HER-2过表达,该亚型患者易复发转移,预后较差。HER-2过表达不仅与基因扩增有关,还受表观调控的影响。组蛋白去乙酰化酶抑制剂被认为是靶向癌细胞表观基因组的代表性药物,在HER-2阳性乳腺癌中,组蛋白去乙酰化酶抑制剂可通过下调HER-2表达,与靶向HER-2的大分子单抗表现出协同作用。本文我们将重点概述组蛋白去乙酰化酶抑制剂下调HER-2表达的机制以及在乳腺癌治疗中的研究现状。