雷公藤多糖诱导胰腺干细胞成胰岛样细胞团（英文）

背景:胰岛细胞来源不足说明胰岛细胞移植治疗糖尿病不能满足临床需要。因此,体外诱导胰腺干细胞分化为胰岛细胞成为研究的热点。目的:观察雷公藤多糖对小鼠胰岛来源的胰腺干细胞的诱导分化作用,从而探索中药诱导胰腺干细胞分化为胰岛β细胞的作用。方法:采用雷公藤多糖体外诱导经纯化的小鼠胰腺干细胞分化为胰岛细胞。胰岛样细胞团进行形态学观察,双硫腙染色和Western blot分析。结果与结论:①细胞形态学、细胞生长特性及免疫细胞化学染色显示,实验不仅得到了纯度高的小鼠胰腺干细胞,而且该细胞经雷公藤多糖诱导后能形成球形的胰岛样结构,有细长的蒂与培养瓶底部相连,双硫腙染色呈铁红色;②Western-blot检测显示,胰岛样细胞团中有β细胞素蛋白的表达;③结果表明,小鼠胰腺干细胞可以体外经雷公藤多糖诱导分化为含有β细胞的胰岛样细胞团。

雷公藤多糖提取纯化工艺的研究

目的经正交设计的雷公藤多糖提取纯化实验,选出最佳雷公藤多糖提取纯化的工艺。方法雷公藤叶和根经粉碎后用无水乙醇润湿,封口过夜,挥干药材;用石油醚60～90℃回流提取1h,重复实验1次,挥干药材;用95%乙醇回流提取1h,重复实验2次,挥干药材;用去离子水水煮1h,重复实验2次,浓缩水提取液到与药材重量相等。浓缩水提取液经乙醇醇沉,抽滤得到沉淀物经过氧化氢脱色后,以不同水提取液与乙醇的比例、氯仿与正丁醇体积比、脱色液与Sevage试剂(氯仿:正丁醇)体积比、脱蛋白时间、除蛋白次数进行4因素3水平正交实验。结果雷公藤多糖提取纯化最佳工艺条件为水提取液与乙醇的比例为80%,氯仿与正丁醇为4∶1,脱色液与Sevage试剂为3∶1,次数为2次,雷公藤多糖的脱蛋白率为78. 5%,多糖损失率为33. 3%。结论经正交实验选出最佳雷公藤多糖提取纯化的工艺条件科学合理、稳定可行,为纯化雷公藤多糖提供实验依据。