环保透明脱蜡液Van-Clear与传统试剂在组织处理后HE染色及FISH法检测乳腺癌HER2基因中的比较

目的比较环保透明脱蜡液Van-Clear和二甲苯透明脱蜡制作的组织切片苏木精-伊红(HE)染色优良率,对比荧光原位杂交(FISH)法检测2种透明脱蜡液制作的乳腺癌组织切片的人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增阳性率,探讨Van-Clear替代二甲苯的可行性。方法收集中山市博爱医院2013年2月~2015年12月门诊及住院部送检的乳腺浸润性导管癌标本89例、乳腺增生标本125例、子宫平滑肌瘤标本193例、子宫平滑肌肉瘤标本12例、肺癌穿刺标本16例、绒毛标本139例,同一病变部位切取2个样本,用抽签法随机分为2组,命名为A、B组。A组采用二甲苯透明脱蜡制作切片574张;B采用Van-Clear透明脱蜡制作切片574张。依据切片染色情况判定切片等级,采用SPSS20.0软件比较A、B组切片HE染色优良率;A、B组中乳腺浸润性导管癌标本再各制作切片89张,采用SPSS 20.0软件比较FISH法检测的HER2基因扩增的差异。结果 (1)生物显微镜下,A、B两组切片HE染色结果细胞轮廓清晰、透明度好,细胞核与细胞质蓝红相映、色彩鲜艳,核质对比明显,核膜及核染色质颗粒清晰可见、分辨良好,分裂象染色体呈现黑蓝色,各种成分层次分明。(2)A、B两组切片HE染色优良片分别为570张、572张,中等、差片4张、2张。染色优良率分别为99.30%、99.65%,两组间染色优良率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05)。(3)荧光显微镜下,A、B两组切片乳腺浸润性导管癌HER2双探针FISH检测结果组织轮廓和背景均清晰,探针定位准确,可见耀眼的红/绿荧光信号。(4)A、B两组切片检测乳腺浸润性导管癌HER2基因,FISH阳性率分别为24.72%、26.97%,两组间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05),且FISH结果符合率为97.75%。结论环保透明脱蜡液Van-Clear有替代传统试剂二甲苯应用于组织切片HE染色及FISH法检测乳腺癌HER2基因的潜在可能。

聚羟基丙烯酸和Van-clear在qRT-PCR法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变中的应用研究

目的比较环保固定液聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统固定液4%中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯应用于实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法,检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变率的敏感性、特异性及符合率的差异,评估qRT-PCR法及其环保技术平台的临床应用价值。方法选取中山市博爱医院、中山市中医院2013年5月至2016年3月期间手术切除的原发性NSCLC标本91例,同一肿瘤病变部位切取5个样本,采用随机数字表法分为A、B、C、D、E。A组使用4%中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、直接测序法检测EGFR基因突变;B组使用4%中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;C组使用聚羟基丙烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;D组使用4%中性缓冲甲醛固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;E组使用聚羟基丙烯酸固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变。分别测定5组NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21号外显子的突变情况。结果 (1)B、C、D、E组与A组比较,EGFR基因发生突变人数百分率、基因靶位点突变率的差异均无统计学意义(P>0.05);(2)B、C、D、E组与A组比较,EGFR靶位点突变检测结果的灵敏度好、特异度强、符合率高。结论聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统试剂,应用于qRT-PCR法检测NSCLC中EGFR基因突变,与以传统试剂应用于直接测序法的检测结果一致性好,有在临床推广应用的意义和价值。

聚羟基丙烯酸和4%中性缓冲甲醛对苏木精伊红染色及荧光原位杂交检测乳腺癌HER-2基因影响的比较

背景与目的：适当的组织固定、透明脱蜡是苏木精伊红（hematoxylineosin，HE）染色及荧光原位杂交（fluorescence加s／tuhybridization，FISH）检测乳腺癌HER．2基因一个重的步骤。该研究旨在对比环保固定液聚羟基丙烯酸和4％中性缓冲甲醛固定制作的组织切片HE染色优良率，荧光原位杂交检测两者固定制作的乳腺癌组织切片的HER-2基因扩增阳性率，探讨其替代传统固定液4％中性缓冲甲醛的可行性。方法：收集中山市博爱医院2011年3月一2015年1月门诊及住院部送检的乳腺癌69例、乳腺纤维腺瘤41例、子宫平滑肌瘤40例、宫颈组织25例、胎盘组织25例，各取材2块，每例标本的2块组织用抽签法随机分2组，一组采用4％中性缓冲甲醛固定制作HE切片200张，另一组采用聚羟基丙烯酸固定制作HE切片200张。依据切片染色情况判定切片等级，采用SPSS19．0比较两者HE染色优良率；两组乳腺浸润性导管癌组织再各制作切片69张，采用SPSS19．0比较FISH技术检测的HER．2基因扩增率。结果：①聚羟基丙烯酸、4％中性缓冲甲醛固定组组织切片HE染色优质片分别为155张、166张，优良片41张、33张，中等片3张、1张，差片1张、O张，染色优良率分别为98．0％、99．5％，两组间优良率差异无统计学意义（x2=1．33，P=-0．25）。②聚羟基丙烯酸、4％中性缓冲甲醛固定组组织切片FISH阳性率分别为26．09％、23．19％，两组间阳性率差异无统计学意义C=0．50，P〉0．05）。结论：聚羟基丙烯酸固定制作的组织切片HE染色效果及荧光原位杂交检测乳腺癌HER．2基因扩增效果跟传统固定液4％中性缓冲甲醛相比差异无统计学意义，符合环保求，有推广使用的可能。

聚羟基丙烯酸和Van-clear替代传统试剂在FISH法检测宫颈hTERC基因中的应用比较

目的:观察环保固定液(聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合)替代传统固定液[4%(体积分数)中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯]应用于荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)法检测宫颈组织中人端粒酶核糖核酸组分(human telomerase RNA component,h TERC)基因扩增的差异。方法:收集2013年3月到2015年4月于中山市博爱医院妇科住院部送检的255例宫颈组织标本,同一病变部位切取4个样本,分为4组,命名为A、B、C、D组:A组采用4%中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片;B组采用聚羟基丙烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片;C组采用4%中性缓冲甲醛固定、Van-clear透明脱蜡制作切片;D组采用聚羟基丙烯酸固定、Van-clear透明脱蜡制作切片。采用FISH技术检测4组宫颈标本中h TERC基因。结果:在FISH法检测宫颈各级病变组织h TERC基因时,荧光显微镜下,A、B、C、D四组的组织轮廓和背景均清晰,探针定位准确,可见耀眼的红/绿荧光信号。B、C、D组与A组阳性率相比差异均无统计学意义(P>0.05),且FISH结果符合率高。结论:环保试剂聚羟基丙烯酸、Van-clear有潜在的可能单独或联合替代4%中性缓冲甲醛、二甲苯应用于FISH法检测宫颈h TERC基因。

不同固定时间和烤片时间对乳腺浸润性导管癌HER-2、p16免疫组化染色的影响

免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合的原理，为肿瘤的鉴定、来源、分型及发现微小转移灶的研究提供重要的分析诊断方法。免疫组化操作步骤繁琐、操作过程影响因素较易误诊。一方面，由于组织固定不当引起的。固定不当可引起组织结构发生自溶和定位不确。另一方面，烤片时间也常常影响免疫组化染色效果。本实验拟通过比较86例乳腺浸润性导管癌组织在不同固定及烤片时间下进行HER-2、p16蛋白免疫组化染色的差异，为乳腺浸润性导管癌组织HER-2、p16蛋白免疫组化染色标准化提供实验依据。

p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测对HSIL+病变诊断的临床价值

目的探讨p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测对HSIL+病变诊断的临床价值。方法募集2017年3月-2020年8月期间,于中山市博爱医院妇产科就诊,组织学证实为宫颈炎患者209例、LSIL患者169例、HSIL患者131例和宫颈癌患者86例作为研究对象,回顾分析研究对象术前细胞学样本p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA检测结果,纵向比较p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测在不同级别宫颈病变的阳性率的差异,横向比较p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测在相同宫颈病变的阳性率的差异,综合评估p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测诊断HSIL+病变效能的差异。结果①纵向比较:p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测阳性率随宫颈病变程度的加重呈趋势性升高(p16/Ki-67染色:χ^(2)=374.34,P<0.001;HPV E6/E7mRNA检测:χ^(2)=289.21,P<0.001;联合检测:χ^(2)=343.90,P<0.001)。②横向比较:在宫颈炎、LSIL、宫颈癌组,p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测阳性率之间差异均不具有统计学意义(均P>0.05)。在HSIL组,p16/Ki-67染色和联合检测之间阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=8.09,P=0.004);HPV E6/E7mRNA和联合检测之间阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=11.30,P=0.001)。③p16/Ki-67染色、HPV E6/E-7mRNA和联合检测诊断HSIL+的灵敏度,总体差异有统计学意义(χ^(2)=7.69,P=0.021)。p16/Ki-67染色与联合检测法之间的灵敏度差异有统计学意义(χ^(2)=7.29,P=0.007);HPV E6/E7mRNA检测与联合检测法之间的灵敏度差异有统计学意义(χ^(2)=4.84,P=0.028)。p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测诊断HSIL+的特异度及符合率的总体差异不具有统计学意义(χ^(2)_(1)=5.38,P1=0.068;χ^(2)_(2)=0.93,P2=0.628)。结论p16/Ki-67染色、HPV E6/E7mRNA和联合检测均可有效筛出HSIL+病变,但是联合检测能显著提高HSIL+病变诊断的灵敏度,降低漏诊率,同时保持了较好的特异度和符合率,建议将p16/Ki-67染色和HPV E6/E7mRNA联合检测作为早期诊断HSIL+病变的策略。

P16及Ki67在宫颈鳞状上皮内肿瘤中的表达及临床意义分析

目的分析P16及Ki67在宫颈鳞状上皮内肿瘤(癌前病变)中的表达及临床意义。方法随机选择我院2014年10月~2017年10月确诊为慢性宫颈炎、低级别上皮内肿瘤、高级别上皮内肿瘤的患者100例,进行病变部位的组织活检、HE染色,并且利用免疫组化SP法检测患者体内P16与Ki67的表达情况。结果宫颈病变患者P16的表达随着病变程度的增加而增加,P16阳性表达若为+,病变细胞胞核和胞浆均着色,主要分布于基底部,若为++,下1/3出现病变细胞,若为+++,超过1/3出现病变细胞;宫颈病变患者Ki67的表达随着病变程度的增加呈增高趋势,Ki67阳性表达若为+,病变细胞胞核和胞浆均着色,主要分布于基底部,若为++,下1/3出现病变细胞,若为+++,超过1/3出现病变细胞。结论P16、Ki67的表达与宫颈癌前病变程度正相关,确定P16、Ki67的表达量,对宫颈癌前病变的诊断具有重要临床意义。

免疫组织化学法检测子宫颈组织p16蛋白表达的石蜡切片厚度探讨

目的:探讨免疫组织化学法检测子宫颈组织中p16蛋白表达时的石蜡切片厚度。方法:收集2014年1月至2018年3月中山市博爱医院病理检查结果为慢性宫颈炎(150例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL,126例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL,96例)及宫颈癌(78例)患者的子宫颈组织标本进行p16免疫组织化学染色,并采用条件Logistic回归分析石蜡切片厚度为2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0μm的标本p16蛋白表达的差异。结果:随着切片厚度增加,病变部位所在细胞核p16蛋白染色逐渐加深。慢性宫颈炎和宫颈癌患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异无统计学意义(χ~2=7. 817和1. 332,均P> 0. 05);而LSIL和HSIL患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异有统计学意义(χ~2=17. 688和10. 182,P <0. 05或P <0. 01),当标本切片厚度为3. 0～5. 0μm时可获得较为稳定而可靠的检测结果。结论:免疫组织化学法行子宫颈组织p16蛋白检测推荐的标本切片厚度为3. 0～5. 0μm。

外周血循环肿瘤细胞检测在筛查卵巢上皮性癌中的应用

【目的】检测健康女性、卵巢良性上皮性肿瘤患者及卵巢恶性上皮性癌患者(含各分期)外周血循环肿瘤细胞(CTC)阳性率及数量差异,初步评估CTC检测在卵巢恶性上皮性癌筛查中的临床意义。【方法】选取中山市博爱医院、中山大学附属中山医院2016年1月至2017年12月期间,151例健康女性体检者(正常组)、138例卵巢上皮性良性肿瘤患者(良性组)、92例卵巢上皮性癌,含所有类型及临床分期的卵巢上皮性癌患者(恶性组)为研究对象,卵巢肿瘤患者以病理组织学结果为金标准,采集患者术前和正常组静脉血液样本,采用免疫磁珠微粒阴性富集法和免疫荧光原位杂交法检测研究对象的CTC,使用SPSS 20.0比较3组外周血CTC阳性率及数量差异;统计分析CTC检测诊断卵巢上皮性癌的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值和阴性预测值,综合评估CTC检测诊断卵巢上皮性癌的价值。【结果】(1)正常组、良性组与恶性组CTC阳性率分别为0、0和90.22%,总体差异具有统计学意义(P <0.001);恶性组与正常组、恶性组与良性组相比差异均具有统计学意义(均P <0.001)。(2)恶性组Ⅰ～Ⅳ期CTC阳性率分别为81.25%、89.47%、90.32%和96.15%,差异无统计学意义(P=0.47)。(3)正常组、良性组与恶性组CTC均数分别为0、(0.02±0.15)和(8.27±10.88)个,总体差异有统计学意义(P <0.001),良性组与正常组间无差异(P=0.97),恶性组与良性组、恶性组与正常组差异均有统计学意义(均P <0.001)。(4)恶性组Ⅰ～Ⅳ期CTC均数分别为(2.13±1.31)个、(2.68±1.53)个、(5.90±2.95)个、(19.35±15.19)个,总体差异有统计学意义(P <0.001),除Ⅲ期与Ⅱ期(P=0.19)、Ⅲ期与Ⅰ期(P=0.14)、Ⅱ期与Ⅰ期(P=0.84)差异无统计学意义外,其余各期之间均有统计学意义(均P <0.001)。(5)CTC诊断卵巢上皮性癌的灵敏度、特异度、符合率分别为90.22%、100%、97.64%。【结论】卵巢上皮性癌患者CTC阳性率与均数均为最高;CTC均数与卵巢上皮性癌临床分期具有相关性,提示CTC在卵巢上皮性癌的早期诊断及临床分期预测中具有较高的临床价值。

Actin在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床病理意义

目的分析Actin在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组化SP法检测117例乳腺浸润性导管癌组织中Actin的表达,分析Actin表达与其临床病理、分子分型的关系。结果①Actin在乳腺浸润性导管癌中的表达主要在间质细胞中,仅4例三阴性乳腺浸润性导管癌(TNBC)同时存在癌细胞和间质细胞表达;而Actin在正常乳腺及癌旁乳腺组织中的肌上皮细胞均有表达,乳腺导管上皮及间质细胞则无表达。②Actin在乳腺浸润性导管癌间质细胞中的高表达水平与肿瘤直径及淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、组织学分级及临床分期无关(P>0.05)。③Actin在乳腺浸润性导管癌Luminal A型、Luminal B型(Her2+)、Luminal B型(Her2-)、Her2受体(+)和三阴性(TNBC)型的间质细胞中阳性率分别为28.6%、22.4%、42.9%、59.1%和81.3%,Actin在TNBC中的表达水平明显高于Luminal A型、Luminal B型(Her2+)、Luminal B型(Her2-)的表达水平(P<0.05),Her2受体阳性中Actin的表达水平高于Luminal B型(Her2+)的表达水平(P<0.05),其他亚型间两两比较差异不显著(P>0.05)。结论Actin不仅在乳腺浸润性导管癌不同分子亚型中的表达存在差异,并且与肿瘤大小及淋巴结转移有关。检测Actin在乳腺浸润性导管癌中的表达,有助于为乳腺癌不同分子亚型的鉴别诊断及个体化靶向治疗(特别是TNBC型)提供新的研究方向。Actin在乳腺癌与正常乳腺及癌旁组织中的差异表达有利于乳腺良、恶性病变的鉴别诊断。

不同pH值的40mL/L磷酸盐缓冲甲醛液固定乳腺癌组织对FISH法检测HER2基因结果的影响

目的探讨不同pH值的40mL/L磷酸盐缓冲甲醛固定液对荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)法检测乳腺原发性浸润癌人类表皮生长因子受体2(human pidermal growth factor receptor 2,HER2)基因扩增结果的影响。方法选取中山市博爱医院2014年3月至2017年1月期间,手术切除的乳腺癌75例,同一肿瘤病变部位取材4块,按照固定液pH不同,随机分为A、B、C、D组。固定液使用40mL/L磷酸盐缓冲甲醛,A^D组固定液pH值分别为6.0、7.0、7.5、8.0,分别固定15h后制作石蜡切片。采用FISH法检测HER2基因扩增情况,比较各组HER2基因扩增检测结果的差异。结果 (1)在荧光显微镜下,A、D组的组织轮廓较模糊、出现细胞碎片、部分探针定位欠佳、出现信号不规则甚至丢失、核溶解现象,见明亮的桔红/绿荧光信号。B、C组的组织轮廓清晰而完整、背景洁净、探针定位准确,见耀眼的桔红/绿荧光信号。(2)B、C组HER2基因扩增阳性率稳定在24.00%~25.33%;B、C组的基因扩增阳性率显著高于A、D组(P<0.05)。结论采用荧光原位杂交法检测乳腺原发性浸润癌HER2基因扩增,固定液的pH值在7.0~7.5之间可获得可靠的检测结果。

聚羟基丙烯酸和Van-clear替代甲醛和二甲苯在苏木精伊红染色的应用比较

病理诊断是医学界公认的疾病诊断＂金标准＂,而及时和恰当的固定、透明与脱腊是制作石蜡切片及苏木精伊红（Hematoxylin eosin,HE）染色的重要步骤。甲醛作为固定液、二甲苯作为透明脱蜡液是病理学界的一贯做法。国内外相关研究发现甲醛具有致癌和促癌作用（[1-2]）。二甲苯对眼及上呼吸道有刺激作用,长期接触有神经衰弱综合症,女性有可能导致月经异常,严重危害病理工作者的身心健康（[3-4]）。因此,寻找环保的固定.

Van-clear替代二甲苯对乳腺癌Her-2蛋白表达的影响

目的比较环保透明脱蜡液Van-clear和二甲苯在免疫组织化学法检测乳腺癌Her-2蛋白表达的差异,探讨Van-clear替代二甲苯的可行性。方法收集中山市博爱医院2013-06—2017-03间住院部送检的乳腺浸润性导管癌标本95例,同一肿瘤病变部位切取2个样本,用抽签法随机分为A、B组。A组采用二甲苯透明脱蜡制作切片95张;B采用Van-clear透明脱蜡制作切片95张。观察生物显微镜下Her-2免疫组织化学染色大体情况,采用免疫组织化学法检测Her-2蛋白表达情况,SPSS20.0比较两组间蛋白阳性率的差异。结果生物显微镜下,A、B两组切片Her-2免疫组织化学染色结果:背景清晰、阳性着色定位准确(胞膜)、阳性强度可靠、呈色鲜明,无非特异性染色产生,阴性、阳性对照染色结果可靠。(2)A、B两组切片Her-2蛋白阳性率分别为24.2%、26.3%,两组间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05),且Her-2蛋白表达符合率为97.9%。结论环保透明脱蜡液Van-clear有潜能替代传统试剂二甲苯应用于免疫组织化学法检测乳腺癌Her-2蛋白表达。

不同体积的4%中性缓冲甲醛固定液对全自动免疫组化法检测乳腺原发性浸润癌Her2蛋白的影响

乳腺癌是女性最常见的癌症,其发病率居女性恶性肿瘤首位。《乳腺癌HER2检测指南》（2014版）明确指出,推荐采用免疫组化法检测Her2蛋白的表达水平。手术标本的充分、及时和规范的固定是保障乳腺癌Her2检测质量的基础,固定不当可引起细胞、组织抗原的活性降低和定位不准确,进而影响Her2蛋白的检测与判读。甲醛固定液渗透能力约为1 mm/h,其固定液所需量可能因为检测抗原的不同而有差异。

聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌中的应用

目的探讨环保固定液聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌的应用价值。方法手术切除且术后病理证实为结核病标本96例,每例标本同一病变部位取材2块,用抽签法随机分为A、B组。A组采用4%中性缓冲甲醛固定,B组采用聚羟基丙烯酸固定,均制作切片96张。采用Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌,使用SPSS20.0分析比较A、B组切片结核杆菌阳性率的差异。结果 (1)生物显微镜下,两组切片染色结果:背景洁净、细胞轮廓清晰、胞核呈蓝色,背景着色为淡蓝色、结核杆菌呈鲜红色、对比度好。且同一病变部位B组切片显示结核杆菌数量显著多于A组。(2)A、B两组切片结核杆菌阳性率分别为58.3%和66.7%,两组间阳性率差异显著(χ2=6.125,P<0.05)。结论环保固定液聚羟基丙烯酸有潜能替代传统试剂4%中性缓冲甲醛应用于Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌。

聚羟基丙烯酸组织固定在抗酸杆菌和Her2蛋白检测中的应用

目的探讨环保固定液聚羟基丙烯酸在特殊染色法检测抗酸杆菌和免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白的应用价值。方法收集病理证实的结核标本72例、麻风标本6例、乳腺浸润性导管癌标本116例,每例标本同一病变部位取材2块,分为A、B组。A、B组分别采用4%中性缓冲甲醛、聚羟基丙烯酸固定,各制作结核标本切片72张、麻风标本切片6张、乳腺癌标本切片116张。采用特殊染色法检测结核、麻风切片中抗酸杆菌,免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白,同时分析比较A、B组切片中抗酸杆菌阳性率、乳腺癌Her2蛋白阳性率的差异。结果生物显微镜下,A、B组切片抗酸杆菌染色:背景洁净,细胞轮廓清晰,胞核完整呈蓝色,背景着色为淡蓝色,抗酸杆菌呈鲜红色,对比度好,阴性、阳性对照染色结果可靠。(2)生物显微镜下,A、B组切片Her2免疫组化染色:背景清晰,阳性着色定位准确(胞膜),阳性强度可靠、染色鲜明,无非特异性染色产生,阴性、阳性对照染色结果可靠。(3)A、B组切片抗酸杆菌阳性率分别为57.7%、59%,两组间阳性率差异不显著(P>0.05),且抗酸杆菌检测结果符合率为98.7%。(4)A、B组切片Her2蛋白阳性率分别为24.1%、25.9%,两组间阳性率差异不显著(P>0.05),且Her2蛋白检测结果符合率为98.3%。结论在特殊染色法检测抗酸杆菌和免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白中,环保固定液聚羟基丙烯酸有潜能替代传统试剂4%中性缓冲甲醛,有望在临床推广应用。

Van-clear在实时荧光定量PCR法检测非小细胞肺癌驱动基因突变中的应用研究

随着非小细胞肺癌个体化治疗的发展,精准医疗正逐渐成为肿瘤治疗的新方向,而＂伴随诊断＂作为精准医疗的基石也日益受到关注。与癌症发生、发展相关的重要基因称为驱动基因。研究发现,表皮生长因子受体（EGFR）及KRAS等驱动基因突变状态与非小细胞肺癌（NSCLC）靶向治疗密切相关。

聚羟基丙烯酸在宫颈组织P16蛋白表达检测中的应用

目的:观察聚羟基丙烯酸(环保固定液)与10%中性缓冲福尔马林(传统固定液)在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达的结果,探讨其替代10%中性缓冲福尔马林的可行性。方法:收集2015年3月—2017年11月于南方医科大学附属中山博爱医院门诊及妇科住院部送检的宫颈组织标本245例,其中包括正常及慢性宫颈炎组52例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组87例,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组61例,宫颈癌组45例。同一病变部位取材2块,随机分2组,命名为A、B组。A组采用10%中性缓冲福尔马林固定制作切片245张;B组采用聚羟基丙烯酸固定制作切片245张。采用免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达情况。结果:①生物显微镜下,A、B组切片均背景清晰、阳性着色定位准确、阳性强度可靠、呈色鲜明,无非特异性染色产生、阴性和阳性对照染色结果可靠。②慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的A组P16蛋白阳性率分别为5.77%、35.63%、80.33%和100.00%,慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的B组P16蛋白阳性率分别为5.77%、33.33%、81.97%和100.00%。A、B组间对应的各级宫颈病变,P16蛋白表达阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:用聚羟基丙烯酸替代10%中性缓冲福尔马林对免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达阳性率无明显影响,聚羟基丙烯酸作为固定液在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达中有一定的使用价值。