应用国际血细胞复检规则中可疑警示条款筛查初诊白血病的探讨

目的 Beckman Coulter LH755血液分析仪显示的形态学可疑警示信息结合国际血细胞复检规则中相应条款,探讨其用于初诊白血病筛查的价值,为制定本室血细胞复检规则提供依据。方法 1 984例患者标本分为初诊非白血病组(1 832例),初诊白血病组(73例)和复诊组(79例),所有标本同时进行仪器分析和手工白细胞分类及细胞形态观察,参照国际复检规则,对初诊非白血病组和白血病组标本涉及的国际血细胞可疑警示条款进行评价,观察白血病和非白血病患者治疗前后变化;运用受试者工作特征(ROC)曲线,观察其对初诊白血病筛查的价值。结果本组初诊病例724例涉及可疑警示条款,其中非白血病组655例,白血病组69例,46例髓系白血病均涉及可疑警示条款,且显微镜镜检阳性;其中条款34(左移报警)和37(原始细胞报警),敏感性和阳性预期值均较高,条款30[血小板(PLT)聚集报警],31(PLT报警)和35[不典型和(或)变异Lym]阳性预期值较低;治疗后患者检出假阴性病例28例,其中8例检出原始细胞,这些标本均来自于白血病治疗后患者(28.57%,8/28);采用ROC曲线分析,条款37(原始细胞报警)对初诊白血病价值最高(AUC=0.821),其次为条款34(左移报警),32(IG报警),26(白细胞结果不可靠)和35[不典型和(或)变异Lym],而条款30(PLT聚集报警)和31(PLT报警)诊断价值较小。结论参照国际血细胞复检可疑警示条款对于初诊白血病筛查有重要价值,白血病患者治疗后细胞形态更为多样和复杂,仪器示警不能直接提供血细胞形态变化的确切信息,需进一步用显微镜镜检血涂片进行核实;当标本涉及条款37(原始细胞报警)时应予以显微镜镜检,以排除白血病可能,涉及条款26(白细胞结果不可靠),32(IG报警),34(左移报警),35[不典型和(或)变异Lym]时也应引起重视,以免造成漏诊和误诊。

慢性髓细胞白血病患者染色体分析及bcr／abl融合基因转录本定量的临床意义

目的探讨慢性髓细胞白血病(CML)患者染色体分析与bcr／abl融合基因定量的临床应用价值。方法17例CML患者采用骨髓细胞短期培养法制备染色体,应用G、R显带技术进行染色体分析,同时采用实时定量RT-PCR技术进行bcr／abl融合基因定量检测,并对其中的9例患者进行了跟踪观察。结果全部患者均检出Ph染色体及表达bcr／abl融合基因,阳性患者之间19cr／abl表达水平差异很大。常规药物治疗后稳定于慢性期的4例患者,bcr／bal表达水平轻度上升或下降,未发现新的染色体异常;进入急变期的3例患者bcr／abl表达平均上升了9．06倍,均出现新的附加染色体异常;2例异基因骨髓移植的患者bcr／abl表达水平随临床治疗而发生变化;bcr／abl变化趋势相同而细胞遗传学结果不同的患者,对药物治疗的反应不同,预后也不一样。结论染色体分析结合bcr／abl基因定量较为全面地反映了CML患者的生物学特性,与疾病进展密切相关,对CML的诊断、疗效评价、预后判断反映白血病细胞负荷有较大的临床价值。

血液分析仪白细胞分类报警阈值的ROC曲线分析

目的应用受试者工作特征(ROC)曲线对CELL-DYN 3700血液分析仪白细胞分类结果进行分析,建立本室最佳报警参考阈值。方法将238例患者静脉血标本以EDTA-K2抗凝,分别用仪器和显微镜进行白细胞分类,以SPSS 10.5统计软件的ROC曲线对5种分类参数不同阈值进行分析,选择曲线下面积(AUC)最大者为本实验室报警阈值,并与仪器设置阈值进行比较。结果经ROC曲线分析,仪器设置各参数阈值分别为中性粒细胞(N)<50%或>75%、淋巴细胞(L)<20%或>40%、单核细胞(M)>12%、嗜酸性粒细胞(E)>5%、嗜碱性粒细胞(B)>2%诊断试验整体准确性中等(AUC=0.792);当N>80%或N<20%、L>50%或L<10%、M>10%、E>5%、B>1.5%时AUC最大(AUC=0.926),诊断试验整体准确性优秀。最佳报警阈值对显微镜分类正常或异常标本判别的敏感度、特异度和准确度分别为0.91、0.90和0.91,明显优于仪器设置阈值。结论实验室应建立自己的报警阈值,以提高显微镜协同工作的有效性。

LH755血细胞分析仪形态学示警信息指导血涂片复检的价值

目的对Coulter LH755血细胞分析仪的形态学示警信息指导血细胞分析后血涂片复检的价值进行评估,为制定血涂片复检规则提供依据。方法 1364例患者标本分为初诊和复诊组,同时进行仪器分析和手工白细胞分类及细胞形态观察,参照国际涂片镜检阳性标准,对涉及的形态学示警信息进行分析,评估其用于血涂片复检的有效性。结果 1364例患者标本涉及15种报警信息,共有464例标本出现形态学示警信息,示警率为34.02%,参照国际血液学复检专家组镜检阳性判断标准,初诊组灵敏度、特异度、准确度分别为84.76%、77.05%、78.29%,示警率为32.87%,复诊组分别为63.64%、50.00%、60.10%,示警率为60.71%;各种示警信息共出现845次,真阳性示警319次,以原始细胞示警(包括原始淋巴细胞、原始单核细胞、原始粒细胞示警)阳性预期值最高(67.57%),其次为未成熟粒细胞2(48.48%),核实Diff(40.74%)等,而红细胞凝集,血小板凝块,巨血小板等示警信息,阳性预期值较低;根据形态学示警信息进行复检,初诊及复诊患者组均有假阴性标本,复诊组假阴性率高于初诊患者组,淋巴肿瘤假阴性率多于髓系肿瘤。结论 Coulter LH755血细胞分析仪形态学示警信息对于指导初诊患者血涂片复检有一定价值,但治疗后的患者细胞形态复杂、多样,形态学示警信息不能直接提供血细胞形态变化的确切信息。

急性白血病、慢性髓细胞白血病及骨髓增生异常综合征患者染色体分析

目的探讨染色体分析在急性白血病(AL)、慢性髓细胞白血病(CML)及骨髓增生异常综合征(MDS)诊断及预后判断中的价值。方法采用骨髓细胞短期培养法,应用G、R显带技术对238例AL、CML及MDS患者进行染色体分析。结果56.30%的患者有染色体异常,其中数目异常占6.30%,结构异常占39.08%,复杂异常占10.92%;各组患者中CML组异常检出率最高,占总病例的34.87%;AL组染色体畸变最为复杂,累及除3,4,5,10及X以外的所有染色体,11例患者出现了特异性染色体畸变,与患者预后相关;CML加速/急变期出现了附加染色体异常;核型异常的MDS患者均检出了8三体,7例为单纯8三体,2例RAEB—T患者均为复杂异常。结论染色体检查对于疾病诊断与鉴别、指导临床治疗、判断预后等具有重要意义。

慢性粒细胞白血病患者染色体检查及预后意义探讨

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者染色体变化的有关特点及预后意义。方法染色体制备采用骨髓细胞短期培养法,应用G、R显带技术对85例CML患者的骨髓细胞进行遗传学分析。结果85例CML患者中,78例检出典型Ph染色体,占91.76%,3例为变异Ph易位,占3.53%,4例Ph染色体阴性,占4.71%,10例核型呈嵌合状态,13例出现附加染色体异常,主要为+8,i(7),+Ph,+22,+12等,其中9例为加速和急变期患者,占64.29%。结论CML是一种高度异质性疾病,非随机的附加染色体异常与患者临床分期高度相关。CML患者进行染色体分析对于疾病的诊断及鉴别、指导临床治疗、判断预后具有重要意义。

病态巨核细胞在骨髓增生异常综合征中诊断和鉴别诊断的意义

目的探讨病态巨核细胞在骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）中诊断及鉴别诊断的意义。方法选择我院2009年1月-2010年12月收治的31例MDS患者和89例其他全血细胞减少性疾病患者，对其骨髓涂片进行瑞一姬染色，观察骨髓巨核细胞，并计算病态巨核细胞的检出率。结果所有患者骨髓涂片均检出病态巨核细胞，溶血性贫血组、巨幼细胞贫血（megaloblastie anemia,MA）组、慢性再生障碍性贫血组和急性淋巴细胞白血病组病态巨核细胞检出率分别与MDS组比较，差异均有统计学意义（P均〈0．01）；各疾病组中，淋巴样小巨核细胞和单圆核小巨核细胞在MDS组中检出率最高（45．16％，48．39％），大单圆核巨核细胞和多圆核巨核细胞在MA组中检出率最高（45．45％，100．00％）。结论不同血液疾病中骨髓病态巨核细胞的表达不同，淋巴样小巨核细胞和单圆核小巨核细胞在MDS的诊断与鉴别诊断中有一定的临床价值。

慢性粒细胞白血病和原发性骨髓纤维化患者bcr/abl融合基因表达及临床意义

目的 探讨bcr/abl融合基因的表达水平在慢性粒细胞白血病(CML)和原发性骨髓纤维化(MF)患者的诊断、疗效及预后观察中的意义。方法 采用荧光定量逆转录多聚酶链反应(RT -PCR)技术,对18例初、复治CML、7例MF患者的骨髓或外周血单个核细胞进行了bcr/abl融合基因检测,并对其中2例行异基因骨髓移植(allo -BMT)患者进行了短期随防。结果 13例慢性期(CP)CML ,12例不同程度表达bcr/abl融合基因,占92 .3% ,3例加速期(AP) ,急变期(BC)CML ,2例表达bcr/abl融合基因,占6 6 .7% ,2例患者allo -BMT后一年内未检出bcr/abl融合基因,三者之间有非常显著差异P <0 .0 1;8例初诊患者WBC数及bcr/abl融合基因表达水平明显高于常规治疗组;7例MF患者有1例表达bcr/abl基因。结论 bcr/abl基因是CML发病的分子基础,定量检测bcr/abl融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义;MF患者可能与CML关系密切,对MF患者应进行跟踪观察。

血小板减少患者骨髓巨核细胞观察

目的:探讨骨髓检查及巨核细胞形态学指标在血小板减少时的价值。方法:对5 6 1例血小板减少患者进行了骨髓分析,并对巨核细胞的分化及其形态等进行了观察。结果:血小板减少以原发性血小板减少性紫癜(ITP)及各种急性白血病(AL )患者最为常见,分别占38.7%和2 4 .6 % ;再生障碍性贫血(AA)及AL患者骨髓巨核细胞数明显减少(P<0 .0 1) ;ITP、AA、AL 及骨髓增生异常综合征(MDS)患者巨核细胞明显成熟障碍,伴有巨核细胞产生血小板数量减少;MDS及AL时巨核细胞有病态造血。结论:骨髓巨核细胞的分化及形态观察在血小板减少时查找原因中的作用十分重要。对于不明原因的血小板减少患者,应重视骨髓巨核细胞检查。

乳腺癌患者HER2基因表达状态及临床病理意义探讨

人类表皮生长因子受体2（HER2）定位于17号染色体q12-21,是具有酪氨酸激酶活性的跨膜生长因子受体。乳腺癌HER2基因扩增或蛋白过表达,与疾病进展和预后相关。目前临床上选用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）法进行筛查,

性发育和生育咨询患者染色体分析

目的探讨具有性发育异常、原发性闭经以及不良孕产史患者染色体变化的有关特点和意义。方法染色体制备采用淋巴细胞培养,应用G、C等显带技术进行细胞遗传学分析。结果1098例性发育和生育咨询患者染色体异常检出率为6.47%;各组数目异常、性发育异常和原发性闭经患者结构异常多涉及性染色体;不良孕产史夫妇结构异常核型却以常染色体异常为主。结论20年工作表明,染色体分析十分必要,对于明确病因、鉴别诊断具有重要意义。

405对不良孕产史夫妇细胞遗传学分析(附3例世界首报核型家系调查)

目的探讨不良孕产史夫妇染色体变化的有关特点和意义。方法染色体制备采用淋巴细胞培养或骨髓细胞短期培养法,应用G、C等显带技术,对405对患者进行细胞遗传学分析,并对3例世界首报核型患者进行了家系调查。结果共检出异常核型17例,女11例,男6例,其中夫妻双方均检出异常核型者2例,异常发生率为1.87%;3例家系调查中,1例男性患者其母亲为相同核型的平衡易位携带者。结论不良孕产史夫妇进行染色体分析十分必要,平衡易位携带者有必要进行家系调查,以明确病因,指导妊娠。

贝克曼-库尔特LH750血细胞分析仪网织红细胞参数生物参考区间的建立

目的建立贝克曼-库尔特LH75O血细胞分析仪网织红细胞(RET)4项参数的生物参考区间。方法用LH75O血细胞分析仪对521名健康成人做网织红细胞检测,并将所得数据进行统计学分析。结果 RET%:男0.71~2.43,女0.63~2.13,RET#:男32.45~124.64,女25.81~91.52,IRF:男0.21~0.41,女0.20~0.38,男女组差异均有统计学意义(P【0.01);MRV:男99.27~123.48,女100.29~121.58,男女组差异无统计学意义(P】0.05)。结论成人网织红细胞4项参数生物参考区间因性别、仪器原理及实验室条件不同而存在差异,因此各实验室应建立自己的生物参考区间。

地西他滨联合减量米托蒽醌+阿糖胞苷方案治疗复发难治性急性髓系白血病的临床疗效及安全性分析

目的观察地西他滨（DAC）联合减量米托蒽醌＋阿糖胞苷（MA）方案（简称DAC联合方案）治疗复发难治性急性髓系白血病（AML）患者的疗效及安全性。方法选取2011年8月—2013年5月华中科技大学同济医学院附属荆州医院收治的复发难治性AML患者12例,以DAC联合方案治疗〔第1-5天地西他滨20 mg·（m2）-1·d-1,静脉滴注;第6-8天米托蒽醌8-12 mg/m2,静脉滴注;第6-8天、第10天阿糖胞苷100 mg/m2,静脉滴注〕。治疗前后观察患者血液学指标〔白细胞计数、血红蛋白（Hb）、血小板计数〕、外周血白细胞中原始和/或幼单核细胞比例（%）、骨髓有核细胞中原始和/或幼单核细胞比例（%）,骨髓细胞遗传学变化：染色体异常率、细胞遗传学缓解有效率,记录患者生存状况（自治疗结束随访至2013年12月）及毒副作用。结果治疗前后复发难治性AML患者Hb、血小板计数、外周血白细胞中原始和/或幼单核细胞比例、骨髓有核细胞中原始和/或幼单核细胞比例比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。复发难治性AML患者经1个疗程DAC联合方案治疗后,完全缓解（CR）4例（33.3%）、部分缓解（PR）3例（25.0%）、未缓解（NR）5例（41.7%）,缓解总有效率（ORR）为58.3%（7/12）。5例染色体异常（异常率为41.7%）患者治疗后1例获完全细胞遗传学缓解,2例部分细胞遗传学缓解,细胞遗传学缓解有效率为60.0%（3/5）。毒副作用主要为骨髓抑制及继发感染,经过输血和抗感染等支持治疗均可以耐受。患者中位生存时间为8.0个月。结论 DAC联合方案治疗复发难治性AML在血液学及细胞遗传学上可以获得较好疗效,且毒副作用较少,耐受性良好,可为临床治疗提供借鉴。

多指标检测对恶性浆膜腔积液的诊断价值

目的探讨核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(Ft)定量分析在良、恶性浆膜腔积液中的鉴别诊断价值。方法采用HPIAS-1000高清晰度图像分析系统定量测定57例良、恶性浆膜腔积液中脱落细胞的AgNOR颗粒12项参数,并对AgNOR形态进行观察分型;同时采用化学发光法测定CEA和Ft水平。结果AgNOR定量分析12项参数有9项参数良、恶性组比较,差异有统计学意义(P<0.01),形态分型有助于诊断,特别是聚集型的出现更具诊断价值,发现了汉字样AgNOR异型颗粒。AgNOR、CEA、Ft的敏感性分别为100.0%、57.1%、52.4%,特异性分别为96.2%、88.5%、69.2%,阳性预测值分别为95.5%、80.0%、57.9%,阴性预测值分别为100.0%、71.9%、64.3%,尤登指数(J)分别为0.96、0.46、0.12。结论浆膜腔积液核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)、CEA的联合测定对于良、恶性积液有重要的鉴别诊断价值。

荧光原位杂交（FISH）技术与免疫组织化学（IHC）技术应用于乳腺癌患者Her2基因检测的评价

目的探讨采用荧光原住杂交（FISH）技术检测乳腺癌患者中的Her2基因与免疫组织化学（IHC）检测Her2基因的结果的一致性以及导致两者差异的可能原因；了解荆州地区乳腺癌患者中Her2基因的分布。方法以FISH方法，对55例免疫组织化学分别为（3＋），（2＋），（1＋）和阴性（-）的乳腺癌新鲜石蜡切片标本进行Her2基因的检测。结果55例标本中，有16例采用FISH方法检测出Her2基因的表达；12例Her2基因表达（3＋）的标本中11例检测出Her2基因；7例Her2基因表达（2＋）的标本中5例检测出Her2基因；10例Her2基因表达（1＋）的标本中未检测出Her2基因；26例Her2基因表达（-）的标本中未栓测出Her2基因。结论初步筛查Her2基因状态可以首选免疫组织化学方法，对于IHC（2＋）的标本，应该行FISH确诊。

血细胞分析仪异常细胞警示与镜检的比较分析

目的对仪器提供的异常细胞警示进行可行性分析,建立镜检复查标准,为临床提供更准确的信息,同时提高工作效率。方法对不同警示信号的标本分别进行血细胞分析仪测定及显微镜检查,以镜检为标准,将血细胞分析仪测定结果与之进行对比,并进行循证分析。结果显微镜计数有警示者,各种警示的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比及准确度各不相同。CELLDYN3700血细胞分析仪对异常细胞的警示具有一定的可信性,但都有一定的假阳性和假阴性。结论对于结果有异常报警的标本,白细胞计数可以不进行显微镜检查,但血细胞分类必须进行显微镜检查。CELLDYN3700血细胞分析仪对异常细胞的警示只能起到过筛作用,并不能完全代替显微镜检查。

湖北省汉族人群MICA基因外显子2～4的多态性分析

目的了解湖北省汉族正常人群中MICA等位基因的分布，为研究MICA基因与疾病的关系提供实验基础。方法采用PCR-SSP方法对193例湖北地区汉族正常人群MICA基因外显子2-4的多态性进行分析。结果MICA各等位基因分布频率存在差异，其中以MICA＊00801／02等位基因频率最高（33．7％），其次为MICA＊010（18．4％）、MICA＊00201／020（13．9％）和MICA＊01201／02（9．6％），频率最低的是MICA＊005（0．5％）和MICA＊027（0．5％）。结论湖北地区汉族人群MICA等位基因的构成与其他人群之间存在差异，有自己的分布特征。